重庆地区β地中海贫血研究

目的 研究重庆地区β地中海贫血的检出率及基因突变类型。方法 采用醋酸纤维薄膜血红蛋白(Hb)电泳、抗碱Hb试验对6436学生进行轻型β地贫筛查及家系追踪调查,并对7例重型β地贫用寡核苷酸探针杂交技术鉴定β地贫基因突变型。结果 筛检出轻型β地贫149人,检出率为2.31％。7例重型β地贫的基因有6种突变类型,其中一种为CaP下游第40-43位核苷酸序列发生缺失(-AA AC)。结论 重庆地区在全国范围内属β地贫高发区之—,7例重型β地贫基因鉴定出6种突变类型,发现一种新的突变类型,提示重庆地区β地贫基因异质性复杂,这可能与重庆地区人口来源的多重性有关。

干、湿化学检测系统测定肾功能高值标本时稀释液的选择与评价

目的系统评价不同稀释液对干化学、湿化学检测系统测定肾功3项高值标本的影响,确定理想的稀释液。方法收集接近各系统肾功能3项检测上限的新鲜血清,分别用蒸馏水(DH2O)、生理盐水(NS)、7%小牛血清(7%BSA)、混合血清进行倍比稀释(最高稀释倍数为1∶32),在美国强生Vitros 350干化学分析仪和日本日立7600全自动生化分析仪上分别测定,然后进行偏差分析和线性评价。结果在湿化学检测系统上,尿素用NS、BSA、混合血清稀释,偏差分析均符合要求。肌酐、尿酸用DH2O、BSA、混合血清均符合要求。在干化学检测系统上,尿素、尿酸用DH2O和混合血清稀释均符合要求,肌酐除了BSA外各稀释液均符合要求。根据分析测量范围评价(AMR),在湿化学检测系统中,尿素、肌酐、尿酸用4种稀释液稀释后均符合要求;在干化学检测系统中,尿素只有DH2O和混合血清稀释后符合要求,肌酐只有NS和混合血清稀释后符合要求,尿酸用4种稀释液稀释后均符合要求。结论混合血清是最理想的稀释液。

部分生化项目不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估

目的:通过对同一实验室不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估,探讨各检测系统之间检测结果是否具有可比性。方法:按照NCCLS EP9-A2文件的要求,以检测系统1(X):日立7600全自动生化分析仪P1模块,迈克试剂,c.f.a.s.校准品和BIO RAD质控品作为目标检测系统,检测系统2(Y1)和检测系统3(Y2)作为比较检测系统,在各自系统中通过检测病人新鲜血清天门冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alamine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转移酶(Gamma-glutamyl transferase,GGT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Creatinine,Cr)、尿酸(Uricacid,UA)水平来计算比较检测系统和目标检测系统之间的相对偏差(%SE),以美国临床实验室修正法规(CLIA’88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断各检测系统间测定结果的临床可接受性。结果:各检测系统间检测结果显著相关(r2>0.95),临床可接受性能评价中检测系统2(Y1)Urea低浓度水平时SE%>1/2CLIA’88TEa,与检测系统1(X)不具有可比性,其余各项测定结果偏倚评估临床可接受。结论:除低水平Urea外,AST、ALT、GGT、ALP、Cr、UA检测结果在我院3套检测系统间具有可比性。

利福平对肝肾功能指标检测的影响

目的 研究利福平对肝肾功能指标检测的影响。方法 将利福平对倍稀释成不同的浓度 ,分别加入到正常混合血清中 ,以正常混合血清为对照组 ,在全自动生化分析仪上同时测定各组的肌酐 (creatinine,Cr)、尿酸 (uricacid ,UA)、直接胆红素 (di rectbilirubin ,DBIL)、总胆红素 (totalbilirubin ,TBIL)并比较各组结果。比较 16位健康志愿者服用利福平前后的Cr、UA、DBIL、TDIL检验结果 ,并观察利福平对这些项目的光谱学影响。结果 利福平对DBIL、TBIL的测定有正相干扰 ,对Cr、UA的测定则有负相干扰。干扰的程度与加入血清中的利福平的浓度均呈线性关系。服用利福平 ,对DBIL、TBIL、Cr的测定结果亦可产生影响。利福平对DBIL、TBIL、Cr、UA测定可产生光谱学干扰。结论 利福平影响血中Cr、UA、DBIL、TBIL的测定 ,干扰机制可能与利福平具还原性并可与钒酸盐产生特殊颜色反应有关。

