环孢素A与雷公藤对IL-1α诱导的人外周血单核细胞IL-6和IL-8 mRNA表达的影响

用重组人ＩＬ１α在体外诱导人外周血单核细胞表达ＩＬ６和ＩＬ８，并用ＲＴＰＣＲ检测环孢素Ａ（ＣｙＡ）及雷公藤提取物Ｔ０对ＩＬ６和ＩＬ８ｍＲＮＡ表达的影响，以探讨这两种细胞因子作为抗银屑病药物作用靶位的病理意义及雷公藤治疗银屑病的作用原理。结果显示Ｔ０能降低ＩＬ６和ＩＬ８ｍＲＮＡ水平，ＣｙＡ明显下调ＩＬ８ｍＲＮＡ水平，而对ＩＬ６ｍＲＮＡ表达仅在０１和１０μｇ／ｍｌ浓度有抑制作用，且只有０１μｇ／ｍｌ组有统计学意义。研究表明，Ｔ０的效价和作用较ＣｙＡ高和强。该研究为两药的抗银屑病作用提供了一定的药效学依据。

趋化因子受体CXCR3 mRNA在银屑病患者皮损部位的表达

目的:了解CXCR3 mRNA在银屑病皮损部位的表达水平及其与银屑病区域严重性指数(PASI)的关系。方法:应用RT-PCR法检测了33例银屑病患者皮肤中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康对照;将检测结果与PASI进行了相关性分析。结果:银屑病皮损部位真皮CXCR3 mRNA表达水平为1.44±0.67,明显高于对照(0.59±0.29,P<0.01)及非皮损部位皮肤(1.00±0.75,P<0.01),但与PASI之间无相关性;银屑病非皮损部位真皮该受体的表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。结论:CXCR3参与了银屑病真皮的病理变化。

几种治疗银屑病 寻常痤疮药物体外抗白细胞趋化活性观察

目的 体外定量研究几种治疗银屑病、寻常痤疮药物的抗白细胞趋化活性。方法 采用琼脂糖平板法观察药物对甲酰三肽 (fMLP)诱引的WBC移动距离的影响。结果与结论 受试药中 :丙酸氯倍他索 (CP)、全反式维A酸(RA)、蒽林 (ATL)、雷公藤内酯醇 (T0 )、四环素 (TE)、氧氟沙星 (OF)、盐酸克林霉素 (CL )、氯霉素 (CHLO)、CP+RA和CL +RA对人WBC趋化性有不同程度的抑制作用 ,且量 -效关系显著。抑制WBC趋化活性的IC5 0 值分别为 0 .78,9.69,1.0 5,8.5× 10 - 4,9.89,2 .59,8.2 7,0 .2 7和 4.57μg/ml。CHLO和环孢素A (CyA)

银屑病患者淋巴细胞与中性粒细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达

目的:了解银屑病患者外周血淋巴细胞与中性粒细胞中CXC型趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达水平及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测进行期斑块型银屑病患者33例及其中16例患者治疗后外周血淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康人作为正常对照,并将检测结果与PASI进行了相关性分析.结果:斑块型银屑病患者外周血淋巴细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.12±0.81,明显高于健康对照组(0.28±0.28,P<0.01)与治疗后患者(0.57±0.61,P<0.05),并与PASI之间呈明显正相关(r=0.516,P<0.05);而中性粒细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.72±1.68,与健康对照组(1.27±1.17)及同一组患者治疗后(1.27±1.01)相比均无明显差异(P>0.05).结论:CXCR3可能主要通过活化与趋化外周血淋巴细胞而参与了银屑病的发病机制.

乳杆菌活菌对金葡菌、大肠埃希菌和白色假丝酵母菌实验性混合感染阴道炎的疗效研究

目的:通过实验动物体内药效学试验,研究乳杆菌活菌治疗细菌性和真菌性混合感染阴道炎的疗效及改善阴道内环境菌群失调的作用。方法:采用金葡菌(S.aureus)、大肠埃希菌(E.coli)和白色假丝酵母菌(C.albicans)实验性混合局部感染实验动物阴道后,用大、中、小3种剂量组(分别为6.31×108,3.15×108和1.58×108cfu/mL.kg-1)乳杆菌活菌悬液作局部治疗7d,同时以盐酸左氧氟沙星15mg/kg加氟康唑1mg/kg联合给药作对照组;分别从阴道外观检查、阴道分泌物涂片镜检、分泌物微生物选择性培养和阴道黏膜组织病理学检查诸方面评价疗效。结果:大剂量组和阳性药组在治疗后阴道外观、分泌物涂片革兰染色白细胞检查及细菌学检查结果均与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);S.aureus,E.coli培养结果,大、中剂量组和阳性药组转阴明显,经比较分析,差异有统计学意义(P<0.01);C.albicans培养除对照组外,其余各组均阴转;大剂量组3/5实验动物乳酸杆菌培养阳性,提示阴道内环境有所改善;而阳性药组培养阴性,提示在抗生素治疗后阴道炎症状虽消退,但阴道内环境未能恢复;阴道组织病理检查显示,治疗后炎症反应均有不同程度的减轻,并具有量-效关系。各组动物治疗前后总分平均值及疗效评估结果,大、中、小3种剂量组有效率分别达90.32%,68.42%和18.42%;在抗感染治疗的同时,大剂量组乳杆菌活菌还可纠正阴道正常菌群的失衡。结论:乳杆菌活菌治疗细菌性和真菌性混合感染阴道炎的疗效明显,改善阴道内环境菌群失调的作用显著。(1)(2)(3)(4)(5)

异甘草酸镁对人表皮角质形成细胞炎症因子的产生和外周血白细胞趋化功能的影响

目的:研究异甘草酸镁对角质形成细胞产生促炎症细胞因子、黏附分子和对白细胞趋化功能的影响,以获得异甘草酸镁治疗炎症性皮肤病的药理学基础。方法:采用2 000 U/mL rhIFN-γ诱导人表皮角质形成细胞HaCaT细胞,用ELISA法检测不同浓度的异甘草酸镁对HaCaT细胞IL-8、IL-6和ICAM-1产生的影响;通过琼脂糖平板法在显微镜下观察药物对10 nmol/L甲酰甲二磺酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)诱引的人白细胞移动距离的影响。结果:异甘草酸镁能剂量依赖性地抑制rhIFN-γ刺激引起的IL-8、IL-6和ICAM-1的产生,其IC50值分别为1.21、7.23和4.17μg/mL;对fMLP诱引的人外周血白细胞趋化功能有明显影响,其抑制作用呈剂量依赖性,IC50值为8.58μg/mL。结论:异甘草酸镁可通过抑制人表皮角质形成细胞IL-8、IL-6、ICAM-1产生和白细胞趋化达到治疗炎症相关性皮肤病的作用。

盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化和角质形成细胞细胞因子产生的影响

目的研究盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化、角质形成细胞增殖、以及白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1(IL-1)产生的影响,探索该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。方法体外培养小鼠脾脏T淋巴细胞、永生化角质形成细胞株HaCaT细胞以及小鼠腹腔巨噬细胞,分别用伴刀豆球蛋白A(ConA)、重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)、312nm窄波UVB和脂多糖(LPS)诱导,采用MTT法检测盐酸13-己基小檗碱对小鼠T淋巴细胞活化和HaCaT细胞增殖的影响,用ELISA法检测其对HaCaT细胞IL-8和TNF-α,以及小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生的影响。结果盐酸13-己基小檗碱明显抑制小鼠T淋巴细胞活化(IC50≈0.123μg/ml);在0.05～0.78μg/ml范围对HaCaT细胞增殖无明显的直接影响(抑制率<15%),能剂量依赖性抑制25ng/ml rhTNF-α诱导的HaCaT细胞IL-8产生(IC50=0.13μg/ml)和124.2 mJ/cm2窄波UVB照射引起的HaCaT细胞TNF-α产生(IC50=0.21μg/ml);在0.01μg/ml浓度时抑制10μg/ml LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生(抑制率达50%)。结论盐酸13-己基小檗碱能抑制T淋巴细胞活化及炎症性细胞因子IL-8、TNF-α和IL-1β产生,提示以上作用可能是该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。

