乳腺间质CD34和平滑肌肌动蛋白免疫组化检测在乳腺癌诊断中应用

目的 :评价免疫组化检测乳腺间质纤维细胞CD34和平滑肌肌动蛋白 (SMA)表达在乳腺癌诊断中价值。方法 :6 7例乳腺活检组织进行CD34和SMA免疫组化检测 ,其中乳腺癌 4 2例 ,乳腺良性病变 2 5例。观察各类乳腺病变间质的CD34和SMA表达状况 ,并分析CD34和SMA表达的相关性。结果 :2 5例良性病变中CD34表达 10 0 % (2 5 / 2 5 ) ,SMA表达 4 8% (12 / 2 5 )。 34例浸润性乳腺癌 (不包括 8例单纯导管内癌 )CD34全部缺乏表达 (0 /34) ,SMA表达 10 0 % (34/ 34)。CD34和SMA表达在乳腺浸润性癌和乳腺良性病变中表达的差异均具有显著性 (P<0 .0 1和P <0 .0 1)。导管内癌 (单纯导管内癌 8例和伴有浸润性癌的导管内癌成分 13例 )导管周围间质的纤维细胞CD34和SMA表达不均一 ,呈现为不同程度丢失CD34表达和获得SMA表达 ,并且CD34和SMA的表达呈负相关 (r= 0 .931,P <0 .0 1)。结论 :本研究结果表明乳腺间质纤维细胞CD34表达缺乏是浸润性乳腺癌间质改变的一项敏感指标。导管内癌管周间质的纤维细胞CD34和SMA表达不均一体现了从原位癌向浸润性癌发展的过程 ,因此 ,导管内癌管周间质丢失CD34+ 纤维细胞同时出现SMA+ 肌纤维母细胞反应可能是癌细胞向间质浸润的前兆。

E-cadherin标记体腔积液中癌细胞的价值

目的评价E-cadherin抗体辨认体腔积液内癌细胞的价值。方法采用石蜡细胞块技术对62例恶性体腔积液标本和22例间皮增生的体腔积液标本进行免疫细胞化学检测E-cadherin、BerEP4、CEA、Calretinin和Desmin,并计算各抗体辨认癌细胞或间皮细胞的敏感性和特异性。62例恶性体腔积液标本中癌性积液53例(包括肺非小细胞癌29例,肺小细胞癌2例,乳腺癌5例,胃癌4例,大肠癌3例,肝癌1例,食道癌3例,胰腺癌1例,卵巢癌4例,子宫颈癌1例),非癌性积液4例(包括淋巴瘤2例,骨髓瘤1例和恶黑1例),不明组织来源5例。结果62例恶性体腔积液标本E-cadherin的阳性率为85.5%(53/62)。去除不明组织来源和非癌性积液病例后,53例癌性积液的E-cadherin阳性率为88.7%(47/53),其中乳腺、食道、大肠和卵巢等部位来源的癌性积液的阳性率均为100%。而间皮细胞E-cadherin反应均为阴性。E-cadherin、BerEP4和CEA检测癌细胞的敏感性分别为88.7%、79.2%和67.9%,E-cadherin、BerEP4和CEA检测癌细胞的特异性分别为96.2%、100%和92.3%。Calretinin和Desmin检测间皮细胞的敏感性100%和91%,特异性分别为94.7%和100%。结论本组研究结果表明E-cadherin是一个体腔积液内癌细胞的敏感和特异的标记,可以作为免疫细胞化学鉴别良恶性体腔积液的抗体组合成员之一。

细胞角蛋白亚型和TTF-1判断癌性体腔积液原发灶的价值

目的:评价细胞角蛋白亚型(CKs)和甲状腺转录因子-1(TTF-1)对判断癌性体腔积液原发灶的价值。方法:收集100例新鲜体腔积液,其中62例为癌性积液,5例非上皮性恶性体腔积液,33例为良性积液。采用石蜡包埋细胞块技术和免疫细胞化学技术对100例体腔积液标本检测CK5/6,CK7、CK18、CK19、CK20和TTF-1的表达状况。结果:CK5/6表达见于肺、子宫颈和食管来源的鳞癌细胞。CK18表达仅见于腺癌细胞。CK5/6(+)/CK18(-)检测鳞癌细胞的敏感性为83.3%,特异性为100%。CK5/6(-)/CK18(+)检测腺癌细胞的敏感性为89.8%,特异性为100%。CK7(-)/CK20(+)仅见于大肠腺癌。肺腺癌细胞TTF-1表达阳性率为78.6%,小细胞癌阳性率为100%。TTF-1诊断肺腺癌细胞的敏感性为78.6%,特异性为97.1%。结论:单独的细胞角蛋白亚型检测对于判断体腔积液癌细胞来源具有局限性,采用组合细胞角蛋白各亚型和TTF-1对于判断体腔积液癌细胞来源仍有重要参考价值。

