3种微孢子虫对家蚕致病性和胚胎传染的研究

研究比较了从四川种茧育家蚕分离的大型微孢子虫ＳＣＭ６（Ｎｏｓｅｍａｓｐ．）和小型微孢子虫ＳＣＭ７（Ｅｎｄｏｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｓｂｏｍｂｙｃｉｓｎｏｖ）与家蚕微粒子（Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ）对蚕的致病力和胚胎传染性。结果表明，２龄起蚕经口添食梯度浓度的微粒子和微孢子虫后，两种微孢子虫对蚕的致病力弱于家蚕微粒子。母峨感染后的卵中，ＳＣＭ７无胚胎传染，ＳＣＭ６具有弱度胚胎传染，其胚传率为（１．４４±０．７５）％；家蚕微粒子胚传率达（１９．６５±８．２５）％，对子代也具有较强的胚传致病性。

杆状病毒LEF-11蛋白自身相互作用关键区域的鉴定

【目的】家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)是蚕业上最常见且危害最为严重的病原微生物之一,其晚期表达因子(late expression factor,lef)LEF-11对病毒的增殖具有重要作用,相关研究证明LEF-11蛋白能够发生自身相互作用形成寡聚体,本研究通过逐步截短探究LEF-11蛋白自身相互作用的关键区域。【方法】利用双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation)技术和荧光定位(fluorescent co-location)技术,首先根据Bm NVP lef-11及各个截短片段序列和荧光蛋白序列设计引物,通过PCR技术扩增回收得到所有片段以及荧光标签片段,并且通过限制性内切酶处理回收后,将荧光标签片段分别连接到昆虫细胞表达载体p IZ/V5-His上,构建p IZ-Ds Red和p IZ-EGFP质粒,然后用相同方法构建LEF-11全长和逐步截短的LEF-11红色荧光融合蛋白载体,分别与p IZ-LEF11-GFP共同转染到家蚕Bm N-SWU1细胞中,更换普通培养基48 h后固定细胞并制片,最后在荧光共聚焦显微镜下观察荧光融合蛋白表达及定位情况,鉴定LEF-11蛋白自身相互作用的关键区域;荧光双分子互补试验相关载体的构建步骤与荧光融合表达载体构建方法一致,转染处理及荧光观察方法也相同。【结果】杆状病毒LEF-11蛋白2—61和62—112端均能与LEF-11蛋白全长发生相互作用,分别共定位于细胞质和细胞核;逐步截短过程中,LEF-11蛋白N-端2—61、12—61、22—61、32—61、42—61和2—51均能与LEF-11蛋白全长共同定位于细胞质中,但其52—61、2—41未发生共定位;C-端截短片段能够与LEF-11蛋白全长发生共定位的有62—112、72—112、82—112、72—101和72—91,但92—112和72—81区域未发现共定位现象;双分子荧光互补试验结果验证LEF-11蛋白N-端片段与LEF-11蛋白全长相互作用的有2—61、12—61、22—61、32—61、42—61、2—51,而2—41、52—61截短突变体则不能,与N-端片段荧光共定位结果保持一致。【结论】鉴定到了杆状病毒LEF-11蛋白的42-51和82-91区域为其自身相互作用关键区域,可用于LEF-11相关功能研究。

家蚕病原微生物的交叉感染研究

以 4种家蚕病原微生物 (CPV、NPV、Nb、SCM6 )两两交叉感染家蚕 ,每种交叉感染设不同病原浓度下的同时攻毒和先后攻毒处理 ,每天记录发病死亡数。统计分析表明 :交叉感染情况下 ,除SCM6 表现为感染力上升外 ,其余均明显下降 ;死亡率与攻毒方式的关系不显著 ;

试论中职蚕桑技术专业教改新措施

在中职校农经方向蚕桑专业技术人才培养方法还处在探索阶段。为顺应该专业学生就业顺利,实用对口,我们在教学设置上作了很大的调整。细化蚕桑专业每个环节,加强蚕桑种植生产、场地建设、营销管理、广告策划推广、电商服务等专业课程教学。改革传统枯燥生晦专业课程和机械无味教法,融入国际先进的农经技术咨询,人才就业方向培养设计,专业课程体系、理论实习课程组织管理、专业师资队伍建设、职业素质等方面进行了大幅度改革;提出了中职蚕桑人才培养中存在的主要问题及解决措施。