慢性HBV携带者血清中肝功能相关蛋白检测的临床意义

目的了解慢性HBV携带者血清中肝功能相关蛋白胆碱脂酶(Ch E)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TRF)、铁蛋白(FRT)、C反应蛋白(CRP)、铜蓝蛋白(CER)的水平,并且探讨这些蛋白对慢性HBV携带者的诊断价值。方法选取2012年1月至2014年7月在重庆医科大学附属永川医院就诊的86例慢性HBV携带者作为观察组,另外选取102例健康体检者作为对照组,分别检测其血清中Ch E、Alb、PA、TRF、FRT、CRP、CER等生化指标,并对部分观察组人群进行肝穿刺活组织检查。计量资料组间比较采用独立样本t检验。结果观察组与对照组的CER水平分别为(0.20±0.04)g/L、(0.29±0.06)g/L,差异有统计学意义(t=2.03,P=0.03),其他指标差异均无统计学意义(P值均>0.05);观察组中,肝脏炎症程度高或纤维化程度高的患者血清中CER水平下降明显,差异均有统计学意义[(0.23±0.01)g/L vs(0.18±0.02)g/L,t=-2.6,P=0.01;(0.22±0.02)g/L vs(0.17±0.04)g/L,t=-3.2,P=0.004)。结论血清中CER水平的变化能反映早期肝脏炎症和纤维化程度,并可能成为慢性HBV携带者早期诊断与治疗的重要指标。

HBV感染者血清转氨酶与胆碱脂酶、白蛋白、前白蛋白的关系

目的探讨乙肝病毒(HBV)感染者血清转氨酶(ALT/AST)与胆碱脂酶(CHE)、前白蛋白(PA)、白蛋白(ALB)的关系,以评价各指标对HBV感染者的诊断价值。方法用全自动生化分析仪检测245例HBV感染者血清ALT、AST、CHE、PA、ALB,根据ALT/AST水平分为ALT/AST正常组、ALT/AST轻度异常组、ALT/AST异常组,对各组之间CHE、ALB、PA进行差异比较,并对各组CHE、ALB、PA与AST/ALT之间做相关分析;根据CHE的水平分为CHE正常组、CHE轻度异常组、CHE异常组,对各组之间ALB、PA进行差异比较,并对各组ALB、PA与CHE之间做相关分析。结果以血清ALT/AST分组,血清CHE、ALB、PA结果ALT/AST正常组大于ALT/AST轻度异常组,差异均有统计学意义(CHE:t=-3.536,P<0.05;ALB:t=-4.343,P<0.05;PA:t=-4.722,P<0.01),血清PA结果ALT/AST轻度异常组大于ALT/AST异常组,差异有统计学意义(t=-2.566,P<0.05),而血清CHE、ALB结果ALT/AST轻度异常组与ALT/AST异常组之间差异均无统计学意义(CHE:t=-1.111,P>0.05,ALB:t=-0.494,P>0.05),血清ALT/AST与CHE、ALB、PA之间均有显著相关性(分别为-0.373、-0.380、-0.442),三组内异常率PA>CHE>ALB;以血清CHE分组,血清ALB、PA结果 CHE正常组大于CHE轻度异常组,差异均有统计学意义(t=8.340,P<0.05;t=4.822,P<0.05),CHE轻度异常组大于CHE异常组,差异均有统计学意义(t=7.302,P<0.05;t=4.941,P>0.05),CHE与ALB、PA之间均有显著相关性(分别为0.825、0.753),三组内异常率为PA>ALB。结论血清肝功能指标与肝损伤指标密切相关;反映肝功能损害程度的血清生化指标是PA>CHE>ALB;对HBV感染者,血清PA可能有早期诊断肝功能损害的价值。

RT-PCR检测尿液中细胞角蛋白20mRNA与尿细胞学检查对膀胱癌诊断的荟萃分析

目的用荟萃(Meta)分析评价逆转录PCR(RT-PCR)技术检测尿液中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)20 mRNA和尿细胞学检查对膀胱癌的诊断意义。方法检索Pub Med、Web of Science、The Cochrane Library(2014年第1期)、EMbase、CNKI、VIP、CBM数据库,查找关于用RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA与尿细胞学检查诊断膀胱癌的研究。根据QUADAS质量评价标准评价纳入文献质量,用Meta-Disc 1.4软件进行荟萃分析。结果最终纳入11篇研究文献,涉及研究对象共1 631例。Meta分析结果显示,RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA和尿细胞学检查诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比汇总及95%CI分别是0.80(0.78,0.83)vs 0.53(0.49,0.56)、0.93(0.91,0.95)vs 0.90(0.88,0.93)、12.46(5.22,29.75)vs 6.04(3.37,10.84)、0.22(0.18,0.28)vs 0.51(0.42,0.63)。RT-PCR检测CK20 mRNA和尿细胞学检查诊断膀胱癌的敏感性随肿瘤分级、分期的升高而增高。两种检测方法的SROC曲线下面积分别是0.872 6和0.795 4,Q*指数分别是0.803 0和0.731 9。结论 RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA诊断膀胱癌的敏感性高于尿细胞学检查,更适于膀胱癌的诊断。