透明脱蜡液在乳腺及子宫标本中对免疫组化ER、PR染色的影响

高质量的切片是保证病理诊断准确性的基础，许多石蜡切片在诊断过程中需加做免疫组化染色。目前国内绝大多数医院的病理切片制作仍采用传统的石蜡切片技术。在制片过程中，组织的透明以及切片的脱蜡环节均采用二甲苯作为溶剂。二甲苯在常温下极易挥发，对环境造成污染。为避免二甲苯对人体的危害及对环境的污染，近年对病理切片制作过程中采用无苯溶剂的呼声越来越高[1]。任何对切片技术的改良必须确保所制作切片的质量，以免影响诊断。为此，本文采用环保组织透明脱蜡液替代二甲苯，观察其对组织切片质量及免疫组化ER、PR结果的影响，以期消除病理切片过程中苯的危害。

免疫细胞化学鉴别良恶性体腔积液的抗体选择和组合

目的优化免疫细胞化学鉴别良、恶性体腔积液的抗体选择和组合。方法对病理学诊断明确的67例恶性和22例良性体腔积液标本采用石蜡细胞块和免疫细胞化学技术检测13种抗体。单因素方法分析每个抗体的敏感性和特异性。Logistic回归分析不同抗体组合对良、恶性体腔积液诊断的准确性。结果检测体腔积液内肿瘤细胞敏感性最高的抗体是E-cadherin,为85.1%。其次是BerEP4和CK7,敏感性分别为82.1%和80.6%。检测肿瘤细胞特异性最强的抗体是E-cadherin、BerEP4和CK20,特异性均达到100%。Calretinin检测间皮细胞的敏感性和特异性分别为100%和95.5%,Desmin检测间皮细胞的敏感性和特异性分别为90.9%和100%。Logistic回归分析显示Calretinin是统计学上判断良、恶性体腔积液最佳的单个抗体,Calretinin和E-cadherin是区分良、恶性体腔积液最有效率的抗体组合。结论结合单因素和多因素分析结果,我们推荐E-cadherin、BerEP4、Calretinin和Desmin作为日常免疫细胞化学鉴别良、恶性体腔积液的抗体组合。

乳腺导管内癌围管性微血管密度与浸润的关系

目的 评价围管性微血管密度(MVD)在预测乳腺导管内癌向浸润性癌转化中的价值。方法 6 2例乳腺癌(包括单纯导管内癌12例、伴浸润癌导管内癌13例和浸润性癌37例)进行CD34和F8免疫组化染色,并采用计算机图象分析方法定量乳腺癌微血管密度。同时,对微血管密度与导管内癌的组织病理特征及ER、PR、Her- 2和Ki- 6 7表达的关系进行分析。结果 非肿瘤区、单纯导管内癌、伴有浸润性癌的导管内癌及浸润性癌四组的CD34(+)MVD分别为79.4 5±4 5 .2 3、15 8.39±5 7.2 4、82 .83±37.2 7和10 1.81±4 6 .0 8(个/mm2 ) ,四组间差异有显著意义(P =0 .0 0 0 )。单纯导管内癌CD34(+)MVD较非肿瘤区小叶、伴浸润性癌导管内癌和浸润性癌增加。F8(+)MVD分别为10 8.81±4 9.94、33.4 5±17.79、76 .92±2 5 .14和6 6 .0 1±32 .0 9(个/mm2 ) ,四组间差异有显著性(P =0 .0 0 1)。单纯导管内癌F8(+)MVD较非肿瘤区小叶、伴浸润癌导管内癌和浸润性癌下降。CD34(+)MVD与导管内癌的核分级Ⅲ级、粉刺型及较高的Her- 2和Ki- 6 7的表达相关;但是,F8(+)MVD与导管内癌的核分级、组织类型及Her- 2和Ki - 6 7的表达无关。结论 CD34(+)MVD可以作为预测乳腺导管内癌向浸润癌转化的一项风险指标。

大鼠糖尿病性阴茎勃起功能障碍模型的建立

目的探讨链霉佐菌素(STZ)腹腔注射法建立糖尿病(DM)阴茎勃起功能障碍(ED)动物模型的可行性,以便找到一种发病机制与临床接近的疾病模型。方法模型组雄性大鼠,腹腔注射STZ;正常对照组大鼠,腹腔注射枸椽酸钠液。4d后,快速法测定血糖;10周后,分别测定2组大鼠阴茎海绵体内压(ICP)。结果动物模型血糖浓度:实验组(335.8±62.8)mg/dl显著高于对照组(99.4±24.4)mg/dl(p<0.01)。DM大鼠基础ICP和刺激勃起神经ICP均明显低于正常大鼠(p<0.01)。结论腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠出现典型的糖尿病临床症状,血糖明显增高,ICP下降,勃起功能明显受损。

人日本血吸虫性大肠纤维化胶原蛋白和细胞因子观察

目的观察日本血吸虫病传播阻断后人大肠纤维化胶原蛋白和细胞因子的改变。方法在日本血吸虫病传播阻断达标10年地区收集102例血吸虫感染患者大肠标本,在组织切片上进行Ⅰ-Ⅳ型胶原蛋白以及转化生长因子β1（TGFβ1）、碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的免疫组化染色和定量分析。收集同期51例无血吸虫感染者大肠标本作对照。结果102例血吸虫感染患者大肠肠壁内虫卵均已死亡和钙化。26份标本（25.5%）在死亡和钙化虫卵周围发现肉芽肿反应。虫卵高密度组（〉60个/mm^2）大肠的Ⅰ-Ⅲ型胶原平均吸光度（A）值均较对照组增高,而Ⅳ型胶原平均A值下降。Ⅰ-Ⅲ型胶原平均A值的增加均与肉芽肿反应呈正相关。血吸虫感染大肠肉芽肿组的TGFβ1、bFGF和MMP-1的平均A值分别高于对照组,而TIMP-1的A值低于对照组。结论参与日本血吸虫性大肠纤维化的胶原蛋白和细胞因子含量与虫卵密度、纤维化时期和有无肉芽肿反应有关。

几种常用的核染色标记物pH 6.0 Citrate和pH 9.0 Tris/EDTA修复液的比较

目的探讨pH 6.0 Citrate和pH 9.0 Tris/EDTA两种修复液在常用的免疫组化核染色标记物中的染色效果。方法选取本科室常用的3种核/浆标记抗体以及22种核标记抗体分别采用pH 6.0 Citrate和pH 9.0 Tris/EDTA微波热修复进行比较。结果在25种抗体中,其中有11种分别用pH 6.0 Citrate和pH 9.0 Tris/EDTA微波修复染色效果基本一致,在其余14种抗体中,有11种用pH 9.0 Tris/EDTA微波热修复方法进行修复时,阳性信号明显增强;而有3种抗体用pH 6.0 Citrate微波热修复方法进行修复时,阳性信号稍增强。结论对于这25种抗体来说,如果用微波加热的方法进行抗原修复,那么pH 9.0 Tris/EDTA优于PH 6.0 Citrate。

肾上腺髓质脂肪瘤的诊治(附19例报告)

目的探讨肾上腺髓质脂肪瘤(Adrenalmyelolipom a,AML)的临床特点,提高AML诊治水平。方法对19例经病理学证实的AML患者的临床资料进行回顾性分析,并结合文献复习就其发病情况、临床表现、诊断、病理组织学特点、治疗和预后进行讨论。结果14例患者无任何临床症状,3例有腰部胀痛,1例有高血压。13例行开放手术,6例行腹腔镜下手术。病理检查均显示肿瘤由成熟脂肪细胞和骨髓造血细胞组成。结论绝大多数AML为偶发瘤,影像学检查有助于术前诊断,确诊需病理证实,腹腔镜下手术治疗是首选。

Ki-67检测结果与乳腺癌临床病理指标的相关性分析

Ki-67已成为预测乳腺癌患者治疗反应以及预后的重要生物学标志物。其检测一般采用免疫组织化学方法，但是目前尚无统一的操作指南对乳腺癌Ki-67免疫组织化学检测进行规范。我们采用组织芯片和计算机图像分析技术分析、评价各因素对Ki-67染色结果的影响，建立了乳腺癌Ki-67标准化免疫组织化学检测流程，并通过与乳腺癌分子分型等临床病理参数的相关性分析进一步验证其临床应用的有效性，为乳腺癌Ki-67规范化检测提供依据。

基底细胞样型乳腺癌的临床病理观察

目的观察基底细胞样型乳腺癌（BLBC）的临床病理特征。方法采用ER、PR、HER2、Ki-67、CK5／6、CK14和表皮生长因子受体（EGFR）进行免疫组织化学EnVision法检测458例女性浸润性乳腺癌以筛选BLBC，比较BLBC与其他免疫表型乳腺癌的临床病理特征。对其中228例浸润性乳腺癌患者进行了随访。结果458例浸润性乳腺癌中发现BLBC46例（10．0％）。癌灶直径平均3．3cm。58．7％（27／46）出现推挤性生长方式，52．2％（24／46）出现地图状坏死，30．4％（14／46）癌灶中心出现无细胞纤维化区域以及63．0％（29／46）癌灶周边和间质内有不同程度淋巴细胞浸润。癌细胞异型性明显，核分裂象多见，主要排列成不规则、紧密实性结构。Ki-67高表达（〉25％）在BLBC中占43．5％（20／46）。CK5／6、CK14和EGFR阳性分别见于58．7％（27／46）、43．5％（20／46）和65．2％（30／46）的BLBC病例。BLBC的3年累积生存率为66．9％，低于管腔A型乳腺癌，与HER2高表达型乳腺癌差异无统计学意义。结论BLBC在女性浸润性乳腺癌中所占比例为10％，其组织结构和细胞形态具有一定特征性，但诊断BLBC仍必需结合其免疫表型。BLBC是预后比较差的乳腺癌亚型之一。

