血清A F P、T SGF、GP73及GGT联合MSCT检查对原发性肝癌的诊断价值分析

目的探讨血清AFP、TSGF、GP73及GGT联合MSCT检查对原发性肝癌的诊断价值。方法回顾性分析76例肝癌患者、44例肝部良性病变患者和44例健康体检者的临床资料,对比各组血清肿瘤标志物AFP、TSGF、GP73、GGT水平以及MSCT图像特征,计算分析不同检查对诊断原发性癌的灵敏性、特异性、准确性。结果原发性肝癌组患者的血清AFP、TSGF、GP73、GGT水平明显高于良性肝病组、健康组(P<0.05);MSCT+血清AFP、TSGF、GP73、GGT联合检查的灵敏性、特异性和准确性分别为97.37%、98.68%、96.05%,明显高于各项血清肿瘤标志物的单一检查、血清联合检查以及MSCT的单一检查(P<0.05)。结论血清AFP、TSGF、GP73、GGT和MSCT检查均对原发性肝癌的诊断具有重要意义,血清AFP、TSGF、GP73、GGT联合MSCT检查能显著提高原发性肝癌的诊断灵敏性、特异性、准确性。

烟曲霉蛋白激酶A催化亚基对孢子萌发和抗氧化损伤的调节作用

目的烟曲霉（Aspergillus fumigatus）是一种重要的条件致病性真菌,在免疫受损宿主体内引起侵袭性曲霉病。cAMP-PKA信号通路调控真菌的生长、发育等重要过程。文中检测了烟曲霉野生株（WT株）及蛋白激酶A（protein kinase a,PKA）催化亚基基因突变株（ΔpkaC1株）的孢子萌发曲线、菌株生长、对H2O2的敏感性,分析pkaC1在烟曲霉孢子萌发、抗氧化损伤中的作用。方法WT株和ΔpkaC1株孢子接种于曲霉菌基础培养液（Aspergillusminimal medium,AMM）,观察孢子萌发曲线和菌株径向生长曲线。孢子与不同浓度H2O2作用后涂于AMM上培养,计数残存菌落个数。结果WT株和ΔpkaC1株孢子均于培养4.5 h后开始出现第1个萌发管,ΔpkaC1株孢子萌发1个或1个以上萌发管的萌发动力学降低;ΔpkaC1出现第2个萌发管的时间相对于WT株推迟约1 h,于培养13 h时,WT株100%萌发2个或2个以上萌发管,此时ΔpkaC1株萌发2个或2个以上萌发管的萌发率约为42%。ΔpkaC1株生长缓慢,同时期菌落直径仅为WT株的1/3~1/2。低浓度的H2O2（0.005%~0.050%）处理后,WT株与ΔpkaC1株孢子的存活率差异有显著统计学意义（P〈0.01）;对高浓度H2O2（0.100%~0.500%）,存活率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论cAMP-PKA信号通路中PKA催化亚基在烟曲霉孢子萌发和抗氧化损伤中起着调节作用。

明目地黄方合生脉散治疗肝肾阴虚型干眼症临床观察

目的观察明目地黄方合生脉散治疗肝肾阴虚型干眼症的临床疗效。方法将36例(72眼)肝肾阴虚型干眼症患者随机分为2组。治疗组18例(36眼)采用明目地黄方合生脉散治疗,对照组18例(36眼)予以羟糖甘滴眼液治疗。2组均连续治疗10 d为1个疗程,连续治疗3个疗程后评价临床疗效。比较2组治疗前后基础泪液分泌试验(SⅠt)值、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色积分及证候积分变化情况。结果治疗组总有效率97.22%,对照组66.67%,2组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组临床疗效优于对照组。治疗后2组SⅠt值及BUT均较本组治疗前增加(P<0.05),角膜荧光素染色积分及证候积分降低(P<0.05),且2组组间比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论明目地黄方合生脉散治疗肝肾阴虚型干眼症,可明显提高其临床疗效,改善泪液分泌状态,疗效确切。

基于“诸寒收引,皆属于肾”治疗肝性脊髓病的理论探讨

本文以《黄帝内经》中“诸寒收引,皆属于肾”为切入点,探析肝性脊髓病的病因病机:认为机体多因命门火衰,虚寒内生,加之外感寒邪,内舍肌肉筋骨而发为此病;通过对本病病因病机的认识,认为肝性脊髓病的主要临床表现与“诸寒收引,皆属于肾”理论相契合,进而论述从“温肾阳,益精血”角度治疗本病各证型,以期为临床诊疗肝性脊髓病提供线索和依据。

巢式-重叠PCR构建金属还原酶基因缺失片段

目的利用重叠PCR构建敲除烟曲霉金属还原酶基因所需的融合片段,并检测巢式PCR对重叠PCR的影响。方法比对烟曲霉金属还原酶基因上下游的同源性,在其同源性较好的区域设计引物,扩增出金属还原酶基因上下游片段。同时,利用PCR获得潮霉素抗性标记基因的两个片段。再通过巢式PCR将基因上下游片段与相应的标记基因片段分别连接,获得转化所需的融合片段。获得的融合片段用凝胶电泳和测序进行鉴定。结果获得的融合片段经凝胶电泳检测大小正确。经测序鉴定证实融合片段正确连接并与理论序列有很高的一致性。与常规重叠PCR相比,巢式PCR的引入减少了杂带量。结论获得构建金属还原酶基因缺失所需的融合片段,为实现烟曲霉金属还原酶基因的敲除与功能研究奠定基础。巢式-重叠PCR可以提高产物的特异性。

Split-marker重组技术构建泛素C末端水解酶基因缺失菌株(英文)

目的:对烟曲霉(Aspergillus fumigatus)泛素末端水解酶(creB)基因进行敲除。方法:通过氨基酸序列分析软件初步分析烟曲霉CreB蛋白结构.利用split-marker重组技术构建重组片段,并通过PEG-原生质体方法对烟曲霉野生菌株进行转化,采用PCR方法对转化子进行筛选,最后选取初步筛选的转化子进行测序鉴定。结果:结构分析显示烟曲霉CreB蛋白具有泛素特异蛋白酶(ubiquitin-processing protease)UBP亚家族六个结构域。本实验构建了转化片段并转化,在抗性平板中获得了25个Hyg抗性转化子,进一步采用PCR方法筛选到20个转化子,最终通过测序分析获得一株creB基因缺失菌株。结论:Split-marker重组技术是对烟曲霉creB基因进行敲除的快速有效的方法。获得的creB缺失菌株可用于基因功能研究。