TRIB3基因rs2295490多态性与2型糖尿病合并冠心病的相关性

目的探讨TRIB3基因rs2295490多态性与2型糖尿病(T2DM)和T2DM合并冠心病(CHD)的关系。方法用基因测序方法对126例健康对照组、101例T2DM组、94例T2DM合并CHD组TRIB3基因rs2295490多态性进行分型,同时对其生化指标如空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(Hb A1c)等进行检测。结果 3组间TRIB3基因rs2295490多态性基因型和等位基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05)。健康对照组中AA基因型TG水平明显低于AG+GG基因型(P<0.05);T2DM组中AA基因型TC与TG水平明显低于AG+GG基因型(P<0.05);T2DM+CHD组AA基因型TC、TG、LDL-C水平明显低于AG+GG基因型(P<0.05),AA基因型HDL-C水平明显高于AG+GG基因型(P<0.05)。结论 TRIB3基因rs2295490多态性与T2DM合并CHD无明显关联,但可能与T2DM及T2DM并发CHD患者的血脂异常有关。

日立7170和日立7600生化分析仪测定血糖结果的可比性分析

目的探讨不同检测系统之间血糖检测结果是否具有可比性。方法按照NCCLS EP9-A2文件的要求,以检测系统1(X):日立7600全自动生化分析仪P1模块,迈克试剂,C.f.a.s.校准品和BIO-RAD质控品作为目标检测系统,检测系统2(Y1)和检测系统3(Y2)作为比较检测系统,在各检测系统中通过检测患者血葡萄糖水平来计算比较检测系统和目标检测系统之间的相对偏差(SE%),以美国临床实验室修正法案(CLIA′88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断各检测系统间测定结果的临床可接受性。结果各检测系统间检测结果总体差异无统计学意义(P>0.05),检测结果明显相关(r2>0.95),测定结果偏倚评估临床可接受。结论血糖检测结果在该院3套检测系统间具有可比性。

肾上腺素对临床生化检验结果的干扰

目的 研究肾上腺素对常用临床生化检验项目的体外分析干扰。方法 将肾上腺素对倍稀释成不同的浓度 ,分别加入到正常混合血清中 ,以正常混合血清为对照组 ,在全自动生化分析仪上同时测定各组的FMN、Cr、UA、TG、TCH、DBIL、LD、HDL -C值 ,将结果进行统计学处理。结果 肾上腺素对FMN的测定有很强的正相干扰 (P <0 .0 1 ) ,对LD的测定有正相干扰 (P <0 .0 1 ) ,对Cr(P <0 .0 1 )、UA(P <0 .0 1 )、TG(P <0 .0 1 )、TCH(P <0 .0 1 )、HDL -C(P <0 .0 1 )、DBIL(P<0 .0 5)的测定有负相干扰。结论 肾上腺素干扰血清中的FMN、Cr、UA、TG、TCH、HDL -C、LD、DBIL的测定。

Hb D Punjab基因的鉴定——DNA 扩增在异常血红蛋白研究中的应用

本文应用作者设计的寡核苷酸引物和探针,通过聚合酶链反应(PCR)扩增β珠蛋白DNA序列,并通过限制酶EcoRI酶谱分析或寡核苷酸杂交,快速鉴定Hb D Punjab基因。应用这种技术先后对汉、藏、哈萨克等3个民族4个家系的Hb D Punjab基因进行了鉴定。

贝克氏型肌营养不良症女性患者的家系分析研究

目的 对贝克氏型肌营养不良症女性患者的家系追踪研究。方法 磷酸肌酸激酶、α 羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶等采用酶速率法测定 ,肌酸激酶同工酶 ,采用选择性抑制法测定。肌红蛋白采用ELISA法。基因分析 ,抽提家系成员的DNA ,进行PCR扩增 ,扩增片段长度多态性的检测采用银染色法。结果 先证者的母亲的肌酸激酶等酶升高 ,先证者及 2个妹妹的肌酸激酶、肌红蛋白显著异常升高。基因分析 ,家系 1 (Ⅰ 2 )先证者母亲的MP1P 5′CA 4 4、4 9片段为杂合 ,先证者 (Ⅱ 1 )未检出杂合片段 ,先证者的 2个妹妹 (Ⅱ 2、Ⅱ 3)的 5′CA4 5内含子有杂合。结论 先证者的母亲是贝克氏型肌营养不良症致病基因携带者 ,先证者父母是近亲婚配 ,近亲婚配的遗传效应很高 ,她将致病基因遗传给先证者及 2个女儿 ,使兄妹 3人都是贝克氏型肌营养不良症患者。

