MALDI-TOF MS在血流感染快速鉴定病原菌中的应用

目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)结合短时培养在快速鉴定血流感染病原菌中的应用。方法对南京医科大学附属淮安第一医院微生物室2020年11月至2021年12月血培养报告阳性的标本进行革兰染色分类,并采用4h和6h短时培养法及MALDI-TOF MS技术快速鉴定感染病原菌并实时报送病区单元。结果4h短时培养革兰阴性菌共351株,339株(96.6%)细菌鉴定到种属,与24h鉴定结果相同,11株无鉴定结果,1株鉴定错误;6h短时培养革兰阳性菌共216株,212株(98.1%)鉴定到种属,与24h鉴定结果相同,3株无鉴定结果,1株鉴定错误。跟踪321株革兰阴性菌的临床反馈,287例(89.4%)给予临床关注,89例(27.7%)进行药物调整,238例(74.1%)临床疗效良好;跟踪183株革兰阳性菌的临床反馈,其中150例(82.0%)给予临床关注,49例(26.8%)进行药物调整,131例(71.6%)临床疗效良好。结论MALDI-TOF MS技术结合短时培养方法可有效提高血流感染病原菌鉴定准确率,改善血流感染患者抗菌药物治疗时机。

社区及医院感染大肠埃希菌产AmpC酶、ESBLs检测与耐药性分析

目的探讨引起社区和医院感染的大肠埃希菌产AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及其对常用抗菌药物的耐药性,以指导临床合理选择抗菌药物。方法采用头孢西丁酶提取物三维试验测定AmpC酶;双纸片协同试验和纸片确证试验筛选并确认产ESBLs菌株。结果143株大肠埃希菌产AmpC酶、ESBLs及AmpC酶+ESBLs的总检出率分别为4.90%、28.67%、2.10%。非产酶株总耐药率,医院感染株为35.36%,社区感染株为21.85%,两者比较,差异有显著性(P<0.05);产酶株总耐药率两者分别为73.40%、75.60%,差异无显著性(P>0.05)。社区和医院感染的非产酶菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、环丙沙星等常用抗菌药物都有较高的耐药率,分别为57.58%、39.39%、42.42%、39.39%及77.97%、71.19%、66.10.%、54.24%;产酶菌株的耐药率均高于上述平均水平。所有被测药物中,亚胺培南/西司他丁敏感性最高,未出现耐药株。结论社区感染的大肠埃希菌非产酶株耐药率明显低于医院感染株。大肠埃希菌耐药的主要原因是产ESBLs和AmpC酶;亚胺培南/西司他丁为目前大肠埃希菌产酶株感染的临床经验首选用药。

氨基糖苷类修饰酶基因aac(2')-Ib型在耐药鲍曼不动杆菌中流行

目的调查一组耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类的耐药机制。方法收集2013年1至3月江苏省淮安市第一人民医院住院患者标本中分离到的鲍曼不动杆菌共32株,用分子鉴定法确认为鲍曼不动杆菌,再用聚合酶链反应(PCR)方法分析9种氨基糖苷类修饰酶基因与7种16S r RNA甲基化酶基因。结果本组32株耐药鲍曼不动杆菌共检出5种氨基糖苷类修饰酶基因:aac(2')-Ib 32株(100.0%)、aac(3)-I 15株(46.9%)、aac(6')-Ib 19株(59.4%)、ant(3'')-I 20株(62.5%)、aph(3')-I 19株(59.4%),与1种16S r RNA甲基化酶基因arm A 25株(78.1%)。阳性基因共分为7种检测模式,其中以aac(2')-Ib+aac(3)-I+aac(6')-Ib+ant(3'')-I+aph(3')-I+arm A等6种基因均阳性的模式最高,为12株(37.5%)。结论产5种氨基糖苷类修饰酶基因(aac(2')-Ib、aac(3)-I、aac(6')-Ib、ant(3'')-I、aph(3')-I)与1种16S r RNA甲基化酶基因arm A是本组耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类耐药的重要原因。在鲍曼不动杆菌临床分离株检出aac(2')-Ib型氨基糖苷类修饰酶基因为国内首次报道。

