人参裂口种子超低温保存技术研究

[目的]为人参裂口种子的长期保存建立一套技术体系。[方法]通过测定超低温保存前后裂口人参种子的生活力、发芽势、发芽率及出苗率来探究含水量及解冻方式对其超低温保存的影响;利用SSR分子标记及田间生长指标调查来鉴定超低温保存材料的遗传稳定性。[结果]含水量控制在4%~10%时,经超低温保存后的裂口人参种子仍保持较高的活力,含水量高于10%或低于4%时,活力显著下降,含水量高于30%时,种子全部失活;40℃温水浴快速解冻为最佳解冻方法;超低温保存前后的植株株高、根长等田间生长指标无明显区别;SSR分子标记未发现差异条带。[结论]含水量是影响超低温保存效果的重要因素;建立起一套安全可靠的人参裂口种子超低温保存技术;超低温保存后的材料表现型及基因型均未发生改变,遗传稳定性好。

四种人参属药用植物的核型分析

以四种人参属药用植物组培材料为试材,采用常规压片法对人参、西洋参、三七和日本竹节参的染色体核型进行分析。结果表明:三七染色体数目为24条,其余三种均为48条,人参、西洋参、三七、日本竹节参核型公式依次为:2n=4x=48=38m+8sm+2T、2n=4x=48=20m+26sm+2st、2n=2x=24=18m+6sm、2n=4x=48=22m+22sm+2st+2T。臂比均值:1.42、1.91、1.54、1.75,臂比>2比率(%):16.67、33.33、16.67、50.00。核型不对称系数(%):58.93、63.83、58.32、64.57。染色体长度比:2.15、1.67、1.70、1.78。核型分类:2B、2A、2A、2A。核型似近系数聚类分析表明,人参、西洋参、日本竹节参三者亲缘关系较近,与三七亲缘关系较远。

荧光原位杂交技术在人参属药用植物研究中的应用

荧光原位杂交技术在研究基因定位、染色体结构变异、起源进化以及物种间亲缘关系等方面具有重要作用。本文简要介绍了荧光原位杂交技术中靶DNA制片、探针种类和标记方法,对目前该技术在人参属药用植物研究中的应用进行了综述。

两种基因型西洋参愈伤组织超低温保存过程中超微结构观察

愈伤组织超低温保存过程复杂且存活率较低,除了受保存技术的限制外,材料自身特性也直接影响着其冻存后的存活与再生能力。为了探讨西洋参花药愈伤组织在超低温保存过程中的细胞结构和周期变化情况,本研究以两种不同基因型西洋参花药诱导出的愈伤组织为试材,采用透射电镜观察和流式细胞术进行分析。结果表明,与‘中农洋参2号’相比,‘中农洋参1号’愈伤组织细胞结构致密,体积小,分裂和增殖能力强,内含大量淀粉粒;在经过装载与脱水后,‘中农洋参2号’细胞结构多数被直接破坏,出现大量细胞碎片,而‘中农洋参1号’细胞则通过将大液泡变小及淀粉粒分解来抵御脱水带来的伤害;液氮保存48 h并解冻后‘中农洋参2号’愈伤组织细胞内含物严重外泄,‘中农洋参1号’细胞结构也在不同程度上遭到破坏,但经过30 d的恢复培养,1/3以上细胞质壁分离复原,线粒体、内质网等细胞器清晰可见,细胞恢复正常。本研究可为进一步优化和确定西洋参愈伤组织最佳超低温保存程序提供实验基础,对实现低温耐受能力差种质资源的妥善保存具有重要的指导意义。