乳腺癌SKP2及Thr187磷酸化p27kipl的表达及其预后意义

p27kipl（简称p27）是由Polyak等发现的一种相对分子质量为27000的热稳定蛋白，是重要的细胞周期负性调控因子，其蛋门水平的表达及功能异常与肿瘤的发生、发展及预后密切相关．肿瘤细胞中存存多种转录后调控机制凋节p27蛋h的表达，磷酸化测节是最重要的途径之一。

乳腺癌上皮间质转化与基底细胞样表型的关系

目的评价乳腺癌上皮间质转化（EMT）与基底细胞样型乳腺癌（BLBC）的关系。方法依据免疫表型从458例浸润性乳腺癌中筛选出基底细胞样型、管腔A型、管腔B型和HER2过表达型共382例。免疫组织化学EnVision二步法检测FOXC-2、波形蛋白、Syndecan-1和E—cadherin在乳腺癌中表达，并分析其与BLBC的关系。结果41例BLBC中癌细胞FOXC-2、波形蛋白和Syndecan-1的阳性率以及E—cadherin表达减弱率分别为34．1％（14／41）、43．9％（18／41）、87．7％（36／41）和63．4％（26／41）。BLBC的FOXC-2和波形蛋白阳性率均高于其他亚型乳腺癌，其E—cadherin表达较其他亚型乳腺癌下降（P〈0．01）。BLBC肿瘤间质细胞Syndecan-1阳性率为41．5％（17／41），高于其他亚型乳腺癌（P=0．007）。癌细胞FOXC-2表达与波形蛋白表达呈正相关（r=0．607，P〈0．01）。FOXC-2和波形蛋白阳性组腋窝淋巴结转移率分别为71．4％和66．7％，分别高于阴性组（P=0．002和P=0．001）。结论本结果显示乳腺癌中EMT与BLBC关系最密切。EMT可能是造成BLBC与其他亚型乳腺癌生物学行为差异的重要原因。

雌、孕激素受体和Her-2阴性乳腺癌的临床病理特征

目的评价雌、孕激素受体和Her-2表达均阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）的临床病理特征及其对预后的影响。方法500例乳腺癌采用免疫组化筛选TNBC，观察TNBC的临床病理特征，并对其中243例乳腺癌进行临床随访。结果500例乳腺癌中TNBC占17．6％（88／500）。组织学类型主要为浸润性导管癌（NOS）、化生性癌和髓样癌。组织分级Ⅲ级占72．7％（64／88），高于激素受体阳性组和Her-2高表达组（P=0．000）。TNBC中CK5／6阳性率30．7％（27／88），EGFR阳性率34．1％（30／88）。TNBC中ERCC1和KIT阳性率分别为28．4％（25／88）和34．1％（30／88），均分别高于激素受体阳性组和Her-2高表达组（P=0．032和P=0．026）。TNBC3年累积生存率为71．5％，低于激素受体阳性组（P=0．021），与Her-2高表达组差异无统计学意义（P=0．474）。结论TNBC是～类具有高侵袭性病理特征和预后不良的乳腺癌；部分病例表达EGFR和ERCC1。

基底细胞样乳腺癌免疫组化特征及其意义

[目的]探讨基底细胞样乳腺癌(BLBC)的免疫组化特征及其意义。[方法]采用免疫组化检测46例BLBC中细胞角蛋白、肌上皮标记以及EGFR、p53、ERCC1、cKit和Ki67的表达,并通过与激素受体阳性乳腺癌(HR+乳腺癌)的比较,分析BLBC免疫组化特点。[结果]58.7%和43.5%BLBC组织中分别表达高分子角蛋白CK5/6和CK14。32.6%、13.0%、15.2%和15.2%BLBC分别表达肌上皮标记SMA、p63、CD10和S100。高分子角蛋白和肌上皮标记表达率均高于HR+乳腺癌。BLBC中Vimentin、p53和Ki67阳性率分别为45.7%、60.9%和43.5%,均高于HR+乳腺癌。EGFR、ERCC1和cKit阳性率分别为65.2%、34.8%和30.4%,与HR+乳腺癌比较差异均有统计学意义。[结论]BLBC是一组可表达高分子角蛋白及肌上皮标记、细胞增殖活跃和具有侵袭倾向的乳腺癌。EGFR和ERCC1检测可用于指导临床治疗。