重症监护病房革兰阴性杆菌耐药性研究

目的 了解某院重症监护病房分离的革兰阴性 (G-)杆菌产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)和对常用抗菌药物的药敏情况。方法 采用浓度梯度法 (E test)检测 1 5 6株 (G-)杆菌的最低抑菌浓度 (MIC) ,并采用双纸片协同试验和纸片确证试验筛选和确认产ESBLs的菌株。结果 肠杆菌科非产ESBLs和产ESBLs的菌株总药物敏感率分别为 80 .4 6 %和 5 7.6 9% ,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢吡肟、头孢他啶等三代头孢菌素和加酶抑制剂复合抗菌药物及庆大霉素、环丙沙星等抗菌药物的耐药率差异有显著性 (P <0 .0 5 )。肠杆菌科菌株对第三代头孢菌素的耐药率以头孢他啶 1 4 .32 %为最低 ;对亚胺培南的耐药率 ,产ESBLs菌株和非产ESBLs菌株均为 0。铜绿假单胞菌和不动杆菌属对亚胺培南的耐药率分别为 4 0 .5 2 %和 8.82 %。结论 加强对细菌耐药性的监测 ,合理选择抗菌药物 。

某院2006—2009年血液培养病原体分布及耐药性变迁

目的了解某院近4年血液培养标本分离的病原体构成及其耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2006年1月—2009年12月该院门诊及住院患者送检的血液培养标本资料,并对其分离病原体分布及耐药性作统计分析。结果 4年血液培养标本分离病原体633株,阳性率10.32%(633/6 135)。其中,革兰阴性(G^-)菌240株(37.92%),革兰阳性(G^+)菌354株(55.92%),假丝酵母菌属39株(6.16%)。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌为检出病原体的前3位,分别占18.17%、17.22%、15.64%。G^-菌对亚胺培南最敏感,耐药率仅为1.67%;对氨苄西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南的耐药率,2009年显著高于2006年(P<0.05)。G^+菌对万古霉素除发现2株肠球菌属菌株耐药外,未发现其他耐药菌株;对青霉素、头孢噻肟、左氧氟沙星、克林霉素、阿奇霉素的耐药率呈不断上升趋势,2009年显著高于2006年(P<0.05)。结论该院血液培养病原体中,金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌分别居检出G^+菌和G^-菌的首位,耐药菌株逐年增加;应及时检测病原体及其耐药性,指导临床合理用药。

带状疱疹患者血清白细胞介素及病毒抗体检测的意义

目的探讨辅助性T细胞(Th1)相关细胞因子白细胞介素-2(IL-2)和Th2相关细胞因子IL-10与带状疱疹病毒抗体IgG、IgM在带状疱疹患者血清中的变化及作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验定量检测86例重症、轻症和恢复期带状疱疹患者和20例健康对照者血清IL-2、IL-10水平,同时检测带状疱疹病毒IgG、IgM抗体水平。结果重症带状疱疹患者血清中IL-10及IgG抗体水平均高于健康对照组和轻症组(P<0.05),但重症带状疱疹患者血清中IgG抗体水平与IL-10无相关性(r=0.163)。结论重症带状疱疹患者血清IL-10水平升高,提示Th2相关细胞因子功能亢进可能是引起带状疱疹患者细胞免疫功能下降而发病的重要因素之一。

类风湿关节炎患者中抗环瓜氨酸肽抗体检测的临床意义

目的探讨抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体对诊断类风湿关节炎(RA)的临床价值。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测417例RA,576例非RA和100例健康体检者中抗环瓜氨酸肽抗体,用速率散射比浊法检测类风湿因子(RF),采用相关方法进行统计分析。结果抗CCP抗体对RA诊断的敏感性,特异性分别为76.5%,95.4%.RF对RA诊断敏感性和特异性分别为80.3%,78.0%,两者联合检测的敏感性为91.4%,特异性为98.0%。抗CCP抗体与RF检测结果相关性无统计学意义(P>0.05)。结论用ELISA方法检测抗CCP抗体可作为RA的辅助诊断指标,有很好的临床应用价值。

血清抗C1q抗体在系统性红斑狼疮及狼疮性肾炎中的临床诊断价值

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清抗C1q抗体与疾病活动及狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)的相关性.方法采用ELISA法测定110例SLE患者和60例正常对照组血清中抗C1q抗体的水平.110例SLE患者按LN判定标准分为LN组(41例)和非LN组(69例).比较分析其与补体C3、C4、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)及疾病活动性指标抗双链DNA(anti-double-stranded DNA antibody,anti-dsDNA)抗体的相关性,并通过联合检测抗核小体抗体(anti-nucleosome antibodies,AnuA)及抗dsDNA抗体判断其在LN中的临床价值.结果SLE患者中血清抗C1q抗体水平高于正常对照组[(11.90±23.83)U/mL vs(2.73±4.18)U/mL,P<0.05].LN患者血清中抗C1q抗体水平与抗dsDNA抗体、hs-CRP水平呈显著正相关,与补体C3、C4含量水平呈显著负相关.联合检测抗C1q抗体、抗dsDNA抗体和AnuA显著提高LN的诊断价值.结论抗C1q抗体水平能反映SLE的疾病活动程度,并与SLE肾损害相关,联合检测抗C1q抗体、抗dsDNA抗体和AnuA有助于LN的诊断.

