牛源大肠杆菌耐药性研究进展

牛源致病性大肠杆菌是导致牛细菌性疾病的重要病原体之一,抗菌药是治疗及预防牛大肠杆菌病的重要手段,然而在养殖过程中,长期且不合理的使用抗菌药物,导致大肠杆菌耐药问题频发,且耐药性具有通过人与动物的直接接触或借助食物链将耐药基因从动物传播给人类的可能,严重威胁人类健康及公共卫生安全。本文根据近几年国内外关于牛源大肠杆菌耐药性基因的研究报道,对大肠杆菌耐药机制、耐药基因检出率及耐药表型进行综述,以期为大肠杆菌耐药性的研究提供参考。

LIMS在兽医实验室检测业务管理中的应用

随着“互联网+”技术快速发展,实验室信息管理系统(laboratory information management system,LIMS)在兽医检测行业中应运而生。LIMS的应用使得兽医实验室检测业务的管理变得标准化、信息化、科学化,从而促进了检测业务的高效运行。本文阐述了LIMS在兽医实验室检测业务管理中应用的现状、优势及存在问题,并提出了几点建议,以期促进LIMS更好地服务于兽医检测行业。

VITEK2.Compact对奶牛乳源金黄色葡萄球菌的条件摸索及MRSA检测结果准确性的评价

为探究金黄色葡萄球菌全自动微生物检测平台(VITEK2 Compact)检测条件,及该方法在金黄色葡萄球菌耐药性筛查的准确性及其兽医临床应用价值,以金黄色葡萄球菌ATCC 29213为质控菌株,选取ASTGP79药敏板,参考美国临床实验室标准研究所(CLSI/NCCLS)的《抗生素敏感试验操作标准》(S100-17和M31-A2)中兽医临床抗生素敏感性试验选药原则,通过摸索不同稀释浓度菌液,对照药敏标准,摸索全自动微生物生长分析仪的高通量筛选平台的适用检测条件。将该耐药性筛查方法应用于在奶牛乳汁中分离获得的39株金黄色葡萄球菌,与经典K-B法的耐药性进行比较,以此验证VITEK2 Compact检测金黄色葡萄球菌药敏结果准确性。结果显示,综合考虑检测结果、透光度、重复性等因素,确定了质控菌株的菌液比例为1×10^(8)CFU/mL,且证实了VITEK2 Compact药敏检测方法的结果符合临床折点的判断标准;对39株乳源金黄色葡萄球菌的耐药性检测与K-B法比较,标准符合率(CA):β-内酰胺类为92.30%、氨基糖苷类为93.32%、四环素类为92.30%、磺胺类为94.87%、喹诺酮类为92.30%、大环内酯类为90.59%、林可酰胺类为92.30%、氯霉素类为94.87%;两种检测方法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant Staphylociccus aureus,MRSA)的检出阳性率无统计学差异(P>0.05)。表明了本研究探讨的金黄色葡萄球菌全自动微生物检测平台的药敏检测方法的准确性与可靠性,为该方法应用于金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎防治提供了理论依据。

猫杯状病毒分离株VP1基因序列与致病性分析

旨在了解上海地区猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP 1基因与致病性,采用常规方法分离鉴定出13株FCV,经RT-PCR和测序获得分离株VP 1的基因序列,与参考株VP 1基因进行同源性和遗传演化分析,对2株分离株进行动物致病性试验。结果显示,13株上海地区分离株VP 1基因核苷酸序列相互间相似性为74.3%~99.8%,与参考株核苷酸序列和氨基酸序列相似性也较低,符合FCV易突变的特征;进化树分析表明,上海地区FCV流行株主要来自国内北方地区,少数毒株来自国外地区;通过对宿主临床症状、VP 1进化树和VS-FCV特征性氨基酸位点进行分析,筛选出7株FCV强毒株;动物致病性试结果验表明,FCV-SH202101株和FCV-SH202113株可导致感染猫发病和死亡,潜伏期为1~2 d,接种后第3天即可检测到排毒,不同年龄段猫的病程不一致,可导致幼猫5 d后死亡,成年猫病程可持续11~18 d,2株分离株在致病性方面均符合VS-FCV特征。本研究丰富了中国FCV的分子流行病学资料,为VS-FCV毒株的筛选提供了有力的证据,也为FCV疫苗的研究提供了技术支持。

狂犬病病毒和犬2型腺病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

目的为了解CAV2-ΔE3-CGS口服疫苗免疫后排毒情况和掌握犬腺病毒(CAV)感染本底情况,研究建立狂犬病病毒和犬2型腺病毒双重荧光定量PCR检测方法。方法针对CAV2-ΔE3-CGS中犬2型腺病毒E1基因和狂犬病病毒G基因设计特异性引物和探针,建立检测CAV2-ΔE3-CGS的双重荧光定量PCR检测方法,并对实验动物场和犬类留验场流浪犬口鼻拭子和环境样本进行了检测。结果该方法生成的标准曲线分别为Y=-3.351×logX+44.895,R^(2)为0.999和Y=-3.413×logX+45.192,R^(2)为0.996,线性关系良好,最低检测线都为102拷贝/μL。在实验动物场流浪犬和环境中未检测到CAV2-ΔE3-CGS;在犬类留验场流浪犬中检测到CAV感染,其中口鼻拭子阳性率为5.88%(5/85),肛拭子阳性率为8.24%(7/85),环境样本阳性率为4.00%(1/25)。结论研究建立的双重荧光定量PCR检测方法适用于CAV2-ΔE3-CGS排毒情况排查和CAV感染调查。研究表明CAV2-ΔE3-CGS免疫后未检测到排毒,上海市流浪犬CAV感染率较低,因此符合CAV2-ΔE3-CGS的口服免疫要求。