G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人黑色素瘤细胞周期的进程

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在人皮肤黑色素瘤A375细胞中处于高表达与高活性状态,但G6PD在黑色素瘤发生发展过程中的作用及其具体机制尚不明确.本文在前期运用siRNA方法构建G6PD敲减的黑色素瘤A375稳转细胞(A375-G6PDΔ)基础上,构建表达载体pBabe-puro-G6PDWT在A375-G6PDΔ细胞中过表达野生型的G6PD基因,从而构建G6PD表达恢复的稳转细胞(A375-G6PDΔ-G6PDWT).3株细胞A375-WT、A375-G6PDΔ和A375-G6PDΔ-G6PDWT经G6PD酶活性测定、MTT测定、克隆形成实验、流式细胞仪分析细胞周期和Western印迹检测.结果显示,A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞的G6PD蛋白表达量(0.847±0.080)及其活性(0.394±0.029)分别是A375-G6PDΔ的3.28倍(P<0.01)和7.34倍(P<0.01),分别是A375-WT细胞的91.57%和2.12倍(P<0.05).与A375-WT细胞相比,A375-G6PDΔ细胞G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,增殖指数PI降低了25.70%(P<0.05),细胞周期蛋白D1/D2、细胞周期蛋白E表达分别下降37.4%、54.3%(P<0.01)和17.3%;而A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞呈现G1/S期阻滞解除,细胞周期蛋白D1/D2蛋白分别恢复到A375-WT细胞的89.5%和87.6%,细胞周期蛋白E表达未见恢复,呈现生长增殖和克隆形成率的恢复并接近于A375-WT细胞.结果提示,G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人皮肤黑色素瘤A375细胞G1期向S期转换的进程,这为黑色素瘤发病机制的研究提供了新的思路.

“大”、“小”隐喻英汉对比分析

认知语言学认为空间隐喻在人类的认知活动中扮演着重要的角色,许多抽象的概念必须通过空间隐喻来构成,物体形状隐喻属于空间隐喻的范畴。文章通过对物体形状的最基本概念“大、小”的隐喻认知模式及语言表达的英汉对比分析,探讨了物体形状隐喻在规模、数量、社会地位、性质、年龄、品质、强度、程度等概念域中的异同。

字本位理论与英汉对比研究

字本位理论认为“字”是汉语的基本结构单位 ,汉语研究应以“字”为本位。字本位理论是汉语研究的一条全新的思路 ,是汉语语言哲学上的一场变革。字本位理论的提出 ,不仅对汉语研究具有深远的意义 ,而且对英汉对比研究也产生了积极的影响。本文从英汉对比研究的角度分析了字本位理论对对比研究的认识论。

浅谈行政事业单位国有资产的预算管理

提出行政事业单位国有资产预算管理的基本内涵,阐述实施国有资产预算管理的原则与作用,在分析目前我国行政事业单位国有资产预算管理中存在问题的基础上,提出了制定行政事业单位国有资产预算编制的流程、建立行政事业单位国有资产的政府采购制度、建立资产统一调剂制度、建立和完善资产报废制度、建立资产利用效率评价制度等相关对策。

隐喻的英汉对比研究述评

近年来 ,越来越多的学者对隐喻进行了研究。其中 ,一些学者把目光投向隐喻的英汉对比研究。研究的内容主要为情感隐喻的英汉对比研究 ,空间隐喻的英汉对比研究 ,时间隐喻的英汉对比研究等。本文对这些研究成果进行了述评 。

听写的神经认知基础

本文运用神经语言学、心理语言学和认知心理学等理论和方法,初步探讨了听写过程的神经机制,建立了听写过程的认知模式,详细说明了认知模式各环节的功能及运行方式。听写的认知过程可分为信息输入、信息的浅层次加工、中层次加工、深层次加工及信息输出等环节。

浅谈独立学院预算管理中的成本控制

独立学院是一种全新的办学体制,加强独立学院的预算管理,建立一个有效的成本控制系统,达到预算执行主体自我考核的最高境界,是目前独立学院管理中必须解决的问题之一。首先对成本项目进行收集,再明确会计原则,并以此为依据考核成本控制的结果,可以基本实现预算管理的目标。

略论汉语“话题—说明”思维方式在英语学习中的负迁移

从语言类型学的角度 ,比较了英语和汉语的语言特征 ,认为英语是主谓结构语言 ,突出的是主语 ;而汉语是“话题—说明”结构语言 ,突出的是话题。在此基础上 ,明确指出中国学生在学习英语过程中由于受到汉语“话题—说明”思维方式的影响 ,容易产生负迁移现象 ,即把汉语的主谓词组、动宾词组以及时间、处所短语当作英语的主语 ,把汉语的主题成分当作英语的主语 ,把汉语的被动结构当作英语的主动结构等。

高校设备物资采购招投标环节管理存在的问题及对策

高校设备物资采购实行公开招标对节约采购资金、规范采购行为、实现廉洁采购等有着重要意义。然而有的高校对招投标环节管理不严,有的人通过在其中的项目论证、采购文件编制、组织开标评标和合同履行阶段等环节违规操作谋取不当利益,违背了高校实施招投标的初衷。针对高校设备物资采购招投标环节存在的问题,提出通过规范一般性采购流程以及应用现代信息技术改造传统流程两大措施实现廉洁采购,从而保障高校健康发展。