乙型肝炎病毒血清标志物与前S1抗原检测结果分析

目的通过对9 018例血清标本的血清标志物与前S1抗原检测,观察前S1抗原在乙型肝炎诊断与治疗中意义。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒血清标志物与前S1抗原,并对乙型肝炎病毒血清标志物不同组合模式的前S1抗原阳性率加以比较与分析。结果在9 018例标本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性866例,占总例数9.60%,大三阳模式的前S1抗原检测阳性率达87.55%,小三阳模式的前S1抗原检测阳性率为64.24%,其他模式也有不同前S1抗原检出率。结论前S1抗原检测比乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)更敏感,可作为乙型肝炎病毒感染与复制以及治疗和预后观察指标。

血清肌钙蛋白I与心肌酶谱对老年急性心肌梗死诊断价值分析

急性心肌梗死（AMI）患者由于心肌供血不足,细胞受损破坏,细胞内容物渗出进入血循环,血清乳酸脱氢酶（LDH）,肌酸激酶（CK）及其同功酶（CK-MB）作为上述标志物已被应用于临床多年,不足之处是心肌酶组织特异性不高,酶活性检测精确度不高,且灵敏度不足以辅助确诊AMI[1]。对临床上没有典型心电图改变的初诊AMI患者来说,cTnI被认为是临床诊断AMI的确诊标记物,但是目前国内大多数医院仅对cTnl进行定性测定,未能反应出患者体内cTnI水平,

93例女性生殖道感染念珠菌菌种分布及药敏结果分析

目的:明确93例女性生殖道念珠菌感染菌种分布及药敏。方法:收集93例女性生殖道感染患者分泌物,采用Sabouraud琼脂培养基进行菌落培养,血清芽管试验及CHROMagar显色培养基进行菌株的筛选,DL-96 FUNGUS念珠菌鉴定系统进行念珠菌鉴定及药敏试验。结果:菌种构成分布依次为白念珠菌81株(87.10%),光滑念珠菌8株(8.60%),都柏林念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各1株(1.08%)。白念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%,其它依次为伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)和伊曲康唑(62.96%)。光滑念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%,其它依次为伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)和伊曲康唑(25.00%)。结论:女性生殖道感染的念珠菌主要菌种是白念珠菌,敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶。

临床感染常见肠球菌的耐药现状分析

目的了解引起临床感染的常见肠球菌耐药现状,为临床抗肠球菌感染提供选药依据。方法采用VITEK-32全自动细菌鉴定药敏仪及配套鉴定、药敏板监测172株粪肠球菌和68株屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药率。补充药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果粪肠球菌对青毒素、氨苄西林的耐药率分别为23.26%和19.76%,而屎肠球菌对上述两药的耐药率分别为85.62%和90.83%;粪肠球菌对利福平、呋喃妥因、左氧氟沙星的耐药率分别为32.33%、18.98%、39.05%,而屎肠球菌对上述药的耐药率分别为84.63%、35.29%、75.00%;经统计分析,粪肠球菌与屎肠球菌的耐药率差异有显著性(P<0.01)。粪肠球菌对高浓度庆大霉素(500mg/L)、链霉素(2000mg/L)的耐药率分别是54.85%、51.74%,而屎肠球菌却为71.16%、70.15%;发现1株粪肠球菌对万古霉素耐药。结论屎肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,应根据肠球菌的种类和药敏试验结果确定用药方案;警惕耐万古霉素肠球菌的出现,动态监测肠球菌的耐药状况对指导临床治疗具有重要意义。

383例呼吸道感染血清肺炎支原体抗体检测结果分析

目的 探讨血清肺炎支原体检测在诊断呼吸道感染中的价值。方法 采用金标免疫斑点法。结果 383例呼吸道感染患者MP—Ah检测,总阳性数为261例,阳性率为68.15％.其中IgG“-”/IgM“+”104例,占27.15％,大于IgG“+”/IgM“+”89例,占23.24％,大于IgG“+”/IgM“-”68例,占17.75％.阴性122例,占31.85％。结论 血清支原体抗体检测,可提供快捷简便可靠的诊断依据,适用于各级医院。

