HTA在发达国家医保体系中的发展及对我国的启示

本文对英国、美国、法国、德国、瑞典和加拿大六个发达国家的卫生技术评估(HTA)在医疗保健体系中的发展进行了深入探讨。HTA作为提高医疗决策科学性、经济性和公平性的重要工具,已在上述国家得到广泛应用。这些国家的实践展示了综合评估方法、多方参与、平衡公私部门角色、地方自主性和强调临床及成本效益的重要性。我国作为全球人口大国,面临着医疗资源有限、医保支出不断增加等挑战,借鉴并本土化这些国家的HTA经验有望提升我国医保部门医疗决策的质量,促进整个体系的公平和可持续发展。本文旨在为我国的医疗保健政策制定者、研究人员和从业人员提供关于国际最佳实践经验的深入洞察,为国内外学术界和政策制定者提供有价值的参考。

实验性兔动脉粥样硬化发病过程中内源性一氧化碳及其合成酶基因表达的改变

为研究内源性一氧化碳及其合成酶血红素氧化酶１在动脉粥样硬化发病中的变化规律，通过逆转录－聚合酶链反应、原位杂交、免疫组织化学染色和生物化学等多项指标观察血红素氧化酶１和内源性一氧化碳在动脉粥样硬化发病过程中的变化。结果发现，血红素氧化酶１ｍＲＮＡ主要分布于主动脉和冠状动脉内皮细胞，在动脉粥样硬化的发展过程中其表达有逐渐增高的趋势，且血红素氧化酶１蛋白的表达也有逐渐增高的趋势。血红素氧化酶１免疫组织化学染色显示，主动脉和冠状动脉内皮细胞呈阳性，主动脉壁血红素氧化酶１ｍＲＮＡ的表达量及血红素氧化酶活性和内源性一氧化碳的浓度有逐渐增高的趋势。结果提示，内源性一氧化碳及其合成酶在动脉粥样硬化的发病过程中可能具有重要的作用。

欣肾胶囊延缓大鼠慢性肾功能衰竭实验研究

目的：通过对大鼠7/8肾切除模型的研究,探讨欣肾胶囊对慢性进展性肾病的影响。方法：自动生化分析仪测定血尿素氮、血肌酐；血液流变仪测定血液流变学指标；考马斯亮蓝法测定尿蛋白含量；采用PAS和PASM染色观察肾脏组织学改变,并半定量欣肾胶囊肾脏组织学变化的关系。结果：模型对照组尿蛋白排泄率明显增高,肌酐、尿素氮明显增高,红细胞聚集指数、全血黏度值显著降低,肾脏组织出现明显的病理改变,与假手术组相比差别显著；欣肾胶囊药物治疗后,上述各项指标均有明显改善。结论：欣肾胶囊具有降低蛋白尿、降低肌酐及尿素氮、降低红细胞聚集指数及全血黏度值、减轻肾脏的各种病理改变的作用,可有效延缓慢性进展性肾病的病程进展。

松花粉对衰老成纤维细胞线粒体DNA缺失突变的影响

目的通过研究松花粉对衰老细胞线粒体(mt)DNA4977缺失突变的影响,探讨松花粉抗衰老的作用机制。方法将细胞分为青年组、衰老细胞组、含240 mg/dl松花粉的衰老细胞处理组,三组细胞分别用不同培养基培养后,抽提线粒体DNA,进行PCR检测mtDNA4977缺失突变,以线粒体DNA中保守序列PCR扩增结果作为内参,比较各组mtDNA4977缺失突变在总线粒体DNA中的比例;同时对各组细胞进行β-半乳糖苷酶染色;并测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果松花粉能够改善衰老成纤维细胞的衰老变化,并能降低衰老细胞mtDNA4977的缺失突变,提高细胞SOD活性及降低其MDA含量(P<0.05)。结论松花粉可能通过减轻成纤维细胞的氧化损伤,从而保护细胞mtDNA延缓成纤维细胞的衰老。

绞股蓝皂甙与AWS减轻庆大霉素对培养肾小管上皮细胞损伤的探讨

绞股蓝皂甙与ＡＷＳ减轻庆大霉素对培养肾小管上皮细胞损伤的探讨ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅａｎｄＡＷＳｏｎｔｈｅｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｄａｍａｇｅｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｒｅｎａｌｔｕｂｕｌ...

