矮牵牛花香基因BSMT3的cDNA克隆与表达特征分析

以矮牵牛花瓣总RNA为模板,RT-PCR方法克隆得到其BSMTcDNA,全长1100bp,编码357aa,与已有报道phBSMT1(GenBank No.AA0501)和phBSMT2(AAO45013)的同源性分别达到97.76%和98.6%,该序列在Gen-Bank登录号为DQ494491,命名为phBSMT3.构建的BSMT3 cDNA的原核表达质粒pGBSMT转化BL21(DE3)E.coli,获得的重组菌株经0.01mol/LIPTG诱导后得到正确表达的GST-BSMT融合蛋白带,以纯化的重组表达蛋白免疫家兔获得其兔抗免疫血清.免疫组化研究结果证实,矮牵牛花香基因BSMT在花瓣、花管中的表达量较其它组织的表达量高.

青蒿鲨烯合酶cDNA的克隆与序列分析(英文)

[目的]对青蒿鲨烯合酶进行cDNA克隆,并进行其序列分析。[方法]根据GenBank上已发表的鲨烯合酶cDNA基因序列设计1对特异性引物,提取青蒿细胞总RNA,运用RT-PCR扩增出鲨烯合酶基因。将其与pMD19-T载体连接,并通过DNAman、NCBI Blast、ExPASy ProtParam等工具,对克隆片段序列进行分析。[结果]SS基因全长1257bp,编码418个氨基酸;同源性分析表明,青蒿SS基因序列与人参、积雪草、金铁锁、大豆、辣椒、百脉根、远志、玉米、褐家鼠、小鼠以及人相应序列的同源性分别为77.21%、76.11%、75.66%、74.62%、73.83%、74.46%、73.03%、64.39%、52.22%、50.51%和50.12%;氨基酸同源性分别为79.43%、79.00%、75.84%、79.43%、77.27%、77.03%、66.03%、40.65%、40.19%和40.09%。由SS基因翻译出来的蛋白质分子量为47.8394KDa,理论等电点为8.57,无信号肽。疏水性分析表明,在400~417区域疏水性较强。跨膜区分析表明有3处跨膜区域,分别为170～186位的17个氨...

牛蛙生长激素基因在COS_7细胞中的转染表达

应用RT-PCR技术克隆牛蛙生长激素(BfGH)的cDNA,T-A克隆法构建反向插入的pMD18-T/BfGH重组质粒,回收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,并与去磷酸化处理的真核表达载体VR1020/BamHⅠ,酶切鉴定方法筛选BfGH正向插入的重组真核表达质粒VBfGH.脂质体法介导质粒VBfGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实BfGH基因在COS7细胞中得到了正确的转染表达.

牛蛙生长激素基因cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达

以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E.coli得到重组菌,0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,bfGH表达率达到29.3%,融合蛋白的分子量为51 kDa.回收BfGH融合蛋白注射免疫家兔获得兔抗血清,以其为一抗,经ELISA-RA检测分析表明回收的重组蛋白能与牛蛙肝膜受体蛋白结合.

不同种源丹参根多糖含量动态变化研究

目的:比较不同种源丹参根多糖含量,考察丹参根多糖含量随生长时间的变化规律。方法:采用热水浸提法提取丹参多糖,苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果:丹参根(包括木质部和韧皮部)多糖含量随时间呈动态变化,不同种源丹参根多糖含量随时间的变化规律不尽相同,且同一时期不同种源丹参根多糖含量存在明显差异。不同生长时期,多糖在丹参根木质部和韧皮部的分布情况不同。不同种源丹参均结实期时多糖含量最低;采收期时以北京种源丹参多糖含量最高,江苏种源次之,河南种源最低。结论:本实验为高多糖丹参种源的筛选及丹参多糖的开发利用提供理论依据。

