乳腺癌细胞着丝粒蛋白W表达水平对抗肿瘤药物TEOA敏感性的影响

目的探讨乳腺癌细胞着丝粒蛋白W(CENPW)表达水平对化疗药物2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(TEOA)敏感性的影响。方法人乳腺癌细胞株MDA-MB-231用si-NC、si1-CENPW和si2-CENPW转染,分为相应3组;经si-NC、si1-CENPW转染的MDA-MB-231细胞分别用抗肿瘤药物TEOA处理,分为相应4组。采用Western blot法检测3组转染细胞中CENPW蛋白和紧密连接蛋白1(CLDN1)的相对表达水平;采用细胞划痕实验检测3组转染细胞的迁移能力。采用细胞增殖和毒性检测(CCK-8)法检测两组TEOA处理的转染细胞存活率;采用碘化丙啶染色法检测两组细胞死亡率。采用Western blot法检测4组细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD-1)、转录抑制因子2(Slug)、去乙酰化酶3(SIRT3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的相对表达水平。结果相比si-NC组,si1-CENPW组和si2-CENPW组细胞CENPW和CLDN1蛋白相对表达水平显著降低,细胞迁移能力显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相比si1-CENPW组,si1-CENPW+TEOA组细胞存活率显著降低,细胞死亡率显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相比si-NC+TEOA组,si1-CENPW+TEOA组细胞CyclinD-1、Slug、SIRT3蛋白相对表达水平显著降低;相比si1-CENPW组,si1-CENPW+TEOA组细胞CyclinD-1、Slug、SIRT3、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论干扰CENPW表达在体外可协同调节CLDN1表达,与TEOA联合治疗可作为乳腺癌的一项新治疗策略。

DSF/Cu诱导氧化应激和下调PTEN/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞死亡

目的探讨双硫仑/铜(DSF/Cu)对肝细胞癌(HCC)细胞活力和增殖的影响及其可能机制。方法使用不同浓度DSF/Cu 0、0.25、0.50和1.00μmol/L处理HCC细胞系HUH-7,采用CCK-8法检测细胞活力,免疫荧光分析细胞增殖,流式细胞术和比色法分别检测活性氧和丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。另用DSF/Cu 0.50μmol/L分别联合还原型谷胱甘肽(GSH)1.0 mmol/L、米托蒽醌甲磺酸盐(MitoQ)1.0μmol/L处理HCC细胞,观察其对细胞活力、增殖及活性氧含量的影响。结果DSF/Cu可显著抑制HUH-7细胞活力和增殖,增加活性氧和MDA含量,上调γ-H2AX和PTEN蛋白表达,下调p-Akt蛋白表达(P<0.05)。而加入抗氧化剂GSH或MitoQ后,可降低HUH-7细胞内活性氧含量,增加细胞活力和增殖(P<0.05)。结论DSF/Cu通过促进细胞氧化应激反应,下调PTEN/Akt信号通路的表达,从而抑制HCC细胞活力和增殖。