肾小管上皮细胞膜流动性与其钙镁ATP酶和丙二醛的相关性研究

在兔肾小管上皮细胞原代培养的体外庆大霉素损伤模型中，观察了肾小管上皮细胞膜流动性、钙镁ATP酶活性、丙二醛，并应用阿魏酸钠防治庆大霉素对原代培养肾小管上皮细胞的损伤。发现庆大霉素组丙二醛含量升高（P＜0．01），膜流动性及钙镁ATP酶活性下降（P＜0．01），相关分析表明：膜流动性下降与丙二醛含量升高是非常显著的负相关（P＜0．01），膜流动性与钙镁ATP酶活性呈显著的正相关（P＜0．05）。而阿魏酸钠能显著减轻上述指标改变。

内源性一氧化碳合成酶-1在体内分布状态

目的：研究内源性一氧化碳合成酶即血红素氧化酶－１在心脏，肺脏，肝脏，肾脏，血管中的分布状态。方法：采用免疫组化法。结果：在上述脏器不同部位有内源性一氧化碳合成酶（血红素氧化酶－１）的分布。结论：血红素氧化酶－１主要分布于各脏器与血液相邻的内皮细胞中及血管内皮细胞，部分心肌细胞，肺泡壁上皮及肾盂间质。

血红素氧化酶-1mRNA及其蛋白表达在动脉粥样硬化发病中的变化

目的研究在动脉粥样硬化发病过程中内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ和蛋白表达的变化规律。方法通过原位杂交、免疫组化染色等指标观察动脉粥样硬化发病过程中内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１基因及其蛋白的变化规律。结果１发现动脉粥样硬化的发展过程中主动脉及冠状动脉壁的血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ表达有逐渐增高的趋势。并且血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ主要分布于主动脉和冠状动脉内皮细胞。２发现在动脉粥样硬化的发展过程中血红素氧化酶－１蛋白在主动脉和冠状动脉壁的表达也有逐渐增高的趋势。并且血红素氧化酶－１免疫组化主要在主动脉和冠状动脉的内皮细胞呈阳性。结论内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ及其蛋白表达在动脉粥样硬化发病过程中呈逐渐增高的趋势。

内源性一氧化碳和一氧化氮的相互调节

产生内源性一氧化碳和产生内源性一氧化氮系统在生物活性及功能上具有许多类似之处 ,并且它们的调节作用是密切相关的。

肾小管上皮细胞分离方法与原代培养

肾小管上皮细胞培养是研究肾脏疾病的一项重要技术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法、筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法、免疫分离法。本文就这些分离方法及所分离出细胞的性质做一综述。

阿魏酸钠对培养肾小管细胞庆大霉素损伤防治机理的研究

采用肾小管上皮细胞原代培养技术制作了体外庆大霉素(Gentamicin,GM)损伤模型,观察了培养细胞膜流动性,钙镁 ATP 酶活性、细胞分裂增殖指数。同时还应用阿魏酸钠(Sodium ferulate acid,SF)防治 GM 对原代培养的肾小管上皮细胞的损伤,发生其通过拮抗膜流动性下降,保护钙镁 ATP 酶活性,减轻 DNA 合成的受抑,进而减轻 GM 肾毒性损伤。

肾小管上皮细胞传代培养

长期传代的肾小管上皮细胞系已被广泛地研究。目前国内外应用较多的有MDCK、LLC－PK1、OK、VEPT和EPT细胞系。本文就这些细胞系及其性质做一介绍。

洛汀新和科素亚对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用

目的观察血管紧张素(AngiotensinⅡ,AngⅡ)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞损伤的作用及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEIs)洛汀新和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARBs)科素亚对损伤足细胞的保护作用。方法 60只大鼠随机分为正常对照组、单肾切除组、单肾切除+洛汀新组[10mg/(kg·d)灌胃]、单肾切除+科素亚组[20mg/(kg·d)灌胃]、糖尿病肾病组、糖尿病肾病+胰岛素注射组(早晚各2U甘精胰岛素皮下注射)、糖尿病肾病+胰岛素注射+洛汀新组和糖尿病肾病+胰岛素注射+科素亚组,共8组。通过右肾切除+STZ 45mg/kg一次性腹腔注射建立Ⅰ型DN模型,模型建立16周后进行药物干预,期间每4周称量大鼠体质量,药物干预8周后处死动物。留取血清和尿标本,观察血糖、尿糖、尿蛋白/肌酐和AngⅡ的变化;留取肾组织标本,称量肾质量,行光镜检查,提取肾小球,Western blot检测肾小球组织中Nephrin和Podocin的表达。结果 1与对照组相比,DN组大鼠血糖、尿糖明显升高、肾质量/体质量明显增加(P<0.01);体质量明显减轻(P<0.01)。与DN组相比,洛汀新和科素亚干预大鼠体质量均明显增加(P<0.05)。2DN组大鼠肾脏病理呈DN早期表现(系膜增殖、系膜基质增加,肾小管上皮细胞肿胀,管腔狭窄,可见蛋白管型)。洛汀新和科素亚干预组大鼠肾脏病理表现明显好转。3与对照组相比,科素亚治疗大鼠血清中AngⅡ水平明显增加(P<0.05)。4DN组与洛汀新治疗组Podocin和Nephrin的蛋白表达量与对照组相比均明显升高(P<0.05)。结论洛汀新和科素亚对糖尿病肾病都具有一定的足细胞保护作用;鉴于科素亚治疗组大鼠血清中的AngⅡ水平明显升高,使得洛汀新在发挥对早期糖尿病肾病足细胞损伤的保护作用方面更具前景。