G6PD缺陷抑制人黑色素瘤细胞裸鼠移植瘤的生长

敲减葡糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)表达的人黑色素瘤A375细胞(A375-G6PDΔ)呈现生长增殖抑制和凋亡率升高.为明确G6PD缺陷对裸鼠体内成瘤的影响及其可能机制,用A375-WT与A375-G6PDΔ细胞制作裸鼠荷瘤模型,观察体内瘤体生长,real-time PCR、免疫组织化学染色与紫外分光光度法分别检测瘤体组织G6PD mRNA、G6PD蛋白及酶活性,Western印迹分析凋亡相关蛋白,分光光度法测定NADPH和GSH/GSSG水平.结果显示,A375-G6PDΔ细胞注射组的裸鼠成瘤时间延长,瘤体生长明显减慢,瘤体的体积与质量显著低于A375-WT细胞注射组(P<0.01);与A375-WT细胞注射组相比,A375-G6PDΔ细胞注射组的裸鼠瘤体组织中G6PD mRNA表达、G6PD阳性细胞数与G6PD活性分别降低了87.10%、77.20%与75.77%(P<0.01),G6PD、p53和Bcl-2的表达分别降低了67.92%、65.54%和62.32%(P<0.01),Fas升高了86.38%(P<0.01),NADPH和GSH/GSSG分别降低了74.37%和86.02%(P<0.01).结果提示,G6PD缺陷可能通过减少核酸等合成的原料、改变细胞内氧化还原状态及凋亡相关蛋白表达抑制裸鼠瘤体生长与增殖,这为黑色素瘤发生和治疗研究提供了新的线索.

我国政府与公立高校关系研究——基于委托代理理论视野

改革开放全面深入以及社会主义市场经济体制日趋成熟,社会转型加速导致教育观念发生深刻变革,传统的政校关系难以适应开放市场,在一定程度上阻碍了高等教育的国际接轨和高校发展。基于委托代理理论视角,剖析政校关系现状与成因,结合《国家中长期教育改革和发展规划纲要》,提出建立新型的政府与高校委托代理关系。

基于反馈加权组合的电力市场下中长期负荷预测方法

本文简单分析了几种常用的中长期负荷预测方法存在的缺点,针对电力市场环境下对负荷预测精度的高要求,提出了一套精度较高且实用的中长期负荷预测的方法.应用该方法对广西某地方电网进行负荷预测,计算结果表明,该方法的预测结果误差小,在实际预测领域有较高的实用价值.

广西南部电网安全稳定控制系统配置方案研究

为了保障广西南部电网安全稳定运行,通过对2012年500 kV海港和久隆变扩建工程投产后的广西南部电网进行安全稳定计算,校核广西南部电网现有安全稳定控制系统能否满足电网运行要求。

G6PD缺陷通过Caspase-3和PARP-1诱导人黑色素瘤细胞凋亡

葡糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在许多肿瘤细胞中高表达,但其发生的作用机理目前仍然不明确.以正常人表皮黑色素细胞(HEM)、野生型人黑色素瘤A375细胞(A375-WT)和G6PD缺陷的A375细胞(A375-G6PDΔ)为对象,经real-time PCR、Western印迹和紫外分光光度法分析显示,A375-WT细胞的mRNA、G6PD蛋白和G6PD活性分别是HEM细胞的1.89倍(P<0.05)、6.86倍(P<0.01)和2.30倍(P<0.05).Annexin V/PI流式细胞仪和Western印迹测定表明,A375-G6PDΔ的凋亡率是A375-WT的5.10倍(P<0.01),活化半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)增高1.84倍(P<0.01)以及89 kD多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)生成增加2.87倍(P<0.01).分光光度法分析显示,A375-G6PDΔ的NADPH和GSH分别降低了72.30%(P<0.01)和27.39%(P<0.05),并伴有75.43%的H2O2增高(P<0.01).结果提示,G6PD在黑色素瘤细胞中高表达和高活性,而敲减G6PD表达通过caspase-3和PARP-1信号诱发人黑色素瘤细胞凋亡,这为深入揭示黑色素瘤的发生机理提供了新思路。

电气化铁路供电系统二次装置配置方案的研究

以柳州至南宁客运专线为基础研究对象,根据电气化铁路供电的特点对其进行系统继电保护、安全自动装置及谐波监测装置配置方案的研究,并提出方案及建议。

英汉语言基本组织规律对比研究——主谓一致原则VS音义互动律

主谓一致原则是英语基本组织规律,音义互动律是汉语的基本组织规律.通过对英汉这两种语法现象的对比,我们得出以下的结论:1)主谓一致原则和音义互动律都是英汉各自的刚性语法;2)英语为形足型语言,汉语为音足型语言.