幽门螺杆菌感染与胃癌及癌前病变中癌基因蛋白表达的关系

近年来,众多流行病学资料提示,幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)感染与胃癌的 Hp 发生密切相关.动物实验证实,Hp 慢性感染易引起胃粘膜组织恶性转化.但其致癌机制未明,更缺乏直接的分子生物学证据.作者通过研究 Hp感染对胃粘膜细胞增殖动力学的影响以及与胃癌和胃粘膜炎性病变中癌基因蛋白 P21,c-myc,c-erbB-2及抑癌基因蛋白 P53表达的相关性,以进一步探讨 Hp 感染与胃癌发生的关系及其可能的致癌机制.1 材料和方法1.1 材料本院1996-01/1998-12经内镜和(或)手术病理诊断明确者(除外曾作胃大部切除和检查前2 mo 接受过抗 Hp治疗者)共307例,包括正常胃粘膜18例,慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis CSG)67例,慢性萎缩性胃炎(chronicatrophic gastritis CAG)70例,不典型增生(dysplasia Dys)61例和胃癌(gastric cancer GCa)91例.1.2 方法1.2.1 细菌学检查①尿素酶试验:采用福建三强公司HpUTSQ-H104快速诊断试剂盒检测.②Hp

重庆地区G6PD缺乏调查报告

重庆永川县、綦江县G6PD缺乏总发生率为3.80％，基因频率为0.39，女性杂、纯合子发生率（估计值）为7.66％，属全国高发地区。G6PD变异型鉴定，发现多种变异型，并提示Ⅱ、Ⅲ类变异型都可以形成蚕豆病的遗传背景。

四川省血红蛋白E病的研究

应用醋酸纤维薄膜电泳筛测３４６８２名汉族小学生，检出血红蛋白Ｅ（ＨｂＥ）先证者４５人，检出率为０．１２９％。经一级结构分析证实为β链第２６位的谷氨酸被赖氨酸替代（即β２６ＧＡＡ→ＡＡＧ）。调查３０个家系的家系成员９８人，检出ＨｂＥ携带者５４人，阳性率为５５％，符合常染色体显性遗传规律。家系调查还发现１０例ＨｂＥ复合β地中海贫血的双重杂合子患者，这些病人有血液学和Ｈｂ异常，长期靠输血维持生命。

血清酶动力学法对进行性肌营养不良症假性肥大型检测的初步研究

本文用酶动力学法对19例DMD患者进行CPK、α—HBDH、LDH、AST活性进行测定,测定值升高率分别为100％、94.7％,84.2％、94.7％。用CPK对12个DMD先证者之母进行筛检,检出67％的女性携带者。14例DMD患者进行CPK同功酶(CK—MB)测定,总活性均升高,升高率为100％,但CK—MB与CPK之比值均小于5～10％,提示CK—MB的升高可能是由于骨骼肌损伤所致。结果表明,CPK及CK—MB测定方法快速、灵敏、准确,是筛检DMD患者及携带者的实用诊断指标,其他血清酶可作辅助诊断指标。

重庆地区红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症基因频率及变异型研究

1985～1988年对重庆地区5348人进行G6PD缺乏症的普查,并对有蚕豆病史者的G6PD变异型进行鉴定,现将结果报告如下。对象与方法一、对象:输血员、农民、幼儿园儿童及中小学学生,男性3330人,女性2018人。二。

Hp感染与胃癌中癌基因和抑癌基因蛋白表达的关系

目的 研究Hp感染与胃癌发生的关系及其可能的致癌机制。方法 经内镜和病理诊断的胃癌 91例 ,用快速尿素酶试验 ,改良W S银染色和PCR方法检测上述标本中Hp ;以S P免疫组织化学法检测P2 1、P5 3、C mcy及C erbB 2 ,并用阳性表达积分半定量和免疫组化图像分析进行比较。结果 Hp阳性胃癌组 (44例 )的P2 1、P5 3、C myc及C erbB 2表达阳性率较Hp阴性胃癌组 (47例 )为高。Hp阳性组这 4种癌基因蛋白的阳性表达积分、平均光密度和积分光密度均显著高于Hp阴性组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。 结论 Hp感染与胃癌中P2 1、P5 3、C myc及C erbB 2的异常表达密切相关 ,提示Hp感染可使胃粘膜细胞的癌基因活化和抑癌基因突变或失活 。