血液透析对终末期肾衰患者血清中血红素氧化酶-1及炎症因子的影响

目的探讨终末期肾衰患者血液透析前后血红素氧化酶-1(HO-1)与C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)等指标的变化及相互之间的关系。方法自动生化分析仪测定血红蛋白、尿素氮、肌酐浓度;采用ELISA方法定量测定血清HO-1、IL-6,化学发光法测定CRP,硫代硫巴比妥酸比色法测定MDA。结果终末期肾衰患者透析前HO-1、CRP、IL-6、MDA水平明显升高,与对照组相比差别显著;血液透析治疗前后上述指标均有明显改变,血清HO-1、CRP水平较透前升高,IL-6、MDA水平明显下降。结论终末期肾衰患者体内炎症加重,抗氧化防御酶水平随之提高;血液透析能够提高终末期肾衰患者血清中HO-1、CRP水平,同时血液透析能够清除一定的IL-6和MDA。

肾间质纤维化组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子共表达

目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和结缔组织生长因子 (CTGF)在肾间质纤维化组织中的表达及二者的关系。方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组 (5只 )、模型组(6只)、依那普利治疗组(6只)。术后 9天处死各组大鼠,肾组织标本用过碘酸-席夫染色(PAS)确证肾间质纤维化病变。以免疫组织化学染色方法观察肾组织内tTG和CTGF的表达部位,以及细胞外基质成份纤维连接蛋白(FN)的表达变化。用Western蛋白印迹方法分析肾组织内tTG和CTGF蛋白表达水平。结果: 假手术组大鼠tTG,CTGF和FN分别在肾小管、肾间质区仅有微量表达,肾小球内无阳性表达;模型组大鼠tTG、CTGF和FN在肾小管、肾间质区的表达信号比假手术组强;依那普利治疗后三者表达减少。双重染色结果显示,在模型组肾间质tTG阳性表达部位同时表达CTGF,并且强度相似。Westernblot结果显示,模型组tTG和CTGF蛋白水平明显高于假手术组;依那普利治疗组tTG和CTGF蛋白水平明显低于模型组。各组大鼠肾内tTG蛋白水平与CTGF蛋白水平之间(r=0. 683,P<0. 05)以及tTG蛋白水平与肾间质内FN半定量水平之间 (r=0. 737,P<0. 05)均有显著相关关系。结论: tTG和CTGF可能共同参与肾间质纤维化。

肝素诱导的血小板减少症

肝素是治疗和预防血栓性疾病的常用药物,在肾脏内科广泛应用于血液透析治疗。随着肝素在临床上的广泛应用,其所引起的不良反应亦日益引起人们的重视,主要包括肝素抵抗、出血、血栓形成和过敏反应，其中肝素诱导的血小板减少症（heparin induced thrombocytopenia，HIT）是车定为严重并发症之一。

辛伐他汀和非诺贝特对非酒精性脂肪肝大鼠血清ATGL酶活性和TNF-α水平的影响

目的观察辛伐他汀和非诺贝特在治疗大鼠非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)过程中,大鼠血清脂肪甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)活性和TNF-α水平的变化以及两者间的关系。方法 78只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(15只)和NAFLD模型组(63只)。高脂饲料建立NAFLD大鼠模型,于12周末检测血脂,病理学证实造模成功后,将模型组随机分为4组:NAFLD对照组,辛伐他汀组,非诺贝特组和饮食组。16周末,处死所有动物,检测血清TG、TC、FBG、ALT、AST、BUN、Scr及ATGL和TNF-α水平,计算肝指数及观察肝脏病理变化。结果两药物组血清TNF-α水平分别为290±78,332±89,ATGL酶浓度分别为0.69±0.21,0.63±0.20,而NAFLD模型组TNF-α水平为485±115,ATGL酶浓度为0.43±0.22,两药物组血清TNF-α水平较模型组明显下降(P<0.05),而ATGL酶活性显著升高(P<0.01),且肝组织病理明显改善;饮食组血清TNF-α水平及ATGL酶浓度分别为432±102,0.52±0.19,两药物组血清ATGL和TNF-α水平较饮食组恢复显著(均P<0.05);NAFLD大鼠血清TNF-α与ATGL呈高度负相关(r=0.948,P<0.01)。结论 NAFLD大鼠血清ATGL酶活性与TNF-α高度相关;辛伐他汀和非诺贝特可通过降低TNF-α水平而增强ATGL酶活性有效治疗大鼠NAFLD。