坐位骨盆显像的改进及价值

坐位骨盆显像能克服膀胱和尿液污染放射性与骨盆重叠造成的诊断困难。16例各种肿瘤患者坐位显像结果表明:常规前位上 78％的耻骨区浓聚灶为假阳性,是由于膀胱显影不对称与耻骨重叠所致。尿液污染也可造成假阳性。后位显像膀胱放射性可干扰骶尾骨病灶的显示。对显像方法改进后避免了患者体重对探头附件损坏的可能性,检查更易进行。

人脐带间充质干细胞外泌体递送外源miR-130a-3p抑制人肺癌A549细胞的研究

目的观察人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)外泌体介导的外源miR-130a-3p摄取对肺癌A549细胞的影响。方法采用超速离心法分离hUC-MSCs外泌体,透射电子显微镜鉴定外泌体形态和大小,Westernblot检测外泌体标志性蛋白(CD63、CD81)表达,纳米粒度分析仪(NTA)测定外泌体颗粒浓度和粒径分布;通过瞬时转染制备负载miR-130a-3p mimic的hUC-MSCs外泌体(130a-exo),用130a-exo处理A549细胞,RT-qPCR检测A549胞内miR-130a-3p含量,CCK-8法测定细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果从hUC-MSCs培养上清中分离的纳米颗粒符合外泌体的典型特征。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,130a-exo组A549细胞的miR-130a-3p水平显著升高(P<0.01)。与对照组相比,130a-exo组A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01),体外迁移能力明显下降(P<0.05),早期凋亡率显著升高(P<0.05),晚期凋亡率亦明显增加(P<0.01)。结论hUC-MSCs外泌体可将外源miR-130a-3p递送至肺癌A549细胞而发挥抑癌作用。

去分化联合IDO基因修饰增强人脐带间充质干细胞的抗氧化应激存活及Treg细胞诱导能力

【目的】研究去分化处理联合吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)基因修饰,对人脐带间充质干细胞(hMSC)抗氧化应激生存能力及诱导调节性T淋巴细胞(Treg)能力的影响。【方法】通过对hMSC的短暂成脂分化诱导和恢复培养,获得去分化hMSC(De-hMSC)。实验组De-hMSC感染携带IDO基因的重组逆转录病毒,对照组为感染绿色荧光蛋白(ZsGreen1)基因的De-hMSC以及正常培养的未感染De-hMSC和hMSC。通过Western blot检测被感染细胞的IDO蛋白表达,应用流式细胞术测定IDO基因修饰型De-hMSC(IDO/De-hMSC)的免疫表型,同时鉴定其成骨和成脂分化能力。利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术比较各组细胞在300μmol/L t-BHP作用下的抗氧化应激生存能力,采用三色荧光标记流式细胞术测定含各组细胞培养上清的条件培养基对正常人外周血单个核细胞(PBMC)中Treg细胞含量的影响。【结果】IDO/De-hMSC仍具有间充质干细胞的免疫表型和成骨、成脂分化能力。在300μmol/L t-BHP作用下,De-hMSC的细胞存活率较hMSC明显增加(P<0.05),经IDO基因修饰后De-hMSC的细胞存活优势无明显改变(P>0.05)。与未修饰的各对照组相比,含IDO/De-hMSC上清的条件培养基能明显上调PBMC中CD4^+CD25^+CD127^(low)Treg细胞的含量(P<0.05)。【结论】成脂去分化联合IDO基因修饰不影响hMSC的干细胞特性,并能同时增强h MSC的抗氧化应激生存能力及其对Treg细胞的诱导能力,是一种有望在免疫抑制治疗中发挥作用的间充质干细胞修饰策略。