内外侧交叉固定联合中药熏洗对小儿肱骨髁上骨折治疗优良率及术后疼痛程度的干预作用

目的:观察内外侧交叉固定联合中药熏洗对小儿肱骨髁上骨折治疗优良率及术后疼痛程度的干预作用。方法:选取本院收治的肱骨髁上骨折患儿103例进行回顾性研究,按治疗方法不同将其分成A、B组,各52例、51例,A组在常规治疗的基础上行内外侧交叉固定后仅辅助以肘关节功能锻炼治疗,而B组则在常规治疗的基础上采用内外侧交叉固定联合中药熏洗及肘关节功能锻炼治疗,将两组患儿的各项临床指标纳入SPSS21.0软件处理,比较两组治疗优良率及术后疼痛程度差异。结果:1)A组治疗后的优良率82.69%,B组98.04%,A组治疗后的优良率显著低于B组,差异显著(P<0.05)。2)A、B组治疗前后的OPS客观疼痛评分相比无显著差异(P>0.05),治疗后A、B组的OPS客观疼痛评分均显著降低,而B组的OPS客观疼痛评分改善程度显著低于A组,差异显著(P<0.05)。3)A组总不良反应发生率11.54%,B组1.96%,A组的不良反应发生率显著高于B组,差异显著(P<0.05)。结论:在小儿肱骨髁上骨折患儿的临床治疗中针对性的实施内外侧交叉固定联合中药熏洗治疗的临床应用效能较好,可提高患儿治疗的优良率,缓解患儿术后疼痛,减少不良反应发生率,临床应用与推广价值良好。

MEK／ERK信号通路在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达及意义

目的观察MEK、ERK及p-ERK在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达，探讨MEK／ERK信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用。方法用组织块结合酶消化法原代培养血管瘤内皮细胞，待细胞处于对数生长期，换无血清培养基培养48h，使细胞同步化，然后加入0．1ng／L雌二醇，50μmol／L普萘洛尔作为干预组，加入完全内皮细胞培养基作为对照组继续孵育24h。采用Western blot法检测血管瘤内皮细胞MEK、ERK及p-ERK的表达水平，同期用流式细胞计数仪检测血管瘤内皮细胞细胞周期及凋亡的变化，并分析MEK、ERK及p-ERK的表达水平与血管瘤内皮细胞周期及凋亡的关系。结果雌二醇干预后，MEK（0．14±0．01）、ERK1／2（1．36±0．11／0．52±0．10）和p-ERK1／2（0．12±0．03／0．85±0．10）与对照组MEK（0．08±0．00）、ERK1／2（1．16±0．06／0．29±0．04）和p-ERK1／2（0．06±0．02／0．42±0．08）比较，差异均有统计学意义（t=10．01，2．86／3．45，3．57／5．95，P〈0．05）；G0／G1期比例为（90．52±1．28）％，较对照组（94．02±0．85）％明显降低，差异有统计学意义（t=-3．98，P〈0．05）；细胞总凋亡率为（0．70±0.10）％，较对照组（1．77±0．21）％明显降低，差异有统计学意义（t=-8．00，P〈0．05）。普萘洛尔干预后，MEK（0．06±0．01）、ERK1／2（0．87±0．05／0．14±0．02）和p-ERK1／2（0．02±0．01／0．11±0．05）与对照组各项比较，差异均有统计学意义（t=-2．88，-6．79／-6．20，-3．96／-5．74，P〈0．05）；G0／G1期比率为（96．42±1．16）％，较对照组明显升高，差异有统计学意义（t=-2．89，P〈0．05）；细胞总凋亡率为（2．87±0．57）％，对照组明显升高，差异有统计学意义（t=3．14，P〈0．05）。结论MEK／ERK信号通路可能参与调控体外培养血管瘤内皮细胞的细胞周期和凋亡。雌激素、普萘洛尔可能通过干预MEK／ERK信号通路来调控体外培养血管瘤内皮细胞的增殖与凋亡。

糖皮质激素受体在激素性幼兔股骨头缺血性坏死模型中的表达及意义

目的观察糖皮质激素受体（GR）在激素性幼兔股骨头缺血性坏死模型中的表达，探讨儿童股骨头缺血性坏死可能的发病原因。方法选用2月龄新西兰大白兔60只，雌雄各半，体质量1．4～1．7kg。随机分为2组，激素注射组48只，臀肌注射糖皮质激素（GC）（7．5mg／kg），每周2次，共8周。对照组12只，臀肌注射等体积9g／L盐水（0．3mL／kg），每周2次，共8周。根据是否发病将激素注射组分为激素注射发病组和激素注射未发病组，免疫组织化学法检测GR在激素注射发病组与激素注射未发病组及对照组股骨头中的表达并进行图像分析，比较各组GR表达的差异。结果注射后8周，存活31只，股骨头缺血性坏死7只，发生率22．58％（7／31只）。激素注射发病组股骨头软骨中GR阳性表达率高，为100．00％（7／7只），而激素注射未发病组、对照组阳性表达率较低，分别为20．83％（5／24只）、16．67％（1／6只），差异均有统计学意义（P均〈0．01），激素注射未发病组与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。同时，激素注射发病组股骨头软骨中GR表达强度较高，而激素注射未发病组、对照组股骨头软骨中GR的表达强度较低，差异均有统计学意义（P均〈0．01）；激素注射未发病组与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。激素注射发病组股骨头软骨中GR表达量较高，积分吸光度（IOD）值为7942．21±1886．94，而激素注射未发病组、对照组实验动物股骨头软骨中GR的表达量极低甚至不表达，其IOD值分别为627．56±281．85、571．48±260．22，差异均有统计学意义（P均〈0．01）；激素注射未发病组与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论单纯臀肌注射GC可导致幼兔股骨头缺血坏死的发生；GC及GR可能在幼兔股骨头缺血坏死的发生、发展过程中起重要作用。

凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型中的表达及意义

目的观察各凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达情况，探讨该模型中调控凋亡的主要通路。方法选用2月龄的新西兰大白兔，制作糖皮质激素性幼兔股骨头缺血坏死模型及对照组模型，根据是否发病将激素注射组分为未发病组和发病组。取股骨头软骨及软骨下骨组织用免疫组织化学法检测凋亡通路中凋亡相关蛋白天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、Caspase-8、人结合凋亡蛋白酶活化因子-1（apaf-1）、钙蛋白酶-1（calpain-1）的表达情况。分别测定在单位视野中Caspase-3、Caspase_8、apaf-1、calpain-1的积分光密度（IOD）值。结果1．Caspase-3的IOD值分别为发病组25142．72±21528．48，未发病组2069．63±1096．96，对照组301．80±99．66。Caspase-8的IOD值分别为发病组24942．63±18942．99，未发病组2016．31±1518．70，对照组236．85±97．94。Apaf-1的IOD值分别为发病组8514．23±6384．20，未发病组1118．49±1360．59，对照组95．13±38．05。Calpain-1的IOD值分别为发病组9636．71±9123．81，未发病组1881．10．4-3277．86，对照组126．71±47．35。Caspase-3在发病组和未发病组、对照组间差异有统计学意义（H=11．470、23．996，P＜0．01）；Caspase-8在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=22．178，P＜0．01）；apaf-1在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=22．808，P＜0．01）；calpain-1在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=13．553，P＜0．01）。2．线性回归分析：Caspase-8能够显著的预测Caspase-3，且回归方程回归效应显著，回归方程能够解释40．3％的变异，而apaf-1和calpain-1对Caspase-3的回归效应不显著。结论凋亡受体通路可能在股骨头缺血坏死的凋亡过程中发挥主要调控作用。

普萘洛尔片联合平阳霉素粉针剂治疗婴儿期血管瘤的临床研究

目的观察普萘洛尔联合平阳霉素治疗婴儿期血管瘤的临床疗效及安全性。方法将80例婴儿期血管瘤患儿随机分为对照组40例与试验组40例。对照组于瘤体内注射平阳霉素4~8 mg,用0.9%Na Cl 3~5 m L稀释;试验组在对照组治疗的基础上,给予口服2 mg·kg^(-1)普萘洛尔,tid。2组患儿一个疗程均为4周,共治疗6个疗程。比较2组患儿的临床疗效、血清血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素(E2)、尿液碱性成纤维细胞因子水平(b FGF),以及药物不良反应的发生情况。结果治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为92.50%(37/40例)和75.00%(30/40例),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的VEGF分别为(127.29±23.29),(198.27±23.92)pg·m L^(-1);E2分别为(6.73±0.69),(7.89±0.92)pg·m L^(-1);b FGF分别为(14.09±1.58),(18.11±1.93)pg·m L^(-1),差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患儿的药物不良反应主要为气道反应性、呼吸道感染、咳嗽、喘憋,且试验组和对照组的药物不良反应发生率分别为15.00%和17.50%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论普萘洛尔联合平阳霉素治疗婴儿期血管瘤的临床疗效显著,且不增加药物不良反应的发生率。

Raf-1和p-ERK在血管瘤裸鼠移植模型中的表达及意义

目的动态观察Rab-1和ERK在裸鼠移植血管瘤中的表达，探讨其在血管瘤自然退化中的作用。方法动态观察移植瘤大小、形态变化，免疫组织化学检测Ra61、p-ERK1／2蛋白的分布及其表达情况，RT-PCR检测Raf-1mRNA、p-ERK1／2mRNA的表达情况。结果RaP1在增殖期移植血管瘤组织中的阳性表达率为100％，IOD值为89．39±9．67，Raf-1mRNA的相对定量为0．33±0．03；退化期移植血管瘤阳性表达率为55％，IOD值为60．73±9．66，Raf-1mRNA的相对定量为0．21±0．02，两者各项值比较，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。p-ERK1／2在增殖期移植血管瘤组织中的阳性表达率为100％，IOD值为85．65±10．88，p-ERK1／2mRNA的相对定量为0．29±0．02；退化期移植血管瘤阳性表达率为63％，IOD值为49．78±11．20，p-ERK1／2mRNA的相对定量为0．20±0．02，两者各项值比较，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。Raf-1蛋白与p-ERK1／2蛋白的表达量呈正相关关系（r=0．8550，P〈0．01），Raf-1mRNA与p-ERK1／2mRNA的相对定量呈正相关关系（r=0．8750，P〈0．01）。结论裸鼠移植的血管瘤中有Raf-1、p-ERK的表达；Ra51／ERK信号通路可能参与了血管瘤的发生发展过程。