RF、抗CCP抗体、AKA及hs-CRP在AID诊断中的价值分析

目的:评价RF、抗CCP抗体、AKA及hs-CRP在四种自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)诊断中的价值。方法:收集1196例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者、178例强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者、237例系统性红斑狼疮(systemiclupus erythematosus,SLE)患者、828例原发性干燥综合征(sjogren's syndrome,S-S)患者及200例健康人的血浆样本,采用间接免疫荧光法检测AKA,ELISA方法检测anti-CCP抗体,免疫散射比浊法测定RF及hs-CRP,分别比较各检测指标在四种AID诊断中的敏感性和特异性。结果:RF用于诊断RA、AS、SLE和S-S患者的敏感性和特异性分别为81.8%、15.7%、11.0%、5.4%和89.7%、55.3%、54.2%、40.3%;抗CCP抗体用于诊断RA、AS、SLE和S-S患者的敏感性和特异性分别为60.6%、6.2%、4.6%、2.7%和97.0%、69.2%、68.4%、58.8%;AKA用于诊断RA、AS、SLE和S-S患者的敏感性和特异性分别为64.3%、9.6%、3.4%、3.9%和96.0%、67.1%、65.9%、56.2%;hs-CRP用于诊断RA、AS、SLE和S-S患者的敏感性和特异性分别为91.7%、92.7%、92.8%、93.0%和17.3%、13.7%、13.8%、16.1%。其中,RF、抗CCP抗体与AKA三者在RA患者中的敏感性和特异性与其他自身免疫性疾病比较,差异有统计学意义(P<0.05),而hs-CRP的敏感性与特异性在四种疾病中的差异无统计学意义(P>0.05)。在AS、S-S、SLE等疾病的诊断中缺乏高敏感性、高特异性检测指标。结论:抗CCP抗体、AKA、RF用于诊断RA的敏感性和特异性有明显区别。

血液透析用水及透析液质量控制的实践与探讨

目的完善对透析用水及透析液的质量控制操作规程。方法针对血液透析用水、浓缩液、透析液的生产和输送等重要环节,按照我国血液净化标准操作规程实行相关的监测和质量控制。结果通过近2年的实践,对操作规程进行了优化,形成了一套较为可靠的质量控制操作规程。结论质量控制工作重在监测和预防,贵在坚持,需要不断完善。

脐带血来源的调节性T细胞对SLE病人淋巴细胞的作用初探

目的通过分析脐带血调节性T细胞(CD_4^+CD_(25)^+细胞)的基本特性以及对系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者淋巴细胞的抑制功能,为治疗SLE等疾病提供新的思路。方法收集脐带血3例、SLE患者外周血6例和健康人外周血3例,肝素抗凝;检测CD_4^+CD_(25)^+及Foxp3+细胞比例;磁珠分选法分离各样本中CD_4^+CD_(25)^+细胞和CD_4^+CD_(25)^-细胞,分析各亚群细胞的纯度并进行体外扩增试验及体外抑制功能试验。结果脐带血中CD_4^+CD_(25)^+细胞和CD_4^+Foxp3^+细胞比例最高,SLE患者外周血中最少;脐带血中CD_4^+CD_(25)^+细胞体外扩增能力比健康成人和SLE患者的CD_4^+CD25+细胞强。扩增后的脐带血CD_4^+CD_(25)^+细胞的体外抑制功能较扩增前及其它两者扩增后均增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脐带血中调节性T细胞比例多,生物活性强,输注脐带血来源的调节性T细胞可以成为治疗系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的理想途径。

BS-400全自动分枝杆菌液体培养系统对分枝杆菌培养的效果评价

目的:评价BS-400全自动分枝杆菌液体培养系统(简称“BS-400培养系统”)在临床标本中培养分枝杆菌的效果。方法:搜集2022年3—5月在浙江大学附属杭州市胸科医院就诊的疑似结核病患者标本427份用于本研究,标本包括除血液和粪便外的331份呼吸道标本(包括痰液和呼吸道灌洗液)和96份非呼吸道标本(包括脑脊液、组织、分泌物、尿液、骨髓和坏死物等)。所有标本同时使用BACTEC MGIT 960液体培养系统(简称“MGIT 960培养系统”)和BS-400培养系统进行培养,培养阳性标本进行细菌分离和菌种鉴定。比较两种培养系统对不同类型标本分枝杆菌培养阳性率、检测时间、污染率及成本差异,并以MGIT 960培养系统培养结果为参照标准,评价BS-400培养系统对不同类型标本分枝杆菌感染的检测效能。结果:BS-400培养系统对呼吸道标本的培养阳性率为32.02%(106/331),污染率为5.14%(17/331);对非呼吸道标本的培养阳性率为17.70%(17/96),污染率为1.04%(1/96),与MGIT 960培养系统[分别为32.93%(109/331)和5.44%(18/331),15.63%(15/96)和2.08%(2/96)]相比,差异均无统计学意义(χ^(2)值分别为0.062、0.030、0.150、0.339,P值分别为0.803、0.862、0.699、1.000)。BS-400培养系统检测时间为12.31(7.89,19.56)d,MGIT 960培养系统检测时间为9.79(7.00,16.58)d,差异无统计学意义(Z=-1.895,P=0.058)。以MGIT 960培养系统培养结果为参照标准,BS-400培养系统检测呼吸道标本分枝杆菌感染的敏感度为93.58%(102/109)、特异度为98.20%(218/222),Kappa值为0.924;检测非呼吸道标本分枝杆菌感染的敏感度为100.00(15/15)、特异度为97.53%(79/81),Kappa值为0.925。BS-400培养系统检测成本[(55±10)元/份]约为MGIT 960培养系统检测成本[(75±10)元/份]的70%。结论:BS-400培养系统对疑似结核病患者临床标本中分枝杆菌的检测效能较高,具有较好的应用价值。

