活化T细胞核因子非编码基因对人脐静脉内皮细胞调节作用的实验研究

目的探讨活化T细胞核因子非编码基因（noncodingrepressorofnuclearfactorofactivatedTcells，NRON）在人脐静脉内皮细胞内过表达和干扰后，对活化T细胞核因子（nuclearfactorofactivatedTcells，NFAT）基因表达的影响，并探讨其对人脐静脉内皮细胞生长、成管能力和迁移能力的影响。方法使NRON基因在人脐静脉内皮细胞中过表达，并使用短发夹RNA（shRNA）干扰培养成NRON过表达细胞系和shRNA干扰细胞系。各细胞系采用不同浓度的小牛血清（1％、2％、4％、8％和10％）处理48h，观察其细胞生长变化。以正常HUVEC细胞系作为对照，另设加入pBABE空载体细胞系和pSuper空载体细胞系作为对照。采用非放射性细胞增殖实验、内皮细胞成管实验、内皮细胞迁移实验这几种血管内皮细胞功能实验，检测血管内皮细胞基本特性的变化。结果非放射性细胞增殖实验结果显示，各细胞系采用不同浓度小牛血清处理48h，其细胞生长均与小牛血清浓度呈正相关（正常HUVEC细胞系r=0．91；pBABE空载体细胞系，r：0．88；NRON过表达细胞系，r=0．89；pSuper空载体细胞系，r=0．95；shRNA干扰细胞系，r=0．97）；与正常HUVEC细胞系和pBABE空载体细胞系比较，NRON过表达细胞系细胞增殖能力较低（各浓度P均〈0．05）；与正常HUVEC细胞系和pSuper空载体细胞系比较，shRNA干扰细胞系增殖能力较高（各浓度P均〈0．05）。细胞成管实验中，与正常HUVEC细胞系和pBABE空载体细胞系比较，NRON过表达细胞系细胞成管能力较低[分别为（23．33±3．01）条和（19．67±1．42）条比（8．33±0．12）条，P均〈0．05]；与正常HUVEC细胞系和pSuper空载体细胞系[（17．33±2．93）条]比较，shRNA干扰细胞系[（36．00±0．51）条]细胞成管能力则较高（P均〈0．05）。细胞迁移实验中，与正常HUVEC细胞系和pBABE空载体细胞系比较，NRON过表达细胞系细胞迁移数较少[分别为（5145±72）个和（441l±117）个比（1857±65）个，P均〈0．05]；与正常HUVEC细胞系和pSuper空载体细胞系[（3883±109）个]比较，shRNA干扰细胞系[（6987±50）个]细胞迁移数较多（P均〈0．05）。结论NRON基因过表达和shRNA干扰，分别使NFAT基因呈抑制或激活状态。NRON基因过表达可抑制人脐静脉内皮细胞生长，减弱其成管能力和细胞迁移能力。shRNA干扰NRON后可促进人脐静脉内皮细胞生长，增强其成管能力和细胞迁移能力。

小猫智斗大灰狼

一天,小花猫不小心把一面漂亮的镜子打碎了。她心疼得大哭起来。猫妈妈安慰说:“别哭了!明天到镇上去买一面同样的吧!”小花猫这才点点头,不哭了。第二天清晨。