临床生化重要检验项目溶血干扰的定量化研究

【目的】探讨标本溶血对重要生化项目检验结果的影响,并引进溶血指数对影响程度进行量化,并探讨其临床实践应用。【方法】参考美国临床实验室标准化委员会制定的评价方案EP7-P文件标准程序,取22例正常人新鲜无溶血、无黄疸、无脂浊的血清及其红细胞,配对后配制成不同浓度的溶血模型,检测血红蛋白浓度与溶血指数之间的关系和溶血对生化检测项目影响的大小。【结果】血红蛋白浓度与溶血指数在临床标本溶血范围内呈良好的线性关系,Y(溶血指数)=104.1X(血红蛋白浓度)-3.3,R2=0.9901。从22例标本的不同溶血程度对检测项目结果的影响,溶血对LDH、CK-MB、HBDH、AST、UA、TBIL产生正干扰,对P、CK、ALP产生负干扰。溶血指数与溶血变化的LDH、HBDH、P、CK-MB成显著相关(相关系数R2分别为0.9572、0.9667、0.9683和0.9739)。【结论】溶血指数可作为标本是否合格的客观指标,避免主观判断的误差;可校正易受体外溶血影响的LDH、HBDH、UA和AST结果;溶血对CK-MB和P的影响有待进一步研究。

胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察

目的对胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)进行初步方法学评价,为临床应用提供依据。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A及EP10-A2文件提供的方法,对胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ进行初步的评价。结果 PGⅡ的低值样本批内变异系数(CV)为2.05%、批间CV为1.60%、日间CV为3.92%、总CV为4.70%;高值样本批内CV为1.70%、批间CV为1.21%、日间CV为3.79%、总CV为4.32%。当PGⅡ浓度分别为9.6、24.7、39.8μg/L时,相对偏倚分别为-0.18、-0.47、-0.39μg/L,总不精密度分别为4.98%、2.39%、2.71%。测试间的携带污染差异无统计学意义(P>0.05)。线性回归方程为Y=0.975 7X-0.016 8,决定系数(R2)=0.998 7。结论胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ的精密度符合EP5-A文件标准,具有良好的重复性。线性、偏倚、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件标准,符合临床应用要求,适用于实验室常规测定。

血清钾离子危急值与临床的关系

目的:探讨血钾危急值与临床的关系。方法:统计2008年7月1日至2009年6月30日期间中山大学附属第一医院检验医学部检测的血钾危急值,并通过查阅病历回顾性分析该类患者的相关临床资料。结果:共报告出血清钾180075个测试,血钾危急值的报出率为0.081%,高血钾危急值97例,低血钾危急值49例;患者人数126位,24位门诊患者,102位住院患者;102位住院患者中有28例高血钾危急值,74例低血钾危急值;追踪的83例住院病患中,24例低血钾危急值,59例高血钾危急值。结论:临床危急值的限值范围设置中,血钾危急值上下限的确定直接影响了血钾危急值的报出率;在危急值的报告中,应注意假性高血钾的可能。

Vitros950生化检测系统最大稀释度测定

目的测定Vitros950生化检测系统的最大稀释度。方法对肌酐(CREA)、总胆红素(TBIL)、肌酸激酶(CK)、淀粉酶(AMYL)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)这8个项目的高值标本分别用生理盐水和低值患者血清进行不同程度的稀释,检测并计算预期值与实测值之间的误差,以美国CLIA’88能力验证计划的分析质量要求为标准判定结果是否可接受,以确定这8个项目分别用生理盐水和低值患者血清可以稀释的最大程度。结果用低值患者血清稀释8个项目的最大稀释度均达到了1∶128;用生理盐水稀释,CREA的最大稀释度为1∶128,TBIL为1∶4,CK为1∶8,AMYL为1∶32,AST为1∶64,ALT为1∶16,TP为1∶4,ALB为10∶13。结论生理盐水稀释患者血清作为临床检测较为方便,但是需要注意最大稀释倍数的限制。低值患者血清具有更理想的基质,能达到更大的稀释倍数。