青蒿鲨烯合酶cDNA的克隆与序列分析

[目的]对青蒿鲨烯合酶进行cDNA克隆,并进行序列分析。[方法]根据GenBank上已发表的鲨烯合酶cDNA基因序列设计1对特异性引物,提取青蒿细胞总RNA,运用RT-PCR扩增出鲨烯合酶基因。将其与pMD19-T载体连接,并对克隆片段序列进行分析。[结果]SS基因全长1257bp,编码418个氨基酸;同源性分析表明,青蒿SS基因序列与人参、积雪草、金铁锁、大豆、辣椒、百脉根、远志、玉米、褐家鼠、小鼠以及人相应序列的同源性分别为77.21%、76.11%、75.66%、74.62%、73.83%、74.46%、73.03%、64.39%、52.22%、50.51%和50.12%;氨基酸同源性分别为79.43%、79.00%、75.84%、79.43%、77.27%、77.27%、77.03%、66.03%、40.65%、40.19%和40.09%。[结论]青蒿鲨烯合酶cDNA的成功克隆,为进一步研究SS基因结构、基因表达与调控提供了重要依据。

影响饲料调味剂的因素

早在40年代,美国各大学就开始对畜禽嗅觉进行了研究。其中美国衣阿华大学Carton博士等关于仔猪嗜好性的试验和科尼大学Kare博士关于鸡的嗜好性研究,引起了人们的极大兴趣。接着美国利用这方面的研究成果成立了专门经营饲料香料的饲料香料公司和化学工业公司,一些大食品公司也生产出加有香料的饲料。1965年日本开始从美国进口饲料香料饲养畜禽。1967年日本用气相色谱仪研究动物所喜好的香味基因。目前饲料调味剂的研究应用已从北美、西欧扩展到澳大利亚、东欧、独联体国家和东南亚各地。从应用动物的种类和年龄上看,已从原来的仔猪、犊牛、鱼类和观赏动物拓宽到哺乳母猪、生长肥育猪、奶牛、肉牛,乃至一般认为没有嗅觉的家禽等。在应用场合和应用目的方面也发生了一些变化。现在人们除用于克服断奶应激以外,还用于家禽热应激、鱼虾处于低温下的应激和换水、换池等环境改变以及患病中采食量下降等方面。

饲料香味剂的合理应用

1 饲料香味剂的主要作用 1.1 提高采食量是确保动物健康生长和高速生产的要素长期以来,人们主要注意如何满足动物的营养需要量,而常常忽视隐含于饲料养分含量与动物需要量之间的一个关键因素——适口性与采食量。

酵母蛋白饲料和鱼粉对断奶仔猪生产性能影响的比较研究

试验采用单因子设计,在保证营养水平相同的情况下,共设5种日粮,其中包括对照组(基础日粮)、鱼粉组(基础日粮+2.5%鱼粉)、酵母组(基础日粮+2.5%酵母)、酵母去酶组(基础日粮+2.5%酵母并扣除酶制剂)和酵母去药组(基础日粮+2.5%酵母并扣除抗生素)。选用28日龄断奶的DLY三元杂交仔猪60头,试验期为28d。试验主要考察平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料肉比(F/G)。结果表明,从整个试验期来看,添加酵母组和鱼粉组都能提高仔猪的生产性能,尤以酵母组的提高幅度最大,酵母组的ADG、ADFI分别较对照组提高14.9%(P<0.05)、4.2%,料肉比降低了9.5%(P<0.05);ADG、ADFI分别较鱼粉组提高10.6%、5.4%,料肉比降低4.7%(P<0.05)。通过比较对照组、鱼粉组、酵母去酶组、酵母去药组这4组全期生产性能指标,发现对照组虽然采食量较高,但ADG和料肉比仍是最差,其中料肉比明显高于酵母去酶组和鱼粉组(P<0.05);酵母去酶组较对照组ADG提高6.4%,料肉比降低11.9%(P<0.05);酵母去药组较对照组ADG提高1.7%,料肉比降低2.0%,差异不显著(P>0.05)。试验结果说明,酵母代替鱼粉的效果是肯定的,同时具有替代酶制剂的潜力,另外,酵母饲料作为一种绿色的饲料来源,在一定条件下代替抗生素也是可行的。