特发性血小板减少性紫癜患儿IL-4 IL-10及血小板相关抗体IgG IgM的检测和临床意义

目的 探讨辅助性T细胞 2 (Th 2 )相关细胞因子白细胞介素 4 (IL 4 )、白细胞介素 10 (IL 10 )与血小板相关抗体 (PAIgG、PAIgM)在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿中的变化和作用。 方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附定量测定技术检测 4 0例ITP患儿和 15例正常对照组血清中IL 4、IL 10水平 ,同时检测PAIgG、PAIgM的水平 ,并与ITP患儿外周血中血小板计数等指标进行相关性分析。结果 ITP患儿血清中IL 4、PAIgG、PAIgM水平均高于对照组 (P均 <0 .0 1) ,ITP病例治疗半年前后血清中IL 4、PAIgG、PAIgM水平变化无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;ITP患儿血清中IL 4与PAIgG水平呈显著正相关 (r =0 .6 6 3,P <0 .0 5 ) ,而PAIgG水平与外周血中血小板计数呈高度负相关 (r= 0 .72 6 ,P <0 .0 1)。结论 ITP患儿IL 4水平升高 ,提示Th 2相关细胞因子功能亢进 。

泸州市畜禽养殖保险的调查与思考

如何规避市场风险，降低养殖成本，提高规模养殖效益．已成为现代养殖业亟需研究解决的新课题。四川泸州市近年来在部分区县探索性地开展了畜禽养殖保险工作，取得了一些有益的经验。

化脓性链球菌毒力基因检测及模式分类分析

目的调查60株化脓性链球菌毒力基因存在状况及毒力基因携带模式。方法 60株化脓性链球菌分离自2014年1月至2017年10月南京医科大学附属淮安第一医院与南京中医药大学附属医院急性扁桃体炎患者的病灶部位拭子标本。采用PCR及序列分析的方法分析侵袭性酶毒力基因(hyl A、spe B、endo S)、超抗原毒力基因(sme Z)、免疫逃逸毒力基因(sic)及黏附素毒力基因(prt F1)等6种毒力基因,并基于阳性检出模式进行毒力基因分类。结果侵袭性酶spe B、endo S基因和超抗原sme Z基因检出率均达100%,hyl A检出率为50%,sic检出率为23.3%,prt F1未检出。根据毒力基因检测结果,60株化脓性链球菌可分为4种类型,检出hyl A、spe B、endo S、sme Z等4种毒力基因有29株(48.3%),检出spe B、endo S、sme Z等3种毒力基因17株(28.3%),检出spe B、endo S、sme Z、sic等4种毒力基因13株(21.7%),检出hyl A、spe B、endo S、sme Z、sic等5种毒力基因1株(1.7%)。结论临床分离化脓性链球菌侵袭性酶spe B、endo S基因和超抗原sme Z基因检出率均达100%,推测其可能是化脓性链球菌感染导致感染灶局部炎症和坏死的原因之一。

重症监护患者下呼吸道感染常见病原菌的耐药性分析

目的:调查我院重症监护患者下呼吸道感染常见病原菌的分布与耐药情况,为抗感染治疗提供依据。方法:对本院重症监护患者下呼吸道感染分离的312株致病菌用VITEK32全自动细菌鉴定及药敏系统进行细菌培养鉴定及药敏试验,部分药敏试验为K-B法。结果:感染革兰阴性杆菌62．8％。主要菌群有铜绿假单胞菌29．5％,鲍曼不动杆菌12．8％,肺炎克雷伯菌10．9％,大肠埃希菌5．8％,嗜麦芽窄食单胞菌5．1％等,革兰阳性球菌18．2％,真菌18．9％,头孢哌酮/舍巴坦和亚胺培南对革兰阴性杆菌搞菌活性较高,铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高,对亚胺培南的耐药率40．8％,革兰阳性球菌中金黄色葡萄球菌12．8％,耐苯唑西林金黄色葡萄球菌100％。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌ESBLs的检出率分别为39％、59％,真菌以白色念珠菌为主,对常用药物敏感性较高。结论:我院重症监护患者下呼吸道感染主要病原菌常为多重耐药的革兰氏阴性杆菌、MRSA,对常用抗菌药物耐药性较高,真菌所占比例也较高,加强细菌耐药性监测,合理使用抗生素对临床抗感染治疗十分重要。