IgA型多发性骨髓瘤分型特征及其双M蛋白来源分析

目的:探讨IgA型多发性骨髓瘤(MM)患者血清中出现双M蛋白的原因。方法:利用免疫固定技术成功筛查出41例IgA型MM患者,分析其血清和尿液免疫固定电泳等实验室特征,并将其中18例在免疫固定电泳结果中出现双M蛋白的患者血清与5%巯基乙醇按3∶1的比例混匀静置15min后,再按免疫固定电泳方法对处理血清进行M蛋白检测,对比血清处理前后的免疫固定电泳特征。结果:41例IgA型MM患者中,属κ轻链的有20例,占48.8%;属λ轻链的有21例,占51.20%;7例患者血清中出现游离轻链;24例患者的尿液出现本周蛋白;18例患者血清出现双M蛋白,占43.9%,经处理后免疫固定电泳结果显示,所有患者血清由原来的双M带变成一条M带。结论:IgA型MM患者其免疫固定电泳结果容易出现双M带,其中有一条M带是由单体IgA组成,另一条由二聚体IgA组成,其来源是由单株克隆性骨髓瘤细胞分泌的。

胃蛋白酶原I乳胶增强免疫比浊分析方法学评价

目的:对胃蛋白酶原I检测试剂盒进行方法学初步评价。方法:依据临床和实验室标准协会(CLSI)颁布的《定量临床检验方法的初步评价,批准指南第二版(EP10-A2)》提供的方法,按特定的顺序连续测定低、中、高浓度的质控血清5d,从而对该试剂盒检测方法进行初步评价。结果:当胃蛋白酶原I低、中、高浓度的质控血清的靶值分别为28.2、48.8、68.3ng/mL时,PGI测定的线性回归方程为y=1.0748x-3.1913,相关系数为0.9998;绝对偏倚分别是-0.8、0.1、2.1ng/mL;总不精密度(CV%)分别为1.32%、1.98%、2.19%。结论:胃蛋白酶原I检测试剂盒检测方法的线性、偏倚、总不精密度和抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件的标准,符合临床应用要求。

28例多发性骨髓瘤的血清免疫学分析

目的探讨多发性骨髓瘤 (multiple m yeloma,MM)的血清免疫学特征。方法对 2 8例 MM患者的血清进行琼脂糖凝胶电泳及电泳扫描 ,血清蛋白和免疫球蛋白定量 ,以及免疫固定电泳。结果 2 7例 (96 .4% ) MM患者血清蛋白电泳可显示 M带 ,Ig G型、Ig M型多在 γ区 ,Ig A型多在 β区。不同型别 MM免疫固定电泳图谱各异 ,Ig G、Ig A、Ig M和单纯游离轻链的比例分别为 46 .4%、2 1.4%、17.9%、10 .7%。在轻链型别中 ,Ig G、Ig M类 M蛋白以 κ型为主 ,单纯轻链型以 λ型为主。免疫球蛋白定量显示 M蛋白所属免疫球蛋白部分显著增高 ,非 M蛋白所属免疫球蛋白显著降低。结论通过上述四种免疫化学综合实验对 MM进行免疫分型 ,可对 MM作出准确的实验室诊断。

应用EP7-2A文件评价脂浊对淀粉酶的干扰及其定量化

【目的】探讨脂浊对淀粉酶检验结果的影响,并对脂浊干扰进行评价及定量化。【方法】根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)制定的评价方案EP7-2A文件,应用SYSMEX公司提供的标准干扰试剂盒中的乳糜干扰物,测定标准浊度与脂浊指数(Lipemia Index)之间的关系以及脂浊对淀粉酶检测项目的影响大小。【结果】脂浊指数与标准浊度成线性相关,回归方程为Y(脂浊指数)=32.722X(标准浊度)+0.439,R2=0.9983;根据EP7-P的"配对-差异"方法,判断脂浊对淀粉酶存在干扰;根据EP7-P的"剂量-效应"方法,得到脂浊指数与淀粉酶干扰之间成线性相关,线性方程为Y(淀粉酶干扰值)=-9.3859X(脂浊指数)+9.7918,R2=0.9861。【结论】脂浊指数与标准浊度之间具有相关性,脂浊对淀粉酶的测定有负干扰,可以利用仪器的脂浊指数对淀粉酶的值进行校正。

