慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中IGF-1、IGFBP3表达及其与气道重塑的关系

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)的表达情况,探讨COPD气道重塑的机制。方法将20只雄性Wistar大鼠随机分成模型组和对照组各10只。模型组采用香烟烟熏法制备COPD模型,将大鼠放入熏烟箱内,每次放入10支香烟点燃,持续30min,3次/d,共90 d;对照组常规饲养。处死大鼠,取肺组织,采用HE染色法观察组织形态学变化,并测量细支气管管壁厚度;采用免疫组化法和Real-time PCR法分别检测肺组织中IGF-1、IGFBP3蛋白及mRNA表达;采用Pearson法分析IGF-1、IGFBP3蛋白表达与细支气管管壁厚度的相关性。结果与对照组相比,模型组细支气管管壁厚度增高,肺组织IGF-1、IGFBP3蛋白及mRNA表达增强(P均<0. 01)。IGF-1、IGFBP3蛋白表达与细支气管管壁厚度均呈正相关(r分别为0. 658、0. 654,P均<0. 01),IGF-1蛋白与IGFBP3蛋白表达呈正相关(r=0. 810,P <0. 01)。结论 COPD大鼠肺组织中IGF-1、IGFBP3表达升高,其可能通过促进气道周围细胞的增殖而参与COPD的气道重塑。

CircTMOD3调节miR-126-5p/HIF-1α轴对LPS诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响

目的探讨环状RNA TMOD3(CircTMOD3)对脂多糖(LPS)诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响及潜在机制。方法体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549细胞,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CircTMOD3、miR-126-5p、低氧诱导因子(HIF)-1αmRNA表达;CCK-8和流式细胞术分析细胞活力和细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)用于测定炎症细胞因子的水平以评估炎症反应;生物信息学网站预测miR-126-5p与CircTMOD3或HIF-1α的结合位点,然后进行双荧光素酶报告基因测定确认三者间的靶向关系。体内小鼠实验检测CircTMOD3对LPS诱导的肺损伤的影响。结果CircTMOD3在LPS刺激的A549细胞中的积累显著减弱细胞活力、显著增加了细胞凋亡和炎症反应(均P<0.05)。CircTMOD3可以直接与A549细胞中的miR-126-5p结合,而HIF-1α是A549细胞中miR-126-5p的靶标。miR-126-5p的抑制或HIF-1α的过表达逆转了CircTMOD3沉默对体外LPS刺激的A549细胞损伤的影响(均P<0.05)。体内实验证实,CircTMOD3沉默可减弱LPS诱导的肺组织水肿和炎症反应(均P<0.05)。结论CircTMOD3沉默通过调节miR-126-5p/HIF-1α轴减轻了LPS诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤。