原料乳及牧场环境中的微生物多样性及嗜冷菌污染源分析

原料乳中嗜冷菌超标会产生较高水平的耐热蛋白酶和脂肪酶,这两种酶是导致产品进入货架期后出现质量问题的重要原因。为探究牧场奶牛生活环境以及原料乳在流转过程中不同环节的微生物多样性,找出牧场中嗜冷菌的污染来源,本研究选取河北地区某规模化奶牛养殖场,采集TMR饲料、牛舍垫土、头三把奶、头三把奶之后的常规乳以及储奶罐中的原料乳等样品,利用宏基因组测序技术对所有样品的菌群结构、嗜冷菌种类及丰度进行分析。结果表明:在门水平上,主要微生物为变形菌门、厚壁菌门、放线菌门,在属水平上主要是无形体属、链球菌属、肠球菌属、短螺菌属、芽孢杆菌属、假单胞菌。此外对样品中的关键嗜冷菌(假单胞菌)进行分析,牛舍垫土的多样性最丰富的,包含了牧场中常规乳及储奶罐中乳假单胞菌种类的99.63%和96.39%,说明牛舍垫土是各类假单胞菌潜在的污染源。

发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数ATP检测方法的开发与应用

乳酸菌活菌数作为发酵乳和乳酸菌饮料的产品质量属性,同时作为国家风险抽检项目,目前的检测方法存在操作烦琐、检测周期长、结果滞后等缺点,无法满足企业产品卖点宣称及质量控制,故针对发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数的快速检测方法进行开发、研究,旨在提高检测结果准确性、稳定性及缩短检测周期。每种微生物中的腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine Triphosphate,ATP)含量都是基本恒定的,而ATP的相对发光单位(Relative Luminescence Unit,RLU)与ATP含量呈线性关系,通过建立产品中乳酸菌数量与ATP的RLU(相对发光单位)的相关关系开发乳酸菌快速检测方法。通过试验证实该方法与国家标准检测方法具有一致性,能够快速、准确地检测产品中乳酸菌数活菌数,为生产销售流通中的质量监测提供一种快捷方便的方法。

食品中生物胺提取技术的研究进展

生物胺是具有生物活性的小分子碱性含氮化合物。在天然食品发酵和食品加工过程中,由于微生物、物理因素的影响,难以抑制或杜绝生物胺的形成,因而建立食品中生物胺的准确、灵敏检测对人体健康安全和风险规避具有重要意义。基于此,介绍了食品中生物胺的种类,详细综述了不同前处理方法包括:液液萃取、分散液液微萃取的液相萃取法,传统固相萃取、分子印迹固相萃取、固相微萃取、基质辅助固相分散萃取、吸附分离的固相萃取方法,以及电膜萃取的优缺点和最新进展,为食品中生物胺的高效分析提供理论基础。

应用于牛乳的天然抑菌剂

与化学合成物不同,天然抑菌剂是一些蛋白质和蛋白质水解后的多肽,经研究证实对人体无毒无害,却有很强的抑菌或杀菌功能,并且对产品的风味没有影响。乳酸链球菌素、溶菌酶、ε-多聚赖氨酸、乳铁蛋白的活性多肽、纳他霉素、乳过氧化物酶系统的激活等这些天然抑菌剂得到国际的认可,笔者在这篇文章中介绍了它们的特性和应用于乳制品的可能性。

牛奶中泛酸含量测定

目的:对牛奶中泛酸的本底含量进行测定,为乳制品中泛酸的强化提供数据支持。方法:选取大量牛奶样本,通过微生物法和高效液相色谱法对泛酸含量进行测定。结果:牛奶中的泛酸含量大约为253～502μg/100mL,平均值为365.9μg/100mL。结论:乳制品中强化泛酸可以依据上述数值参考添加。

5种水溶性维生素在奶粉中的稳定性研究

微生物法检测奶粉中水溶性维生素,为美国公职分析化学家协会AOAC要求的官方检测方法,也为国标所采纳,一直沿用至今。其灵敏度高,已被全世界所公认。但该法操作复杂,影响结果的因素很多,对检验人员和实验室的要求较高。针对这一问题采取对同一样品进行大量的实验,以确定其波动性,为乳制品的检测提供有力的数据支持。选取同一包奶粉进行多次重复测定,观察其样品与平均值的分布情况,相对标准偏差以及CV值。烟酸、泛酸、叶酸、VB12稳定性较好,生物素相对次之;烟酸和泛酸重复测定的精密度最好,叶酸和VB12相对较好,生物素精密度次之。

烟酸和泛酸不同方法检测的对比

对比两种方法的检测数据,进行归纳性研究。应用微生物法和高效液相色谱法检测同一样品,观察相对标准偏差RSD和CV值,以确定其接近程度。烟酸和泛酸不同的方法检测结果一致。

高效液相色谱串联质谱法检测液体乳中四环素类和喹诺酮类兽药残留量

目的建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定液体乳中四环素类和喹诺酮类兽药残留的分析方法。方法用Na2EDTA-Mellvaine缓冲液(pH为4.0±0.05),经振荡、超声、离心后上清液经HLB固相萃取柱净化,甲醇洗脱,氮气吹干,乙腈水定容,0.22μm有机滤膜过滤,高效液相色谱-串联质谱测定,外标法定量,电喷雾离子源正,多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)。结果液体乳中四环素类检出限为50μg/kg,喹诺酮类检出限1μg/kg,加标回收率在77%～112%之间,相对标准偏差均小于9%。结论该方法前处理简便快速,分析速度快,灵敏度高,可用于液体奶中的四环素类和喹诺酮类兽药残留的测定。

牛奶中孕酮本底含量的研究

对牛奶中孕酮本底含量进行测定,确定其大致范围。选取大量牛奶样本,通过酶联免疫法对孕酮含量进行测定。牛奶中的孕酮含量大约为1.92 ng/mL^6.45 ng/mL,平均值为4.12 ng/mL,多数集中在3.0 ng/mL^5.0 ng/mL。

乳与乳制品中β-内酰胺酶的特性及检测方法

研究了β-内酰胺酶的特性和检测方法;向复原乳中添加不同浓度的青霉素钠,从而确定β-内酰胺酶降解抗生素的最适比例;通过耐热性试验和耐久性试验来确定其稳定性;通过添加青霉素钠来检测β-内酰胺酶的含量。结果表明:β-内酰胺酶降解抗生素的最适比例为3瓶/t;β-内酰胺酶经100℃沸水处理后(90 s)和经长时间保存后(4℃,96 h)仍具有很强的抗生素降解能力;添加10-9 g/L青霉素钠,经37℃3 h静置反应后,添加的抗生素可被降解。了解β-内酰胺酶的特性后可以应用本方法检测乳与乳制品中β-内酰胺酶的比例。

牛奶中叶酸、VB_(12)和生物素本底含量的研究

对牛奶中叶酸、V B12和生物素的本底含量进行测定,为乳制品中叶酸、V B12和生物素的强化提供数据支持。选取大量牛奶样本,通过微生物法对叶酸、V B12和生物素含量进行测定。牛奶中的叶酸含量大约为1.68μg/100 mL^5.69μg/100 mL,平均值为3.79μg/100 mL,多数集中在3.0μg/100 mL^5.0μg/100 mL;V B12含量大约为0.043μg/100 mL^0.357μg/100 mL,平均值为0.18μg/100 mL,多数集中在0.1μg/100 mL^0.3μg/100 mL;生物素含量大约为1.47μg/100 mL^4.63μg/100 mL,平均值为2.60μg/100 mL,多数集中在2μg/100 mL^3μg/100 mL。乳制品中强化叶酸、生物素和V B12可以依据上述数值参考添加。

谷物中黄曲霉毒素B1检测方法的研究

通过对同一黄曲霉毒素B1阳性玉米粉样品分别采用高效液相色谱法(HPLC法)和酶联免疫法(ELISA法)进行不同实验室间对比,并进行数据统计分析,得出ELISA法与HPLC法相比较,在保证检测结果一致的情况下,ELISA法同时具有检测成本低、设备场所要求低、操作简便、快速并且可以同时进行大量样本测定等优点。

自动菌落计数仪在乳品检测中的应用研究

目的对自动菌落计数仪的技术参数、准确度、精密度、重现性等进行试验,研究其是否满足乳品中菌落总数的计数要求。方法选用一次性平皿的倾注法和3M测试片法的菌落结果进行计数,检测项目包括菌落总数、大肠菌群、霉菌酵母、嗜冷菌、乳酸菌等。检测结果分别用仪器法和目测法进行计数,并对结果进行比较。结果目测法和仪器法计数结果进行配对T检验分析可知在95%置信区间P值大于0.05,在统计学上无显著性差异,但检测结果偏差10%的符合率达不到100%。重复性偏差为0.43%~5.52%,重现性试验相对标准偏差为3.60%,国标方法的标准偏差为3.05%。结论样品的背景颜色和颗粒度对仪器的计数结果有影响,可根据实际情况选择使用。

利用不确定度比对乳粉中叶酸含量的快速检测方法

目的 利用不确定度比对乳粉中叶酸含量的快速检测方法 .方法分别用进口和国产的微生物法和酶联免疫法的试剂盒对代表性乳粉样品进行3 d 3平行检测,对检测数据做正态分布分析及不确定度计算.结果 各方法检测结果正态分布检验值(anderson-darling,AD)均小于临界值0.725(95%置信区间),服从正态分布;微生物快速检测方法不确定度范围为13.3%~27.4%;酶联免疫方法不确定度范围为9.6%~31.3%.结论 微生物试剂盒快速检测方法,具有稳定性较好,品牌差异较小的特点,适合质控品的长期监测,质控图的建立.酶联免疫检测方法,具有简单、快速的特点,适合样品中叶酸的快速检测.

牛奶中烟酸本底含量的测定

对牛奶中烟酸的本底含量进行测定,为乳制品中烟酸的强化提供数据支持。选取大量的牛奶样本,通过微生物法和高效液相色谱法对烟酸的含量进行测定,两种方法的结果一致。微生物法为AOAC推荐方法,另外成本较低,所以选用微生物法进行大量样本的检测。结果表明:牛奶中烟酸的含量大约为36μg/100 mL～138μg/100 mL,平均值为87μg/100 mL,牛奶中烟酸含量大部分在70μg/100 mL^120μg/100 mL之间。

测试片法快速检测乳品中的菌落总数

通过用快速菌落总数测试片法与国标方法进行对比,从而对快速菌落总数测试片的准确性、特异性、灵敏度、稳定性等各项性能进行评估,并验证了快速菌落总数测试片与国标方法(GB 4789.2-2010)检测结果的一致性。结果表明,快速菌落总数测试片计数更简单、操作简便,缩短了检测时间,24 h即可对样品进行菌落计数。

ELISA法测定牛奶中链霉素不确定度的评定

目的对酶联免疫吸附法(ELISA)测定牛奶中链霉素残留量的测量不确定度进行评定。方法分析了该方法的不确定度来源,建立数学模型,并进行分析后找到主要影响因素。结果当牛奶中链霉素含量为7.7ng/mL时,其扩展不确定度为1.52 ng/mL(k=2)。其中,测量样品重复性、反应温度及回收率影响较大。结论采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定牛奶中链霉素含量应保证实验具有良好的重复性,严格控制实验反应条件,并且保证样品回收率符合要求。

自动顶空-气相色谱-串联质谱法测定生乳中8种苯系物的研究

目的建立同时测定生乳中8种苯系物的自动顶空-气相色谱-串联质谱法。方法试样中的苯系物经顶空进样器加热挥发后进入HP-InnoWax(30 m×0.25 mm,0.25μm)毛细管色谱柱进行分离,采用气相色谱质谱联用法进行测定,采用外标法定量。结果8种苯系物在0~25.6 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数大于0.99,定量限为0.1~0.8μg/kg、回收率为85.0%~106.8%、精密度均小于7%。结论本方法前处理简单、灵敏度高,可以满足生乳中8种苯系物的同时测定要求。

一种乳中钙含量的快速检测方法

目的建立血液中钙离子临床快速检测方法检测乳中钙含量的方法。方法样品采用盐酸+TX-100稀释,依据碱性(酸性)条件下钙与偶氮胂Ⅲ作用生成的蓝色复合物颜色与钙浓度正比的正比关系,在650nm波长处测定吸光度变化,经与钙校准液比较,计算出样品中钙含量。方法的准确度、精密度、稳定性等用乳中钙含量检测国标方法进行验证。结果建立的乳中钙含量快速测定方法与国标方法比较,准确度(偏差≤10%的符合率达到100%)和精密度(相对标准偏差为10%)方面均符合要求,且操作简单、成本低、安全性高,单个样品检测时间由原来国标方法的24h缩短至8min。结论该方法可应用于乳中钙含量快速检测,对生乳采购和液态奶市场筛查检测具有重要的应用价值。

生乳体细胞检测试剂盒方法与现有方法的比较

对快速简便检测生乳中体细胞数的试剂盒法进行验证,通过与《NY/T800-2004生鲜牛乳中体细胞测定方法》中的显微镜法,以及市场上应用广泛的快速仪器法进行对比,可知试剂盒法与其他方法之间在统计学上均无显著性差异(P>0.05),且仪器方法和标准方法,仪器方法之间在统计学上也均无显著性差异(P>0.05),试剂盒方法相对标准偏差小于10%,通过实验可知该方法具有很高的精密度和准确度,能够满足生乳中体细胞数的快速、准确检测要求,对生乳的质量检测和监测牛乳房炎都有重要作用。