红刺老苞醇提物对MH7A细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的通过PI3K/Akt信号通路,探讨红刺老苞对类风湿关节炎的作用机制。方法在滑膜细胞(MH7A)中添加LPS建立类风湿关节炎(RA)模型,通过CCK-8法筛选药物浓度;实验分为空白对照组、模型组、红刺老苞高剂量组、红刺老苞中剂量组、红刺老苞低剂量组;取不同浓度的红刺老苞醇提物作用于MH7A细胞;用流式细胞术检测细胞凋亡的情况;ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β的水平;Western-blot法检测PI3K、p-AKT、Becline1蛋白的表达。结果经不同浓度红刺老苞醇提物(750、650、550μg/mL)处理后,细胞凋亡率随药物浓度上升而增加,凋亡率分别为(3.07±0.03)%、(5.27+0.30)%、(8.04+0.02)%;与对照组相比,模型组细胞上清中IL-1β、TNF-α含量明显升高(P<0.05),而红刺老苞高、中、低剂量组IL-1β、TNF-α水平较模型组明显降低(P<0.05);模型组PI3K、P-AKT蛋白表达较对照组相比明显升高(P<0.05),Becline1表达量降低(P<0.05);与模型组比较,红刺老苞高、中、低剂量组PI3K、p-AKT蛋白表达明显降低(P<0.05),Becline1表达量升高(P<0.05)。结论红刺老苞醇提物能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进自噬,抑制RA滑膜细胞增殖及炎性因子的表达。