习惯性流产患者绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡的检测及其临床意义

目的探讨绒毛和蜕膜中调节性T细胞(Treg)/Th17免疫失衡在习惯性流产(RSA)患者免疫发病机制中的作用。方法收集RSA患者和自愿终止妊娠的早孕妇女(正常对照组)的绒毛和蜕膜,采用流式细胞术检测其中Treg和Th17细胞数量,采用RT-PCR检测其中叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)的mRNA水平;收集RSA患者和正常对照组的外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-10、IL-17A和IL-17F的水平;统计分析Treg细胞和其相关细胞因子、Th17细胞和其相关细胞因子之间的相关性。结果和正常对照组比较,RSA患者绒毛和蜕膜中Th17细胞明显增多(均P<0.01),Treg细胞明显减少(均P<0.01),RORγt的mRNA水平明显升高(均P<0.01),Foxp3的mRNA水平明显降低(均P<0.01);RSA患者外周血中IL-17A和IL-17F水平明显升高(均P<0.01),TGF-β和IL-10水平明显降低(均P<0.01);RSA患者和正常对照组Treg细胞数量和TGF-β及IL-10水平、Th17细胞数量和IL-17A及IL-17F水平均呈正相关(均P<0.01)。结论绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡可能与RSA的免疫发病机制有关。

正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围的建立及其临床意义

目的建立本地区正常孕妇早、中、晚孕期甲状腺激素的参考值范围，探讨其变化规律及临床意义。方法采用罗氏E601电化学发光仪测定本地区单胎妊娠健康妇女早、中、晚孕期及年龄匹配非妊娠妇女的甲状腺激素水平并建立各自的参考范围。其中孕早期448例，孕中期451例，孕晚期428例，非妊娠妇女150例。结果早、中、晚孕妇女及非妊娠妇女的甲状腺激素水平均呈偏态分布，以中位数（M）及双侧限值（P2．5～P97．5）表示其参考范围。TSH在早[1．10（0．23～3．58）]、中[2．07（0．13～3．96）]、晚孕期[2．62（1．08～3．62）]逐渐上升，各期两两比较差异有统计学意义（P〈0．017），晚孕期略低于非妊娠妇女[2．63（1．00～5．14）】但差异无统计学意义（P〉0．05）。FT3和FT4在早[4．80（4．25～6．23）；17．56（11．65－22．16）]、中[4．45（3．84～5．18）；14．16（9．49～20．14）]、晚孕期[4．14（3．98～4．45）；12．38（10．13～15．88）]逐渐降低，各期两两比饺差异有统计学意义（P〈0．017），早孕期低于非妊娠妇女[5．01（4．02~6．12）；18．71（14．35－21．69）]且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论正常孕妇的甲状腺激素水平明显不同非妊娠妇女，早、中、晚孕期之间也存在显著差异，建立正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围将有助于妊娠期甲状腺功能紊乱的临床诊疗。

STAT信号通路与黑色素瘤

信号转导和转录激活因子(signal transducers and activators of transcription,STAT)的家族成员STAT1、STAT3、STAT5与黑色素瘤的发生发展密切相关。本文就STAT1、STAT3、STAT5与黑色素瘤的发生、转移以及治疗等的关系的研究进展作一概述。

G6PD缺陷诱发人黑色素瘤A375细胞凋亡机制研究

目的:探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺陷对A375细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:以A375-WT和A375-G6PDΔ细胞为模型,用Real-time PCR检测G6PD mRNA表达,蛋白质印迹法检测G6PD、Bcl-2、Bcl-xL、STAT5和P-STAT5蛋白的表达,紫外分光光度法测定G6PD酶活性,Heochst 33342/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化观察STAT5蛋白核迁移。结果:A375-WT和A375-G6PDΔ细胞中G6PD mRNA分别为0.545±0.13和0.207±0.03,降低了62.02%,t=-5.854,P=0.028;G6PD蛋白分别为0.975±0.16和0.227±0.10,降低了76.72%,t=-21.593,P=0.002;G6PD酶的比活性分别为(0.088±0.023)和(0.024±0.008)U/mg;降低了72.23%,t=-7.390,P=0.018;A375-G6PDΔ细胞的凋亡率为(8.62±1.67)%,比A375-WT细胞的(2.37±0.78)%升高了3.64倍,t=-12.163,P=0.007;A375-G6PDΔ细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量为0.245±0.037,比A375-WT细胞的0.578±0.073降低了57.61%,t=-16.021,P=0.004;Bcl-xL的表达量为0.138±0.019,比A375-WT细胞的0.287±0.067降低了51.92%,t=-5.377,P=0.033;A375-G6PDΔ细胞的P-STAT5/STAT5比值为0.72±0.201,比A375-WT细胞的2.28±0.367降低了68.4%(P=0.004),细胞核内STAT5表达为0.051±0.012,比A375-WT细胞核的STAT5蛋白(0.093±0.018)降低了45%(P=0.007),STAT5核迁移减少。结论:转录因子STAT5磷酸化降低、活性下降是G6PD缺陷所诱发的人黑色素瘤A375细胞凋亡的重要因素之一,为黑色素瘤发生及治疗的研究提供了新的思路。