抗核抗体在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的评价抗核抗体(ANA)在原发性肝癌中的表达及临床意义,为原发性肝癌的临床诊治及疾病预后提供相关依据。方法收集72例原发性肝癌患者血清、130例慢性肝炎患者血清及200例健康人的血清。采用间接免疫荧光法测定ANA、采用放射免疫法测定甲胎蛋白(AFP),观察3组ANA表达情况及与AFP水平的关系。结果 ANA在原发性肝癌患者中表达阳性率明显高于肝炎组,且2组均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。肝癌组ANA类型主要表现为斑点型、核仁型、着丝点型及胞浆型。原发性肝癌患者中ANA表达阳性的患者2年生存率明显低于ANA阴性患者。结论 ANA在肝癌、肝炎中均有明显表达,ANA在肝癌患者中的表达阳性率要远高于肝炎患者,ANA是影响肝癌预后的独立因素,原发性肝癌患者ANA表达阳性者提示预后不良。

荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物耐药性的诊断价值

目的 评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物(卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素)耐药性的诊断价值。方法 收集2018年1月~2019年5月在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院收治的培养阳性且具有荧光PCR熔解曲线和BACTEC MGIT 960药敏结果的205例资料。以BACTEC MGIT960药敏结果为金标准,评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物耐药性的诊断价值。结果 荧光PCR熔解曲线法敏感而BACTEC MGIT960药敏耐药的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为1、9、1、1例。荧光PCR熔解曲线法耐药而BACTEC MGIT960药敏敏感的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为2、1、2、0例。两种技术方法的总体符合率,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为98.54%、95.12%、98.54%、99.51%。荧光PCR熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是96.96%、98.84%、94.12%、99.42%、0.946,对异烟肼耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是80.43%、99.37%、97.37%、94.61%、0.851,对氟喹诺酮耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是93.33%、98.94%、87.50%、99.47%、0.895,对二线注射类药物耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是85.71%、100.00%、100.00%、99.50%、0.921。结论 荧光PCR熔解曲线法对利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物的耐药性有较好的辅助诊断价值,适合临床结核病患者的早期耐药性筛查。

贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的应用

目的评估贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的效果。方法收集浙江大学医学院附属杭州市胸科医院2021年10月-2021年11月疑似结核病患者痰标本共216份。对每份标本分别进行贝索系统和Bactec 960系统快速培养,分析两种方法的阳性检出率、阳性报告时间及污染率。结果贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌的阳性检出率及阳性报告时间上差异均无统计学意义(P>0.05),污染率均为7.41%,在质控要求范围。结论贝索系统较Bactec 960系统操作简单,阳性检出率和阳性报告时间两者一致性较高,污染率均容易控制,故贝索系统是比较理想的结核分枝杆菌快速培养方法,值得临床推广应用。

血液透析细菌感染预防与对策

目的了解医院血液透析中心透析液、透析用水水质状况,分析细菌内毒素及菌落数超标的原因及相关性,实现规范化管理的同时督促持续质量改进。方法收集分析自2006年1月-2010年7月透析用水和透析液的监测数据,分别比较A、B两种方法,水处理管路更换前后监测结果,对透析用水、透析液现场采样并对照监测细菌菌落数及内毒素,为采取防治对策提供依据。结果使用不同的内毒素检测方法对透析液、透析用水内毒素检测合格率差异有统计学意义,A方法为69.23%,B方法为100.00%;对照透析液、透析用水细菌菌落数与内毒素含量,两者差异无统计学意义,细菌菌落数合格率为81.58%,内毒素合格率为90.79%。结论探索一种科学可行的内毒素含量检测方法;透析用水、透析液含菌量与内毒素含量不成正比;透析用水、透析液的水质状况与水处理系统管路长短、有无死腔、使用年限、有无生物膜形成,配制过程是否被污染有关,重在预防。

共表达H7N9 M2蛋白和H5N1 HA蛋白的流感病毒样颗粒的制备

目的应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备共表达H7N9 M2蛋白及高致病性禽流感H5N1 HA蛋白的病毒样颗粒(VLPs)。方法将H7N9亚型禽流感M2蛋白作为基础蛋白,与禽流感H5N1膜蛋白HA共表达,通过杆状病毒表达系统表达出VLPs,纯化后通过蛋白印迹试验鉴定VLPs中蛋白的表达情况,用透射电镜观察VLPs形态,血凝试验测定VLPs的活性。结果H5N1 HA、H7N9 M2蛋白可以在昆虫细胞中共表达,相对分子质量为76000,并组装成流感VLPs;电镜观察到VLPs的形态与流感病毒一致,直径70~80 nm;血凝试验显示该VLPs具有类似流感病毒的血凝活性。结论该方法可以制备流感VLPs,为H7N9与H5N1高致病性禽流感广谱疫苗研究提供了可行方案。