CX3C型趋化因子受体CX3CR1 mRNA在银屑病患者中的表达

目的:测定趋化因子受体CX3CR1 mRNA在银屑病患者中的表达水平及其与PASI之间的关系。方法:应用RT-PCR法检测了33例斑块状银屑病患者皮损处、非皮损处皮肤和淋巴细胞及其中16例治疗后患者淋巴细胞中CX3CR1 mRNA的表达水平,设30例健康人为对照组;将检测结果与PASI及皮损处与淋巴细胞中该受体的表达水平分别进行相关性分析。结果:CX3CR1mRNA表达水平:在银屑病治疗前与治疗后外周血淋巴细胞中分别为1.64±1.19与2.15±1.30,均明显高于对照组(0.72±0.72,P<0.001);在银屑病皮损处表皮中为1.33±0.40,明显高于对照组(0.89±0.26,P<0.001)及非皮损处皮肤(0.94±0.45,P<0.01);在银屑病皮损处真皮中为1.59±0.76,明显高于对照组(0.89±0.41,P<0.001)及非皮损处皮肤(1.21±0.53,P<0.01),并与PASI(r=0.601,P<0.001)及淋巴细胞中该受体的表达水平之间呈正相关(r=0.351,P<0.05),非皮损处真皮中CX3CR1 mRNA表达水平也高于对照组(P<0.05)。结论:CX3CR1可能主要通过参与活化、趋化淋巴细胞而在银屑病的发病机制及病理状态的维持中起到重要作用。

体外雷公藤内酯醇对白介素1和白介素2生成和活性的抑制

目的研究雷公藤内酯醇 (T0)对白介素 1、 2生成、活性的药效学作用，并与环孢素 A(CyA)作对比研究，以考核这两个细胞因子作为药物作用靶位及建立药效学方法的依据。方法大鼠腹腔巨噬细胞－大鼠胸腺细胞系统和大鼠脾细胞－小鼠 IL－ 2依赖细胞系统， [甲基 3H]胸腺嘧啶核苷掺入法。结果 T0和 CyA都能抑制大鼠巨噬细胞 IL－ 1和大鼠脾细胞 IL－ 2的生成，并呈量－效关系。 T0对 IL－ 1和 IL－ 2活性亦有抑制作用，而 CyA在药理浓度下无此作用。结论 T0和 CyA均为 IL－ 1和 IL－ 2生成强有力的抑制剂， T0的效价高于 CyA。对 IL－ 1和 IL－ 2的活性，两药作用不同。

酞丁安乳膏在大鼠局部皮肤上的毒理实验

目的研究酞丁安乳膏在大鼠体内的安全性,以了解酞丁安乳膏应用于局部皮肤后,对大鼠所产生的整体影响。方法给予大鼠局部皮肤酞丁安乳膏3个月,进行长期毒性试验。结果大鼠整体无明显异常。病理结果表明,酞丁安乳膏对各器官无明显毒性。结论酞丁安乳膏局部应用于大鼠皮肤较安全。

分枝杆菌感染肉芽肿体外模型的建立和验证

目的构建可用于分枝杆菌感染肉芽肿研究的体外模型。方法采用人免疫细胞分别与分枝杆菌（海鱼杆菌、结核杆菌、卡介苗及麻风杆菌）共培养的方法构建分枝杆菌感染肉芽肿体外模型，显微镜下动态观察肉芽肿的体外形成过程，并用流式细胞仪检测不同时期细胞表面抗原分子表达，实时定量PCR法检测细胞因子的mRNA表达及ELISA法检测重要细胞因子的分泌等。结果共培养7～9d后观察到与肉芽肿结构相似的细胞聚集团块，部分细胞形成多核巨细胞；CD14、CD68、CD80等巨噬细胞表面抗原在不同的分枝杆菌组均有阳性表达；肿瘤坏死因子α、干扰素儿白介素1β、白介素10亦有不同程度的mRNA表达及分泌。结论初步构建了人分枝杆菌肉芽肿体外模型，为研究分枝杆菌感染过程中肉芽肿形成和免疫反应诱导提供条件。

双嘧达莫抗单纯疱疹病毒的体外实验研究

目的和方法 用Vero细胞及HEK 2 93细胞体外培养法检测双嘧达莫对单纯疱疹病毒(HSV)的抑制活性 ,并以直线回归方程计算IC50 值。结果 双嘧达莫对HSV 1及 2型质控株及临床分离株的IC50 值范围在 6 9～ 1 6 1 μg/ml之间 ,而对照药阿昔洛韦为 1 9～ 2 1 3 μg/ml。 结论 从双嘧达莫广谱的抗病毒作用及其特有的作用机制以及药代动力学资料分析 ,口服给药对HSV感染的疗效尚待临床药理研究进一步证实 。