三孢布拉霉菌发酵生产β-胡萝卜素的代谢调控

[目的]研究三孢布拉霉菌发酵生产β-胡萝卜素的代谢调控途径,为通过优化发酵培养条件来提高β-胡萝卜素的产量提供依据和参考。[方法]采用紫外分光光度计测定β-胡萝卜素的含量,优化正负菌孢子接入种子培养基的接种比例,通过对三孢布拉霉菌发酵生产β-胡萝卜素的代谢调控分析,确定最佳补液时间,优化培养温度和接种比例来提高β-胡萝卜素的产量。[结果]最佳孢子接种比例为正菌∶负菌=10∶1,最佳补液时间为52 h,最佳培养温度为27℃,最佳种子液接种比例为8%。[结论]通过对菌体生长代谢的分析优化了培养条件,并将β-胡萝卜素的产量从1.45 g/L提高到2.26 g/L,产量提高了55.9%,取得了较好的效果,为β-胡萝卜素的工业化生产奠定了基础。

高效液相色谱-同位素稀释质谱法准确定量牛乳中β-乳球蛋白

β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳的主要致敏蛋白之一,亟需开发一种准确且可追溯的准确定量分析方法。本研究利用胰蛋白酶酶解β-LG后,采用同位素稀释质谱(IDMS)法对特定多肽进行定量分析。同时考察氘标记特征多肽IDAL*NENK(D_(6)-Leu)及碳氮双标记特征多肽IDAL*NENK(^(13)C_(6),^(15)N-Leu)作为内标对色谱行为和检测结果的影响,并进行方法学验证。结果表明,本方法的回收率为90.1%~102.7%,变异系数(CVs)<8.0%。分析来自国内市场的5个样本,CVs<6.5%,合成成本较低的氘标记多肽在蛋白质定量中可作为^(13)C、^(15)N标记多肽的可靠替代。本方法抗干扰能力强、灵敏度高、准确度高、重现性好,有助于提高β-LG定量结果在不同实验室之间的可比性。

高效液相色谱法准确定量微量植物体中的重要植物色素

建立了高效液相色谱法快速准确定量微量植物体中重要植物色素(叶绿素a、叶绿素b和叶黄素)的分析方法。微量植物叶片以95%乙醇匀浆超声提取色素4 h,过滤膜后直接分析。色谱分离选用COSMOSIL氰基柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水进行洗脱,流速为1.0 mL/min,用二极管阵列检测器检测,可在15 min内对植物中3种重要色素的快速分离分析。结果表明,3种色素在0.05~50 mg/L范围内线性关系良好(相关系数均为0.999 9);平均加标回收率为90%~110%;相对标准偏差(RSD)<5%;日内及日间精密度均小于5%,满足定量要求。与目前检测植物色素的方法相比,该方法前处理简单快速,且采用简单的甲醇-水体系快速分离植物色素,结果可靠,重现性好,可为植物体的生理研究提供基础。