酶解奶油增香物制备工艺及其在奶香饲料调味剂中的应用

通过脂肪酶酶解奶油制备奶油增香物。在单因素的实验基础上,进行了正交实验优化,最终得到了酶解制备奶油增香物的最佳工艺条件:温度为55℃,酶解时间为7 h,pH值为6.5,底物浓度为40%,酶添加量1%。利用此优化工艺条件下制备的奶油增香物20%～25%,加入其他食品级香原料调配而成的奶香饲料调味剂,奶香更加逼真,口感圆润,香气柔和并且产品的留香能力较强,适用于大规模推广。

微生物发酵饲料及其应用

文章综述了利用发酵工程发酵粕类、秸秆以及果渣生产微生物饲料,提高饲料利用率,改善饲料品质,消除环境污染,有利于缓解中国蛋白质饲料原料紧缺的问题。

日粮蛋白质水平及组成对动物免疫功能的影响

在临床和试验方面，有关蛋白质营养与免疫的研究很广泛，得到较为一致的结论：蛋白质缺乏将会降低机体抗感染能力和淋巴器官发育；降低细胞免疫、体液免疫功能。降低巨噬细胞的数量与活性，相反蛋白质过剩也会加重机体的代谢负荷，影响动物免疫功能的发挥。氨基酸与免疫功能关系的研究主要集中在赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、精氨酸、谷氨酰胺等。正常情况下当抗原进入机体后，可刺激机体产生不同水平的免疫反应——细胞免疫和体液免疫，各种免疫细胞的生成以及抗体的合成过程都需要蛋白质和氨基酸为原料或其参与。

酶解奶油增香物的制备工艺及应用

通过对3种不同脂肪酶酶解奶油制备奶油增香物,筛选出最佳的试验用酶Palatase 20000L。研究表明,Palatase 20000L酶解奶油增香物的最佳工艺条件温度为40℃,酶解时间为6 h,pH 6.5,底物浓度50%,酶添加量2%;利用此工艺条件制备的酶解奶油增香物10%加入到饲料奶香产品中,使产品奶香更加柔和,延长了产品的留香能力,增强了适口性。

不同香味剂对仔猪采食行为的影响

试验采用单因素设计,选择体重相近的50日龄约克仔猪16头,试验设4个重复,每个重复4头猪。同一圈舍同时放置试验饲粮和对照饲粮,试验饲粮在对照饲粮的基础上添加香味剂312、312G、230各400g·t^(-1)。每天记录采食量和采食时间,研究不同香味剂对仔猪采食行为的影响。结果表明,仔猪对于不同香味剂的喜好程度不同,与果奶香型230相比,仔猪更偏好于奶香型312、312~G。

酵母培养物在动物生产中的应用研究进展

酵母培养物是一种新型微生态制剂,具有提高动物生产性能、改善肠道内环境、提高机体免疫力,替代抗生素等特点。文章概述了酵母培养物在动物生产中的应用。

不同甜原料对仔猪采食行为的影响

试验选择体重相近的21日龄仔猪16头,设4个重复,每个重复4头猪。同一圈舍同时放置试验饲粮和对照饲粮,试验饲粮在对照饲粮的基础上添加甜味剂T201200g·t-1、蔗糖50kg·t-1。记录日采食量,并通过摄像头记录采食时间和采食次数,考察不同甜原料对仔猪采食行为的影响。结果表明,糖精钠有类似于蔗糖的诱食效果,能显著提高断奶仔猪的采食频率。

银杏叶提取物在饲料中的应用

银杏叶提取物含有黄酮类等多种活性物质,作为一种全新的饲料添加剂在养殖行业中具有很高的应用价值。文章概述了银杏叶提取物的生物学功能及其在养殖行业中的应用情况和展望。

水解小麦蛋白对蛋白质风味影响研究

试验通过利用碱性蛋白酶和酸性蛋白酶对小麦蛋白进行水解,采用不同水解时间、水解温度处理,得到碱性蛋白酶最佳水解时间为4.5 h,酶解温度为50℃;然后在最适水解度下测定游离氨基酸的含量,并进行比较,通过游离氨基酸量的变化来研究蛋白质风味的变化。