免疫透射比浊法与干化学法测定血清白蛋白的方法学比较及偏倚评估

目的通过评估免疫透射比浊法与干化学法测定ALB的偏倚,探讨两种方法检测ALB结果间的偏差是否在允许的范围,保证检测结果的可比性。方法依据NCCLS标准化文件EP9-A2[1],每天取临床样本8份,分别用免疫透射比浊法与干化学法进行双份测定,共测定5d,去除离群点,计算相关系数及预期偏差,以CLIA’88规定的室间质评(ALB+10%)允许误差的1/2作为方法比较结果系统误差的允许限值,进行偏倚的评估。结果干化学法与免疫透射比浊法比较,r2=0.934,在医学决定水平20g/L,35g/L,52g/L时,干化学法的预期相对偏倚分别10.4%,6.8%,3.2%,在Xc=20g/L及Xc=35g/L时,两种方法存在统计学差异。结论以免疫透射比浊法作为比较方法,干化学法测定ALB的结果存在正偏差,测定结果的偏差随着ALB浓度的减低而增大,在低浓度时差异更显著,两者相关性差。因此,实验室内使用不同分析方法检测同一分析物时,建议对各方法进行方法学比较及偏倚评估,明确方法间的差异,并建立各方法的参考范围,特别是建立不同方法在不同医学决定水平浓度的参考值,以保证检测结果的可比性。

可溶性转铁蛋白受体微粒子增强透射免疫分析方法学评价

目的初步评价Orion Diagnostica公司生产的可溶性转铁蛋白受体(sTfR)试剂盒的临床应用性能。方法依据临床和实验室标准协会(CLSI,原NCCLS)颁布的《定量临床检验方法的初步评价;批准指南第二版(EP10-A2)》提供的方法,按特定的序列连续5 d测定高、中、低浓度样本中的sTfR,对该试剂盒进行初步的评价。结果当sTfR的浓度为1.34,3.47,5.59 mg/L时,sTfR测定的线性回归方程为Y=1.0064X-0.0898,相关系数r=0.9999;相对偏差分别为-0.08,-0.08,-0.05mg/L;总不精密度分别为6.13%,2.95%,1.40%。结论IDeAsTfR IT的线性、偏差、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A文件的标准,符合临床应用要求。

利用溶血指数(Hemolytic)校正溶血对生化测定项目的影响

目的 :利用 HITACHI- 71 70全自动生化分析仪血清信息功能中的溶血指数校正溶血对生化测定项目的影响。方法 :用溶血引起变化的溶血指数与溶血引起变化的生化测定项目的结果有显著相关的原理校正溶血对生化测定项目的影响。结果 :对 2 0例门诊抽血的病人同时测定溶血前后的 2 8种生化结果和溶血指数 ,发现变化的溶血指数与溶血引起变化的 TP、UA、LDH、α- HBDH显著相关 (相关系数分别为0 .992、- 0 .993、0 .992和 0 .987)。结论 :利用变化的溶血指数可校正易受溶血影响的 TP、UA、LDH。

利用黄疸血清信息测定血清总胆红素

利用 HITACHI生化分析仪血清信息功能中的黄疸血清信息法测定血清总胆红素。方法 :用 HITACHI- 71 70全自动生化分析仪上提供的血清信息功能中黄疸血清信息与总胆红素浓度有显著相关原理测定血清总胆红素。结果 :该法与重氮法对比 r=0 .997,t=1 .2 84,P>0 .0 5;黄疸血清信息测定总胆红素在 550 μmol/L 范围内呈线性 ;平均回收率为 1 0 1 .5% ;精密度测定 ,批内 CV3.2 % ,批间CV3.9% ;当 Hb<30 g/L,Tg<1 0 .9mmol/L时对该法干扰甚微。结论 :该法精密度、准确度良好 ,简便易行 ,试剂价廉 ,有推广价值。

全自动生化分析仪清洗剂研制与应用

目的 :配制用于全自动生化分析仪的清洗剂。方法 :利用非离子表面活性作用及其在反应杯表面的吸附作用 ,加入适量的抗菌剂、消泡剂、硬水软化剂等 ,对反应槽、反应杯的污垢进行清洗。结果 :此溶液可有效地清洁反应杯、反应槽及其管道系统 ,使反应槽中水流动过程中不产生气泡 ,对光学系统无影响 ;同时加入适量的催化剂使溶液清洁过程中形成的胶团催化 ,可使稀释后的溶液更稳定 ,保持长时间不长菌、不混浊。此溶液在进行反应槽换水测定时 ( 2 0 )次 ,批内空白杯值的 ( 340～ 80 0 nm)标准差及 CV值均小于进口的 HITERGENT原液。结论 :此配方适合于各种分立式全自动生化分析仪反应槽换水和反应杯清洗时使用。

长期血液透析患者红细胞膜F_2-isoprostanes及细胞膜流动性的研究（英文）

【目的】探讨建立血浆和红细胞膜的iPF2α-Ⅲ评估血液透析(HD)患者氧化应激状态,并研究细胞膜流动性与氧化应激的关系。【方法】对49名长期血液透析患者和31例健康人检测其血浆和红细胞细胞膜F2-isoprostanes(一个特定的同分异构体iPF2α-Ⅲ)作为体内氧化应激评价的指标,同时利用DPH和TMA DPH评估细胞膜流动性作为一种间接的细胞功能标志。【结果】血液透析患者和正常对照组相比,氧化应激增高,血浆iPF2α-Ⅲ(0.450±0.173与0.236±0.107 nmol/L、P<0.01)和红细胞膜iPF2α-Ⅲ(32.5±7.9与25.7±8.7 pmol/g,P<0.01)。与正常对照组比较血液透析病人红细胞膜流动性降低,DPH(0.230 2±0.004 0与0.224 6±0.004 6,P<0.01)和TMA DPH(0.271 0±0.004 5与0.264 7±0.007 1,P<0.01),血浆的iPF2α-Ⅲ及红细胞膜流动性无相关;血液透析患者红细胞膜的iPF2α-Ⅲ与核心区域细胞膜流动性呈负相关(r=0.630,P<0.01)。在血液透析病人与健康对照组相比较中发现,血液透析病人中的不同时段的红细胞膜上的iPF2α-Ⅲ的含量较健康对照组增高,相对应红细胞的流动性减低。线性回归分析显示血液透析病人不同时段的红细胞膜DPH流动性与红细胞的膜iPF2α-Ⅲ含量相关(幼红细胞r=0.491,P=0.015;成熟红细胞r=0.563,P=0.004;衰老红细胞r=0.460,P=0.024)。【结论】血液透析患者由于长期处于氧化应激增高的状态,此状态造成不同时段的红细胞膜的表面及核心区域的均受到损害。通过检测红细胞膜的iPF2α-III可以评估体内红细胞氧化应激状态的指标。

脑脊液寡克隆区带琼脂糖凝胶免疫固定电泳的实验研究

目的鉴定脑脊液寡克隆区带(oligoclonal band,OB)的存在,探讨其在中枢神经系统疾病中的临床应用。方法对脑脊液和血清标本同时进行琼脂糖凝胶电泳,使用酶标抗人免疫球蛋白G,采用免疫固定电泳技术后,用TTF3显色。鉴定是否存在寡克隆区带。结果 67例神经系统疾病患者,其中4例临床确诊为多发性硬化症(multiple sclerosis,MS),经电泳免疫固定酶标显色后,2例(50%)发现寡克隆蛋白阳性,其他为阴性。结论脑脊液免疫固定电泳是检测脑脊液中内源性合成免疫球蛋白的直观方法。OB的检查对于多发性硬化和神经系统炎症有一定的诊断价值。

化学发光法检测肝纤维化血清学指标的临床应用

目的探讨化学发光法检测肝纤维化指标包括三型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)及透明质酸(HA)对肝纤维化的诊断价值。方法用化学发光法检测132例乙型病毒性肝炎患者血清中肝纤维化四项指标的水平,评价四项指标鉴别诊断肝炎及肝硬化的价值。结果乙型肝炎组、肝癌组、肝硬化组血清中的四项指标依次升高,均与正常对照组差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线显示,PⅢNP、CIV、LN、HA的曲线下面积分别为0.680、0.825、0.716、0.825,灵敏度分别为39.1%、87.0%、87.0%、82.6%,特异性分别为89.8%、69.3%、53.4%、86.4%,准确性分别为79.09%、72.73%、78.18%、85.45%。在联合检测中,HA+PⅢNP组合的灵敏度为83.0%,特异性为80.0%,准确性为80.1%。结论单个指标检测,HA是四项指标中鉴别诊断肝炎与肝硬化最有价值的一项,通过HA联合其他指标进行分析,其中HA+PⅢNP组合特异性、准确性最高。

免疫固定电泳法的应用——检测本-周氏蛋白

目的 通过免疫固定电泳法实验检测非浓缩尿中本 周氏蛋白 ,并与传统检测方法 热沉淀反应法比较。方法 对 116例临床申请本 周氏蛋白检测的尿标本分别以免疫固定法和热沉淀反应法检测尿中本 周氏蛋白 ,并对 2 0例免疫固定法检出本 周氏蛋白呈阳性的病人的尿液做尿蛋白分型定性。结果 116例标本用免疫固定电泳法测定 ,2 0例 (17.2 4% )呈本 周氏蛋白阳性 ,其中 8例属于κ型、12例属于λ型 ;用加热法测定全为阴性。 2 0例免疫固定电泳法中本 周氏蛋白阳性的病人尿液蛋白定性呈 -～ ++之间。结论 利用免疫固定电泳法测定尿中本 周氏蛋白 ,具有特异性和高灵敏度 ,其技术作为筛选和确认本 周氏蛋白方法而受到推荐。热沉淀反应法则因检测过程中的影响因素太多 。

血管紧张素转移酶紫外分光光度法的方法学评价

目的初步评价血管紧张素转移酶检测试剂盒性能。方法依据临床和实验室标准协会颁布的《定量临床检验方法的初步评价,批准指南第2版(EP10-A2)》提供的方法,按特定的顺序连续测定低、中、高浓度的质控品5d,对该试剂盒检测方法的性能进行初步评价。结果血管紧张素转移酶低、中、高浓度的质控血清的靶值分别为49、89.5、130U/L时,按特定的顺序连续测定5d,没有离群值。线性回归方程为y=0.879x+8.45,相关系数为0.9964;绝对偏差分别是0.64、1.26、-9.6U/L;总不精密度(CV%)分别为4.39%、2.26%、1.39%。结论血管紧张素转移酶检测试剂盒检测方法的线性、总变异和抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件的标准,符合临床应用要求。高值的偏差提示超出可接受范围,需要进一步进行评估。

干化学淀粉酶、脂肪酶的临床可报告范围研究

目的建立干化学淀粉酶(Amylase,AMYL)、脂肪酶(Lipase,LIPA)的临床可报告范围,以指导实验室处理高值AMYL及LIPA的标本。方法参考美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)EP6-A文件和相关文献,进行干化学AMYL和LIPA的分析测量范围(analytical measurement range,AMR)验证实验及最大允许稀释度测定实验,建立其临床可报告范围(clinical reportable range,CRR)。结果血清AMYL和LIPA的AMR与厂商一致;用生理盐水稀释血清AMYL,最大允许稀释倍数是8倍,CRR是30～9600U/L;血清LIPA不能用生理盐水稀释,可用7%BAS稀释,最大允许稀释倍数是9倍,CRR是10～16000U/L。结论对于高值有特别意义的检测项目,测定其最大稀释倍数并建立其临床可报告范围意义重大。