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His/GST-HDAC1在大肠杆菌中表达的研究
1
作者
吴非
嘉屋俊仁
坂口和靖
《生物技术》
CAS
CSCD
2006年第6期15-17,共3页
目的:对His/GST-HDAC1在大肠杆菌BL-21中的表达进行研究。方法:HDAC1的完整基因片断被克隆到pColdⅠ载体和pGEX载体上,并在其N末端分别联有His和GST;采用大肠杆菌BL21对HDAC1进行表达;采用亲和色谱对HDAC1进行纯化;用SDS-PAGE和蛋白质...
目的:对His/GST-HDAC1在大肠杆菌BL-21中的表达进行研究。方法:HDAC1的完整基因片断被克隆到pColdⅠ载体和pGEX载体上,并在其N末端分别联有His和GST;采用大肠杆菌BL21对HDAC1进行表达;采用亲和色谱对HDAC1进行纯化;用SDS-PAGE和蛋白质印迹来验证表达和纯化效果;对HDAC1活性进行测定。结果:多数HDAC1存在于大肠杆菌BL-21细胞裂解液的沉淀组分和纯化过程中的未结合组分中,小部分HDAC1可从细胞裂解液的上清液中得以纯化,但未显现出酶活性。用FPLC对HDAC1进行进一步分离,结果表明,HDAC1发生了分子聚集,使得它们的分子量大于正常分子量。结论:活性His/GST-HDAC1不能用大肠杆菌BL21成功表达。
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关键词
组蛋白脱乙酰酶1(HDAC1)
HDAC1表达
亲和纯化
HDAC1活性
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职称材料
题名
His/GST-HDAC1在大肠杆菌中表达的研究
1
作者
吴非
嘉屋俊仁
坂口和靖
机构
教育部乳品重点实验室东北农业大学食品学院
日本北海道大学理学部化学研究科生物化学研究分野
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2006年第6期15-17,共3页
文摘
目的:对His/GST-HDAC1在大肠杆菌BL-21中的表达进行研究。方法:HDAC1的完整基因片断被克隆到pColdⅠ载体和pGEX载体上,并在其N末端分别联有His和GST;采用大肠杆菌BL21对HDAC1进行表达;采用亲和色谱对HDAC1进行纯化;用SDS-PAGE和蛋白质印迹来验证表达和纯化效果;对HDAC1活性进行测定。结果:多数HDAC1存在于大肠杆菌BL-21细胞裂解液的沉淀组分和纯化过程中的未结合组分中,小部分HDAC1可从细胞裂解液的上清液中得以纯化,但未显现出酶活性。用FPLC对HDAC1进行进一步分离,结果表明,HDAC1发生了分子聚集,使得它们的分子量大于正常分子量。结论:活性His/GST-HDAC1不能用大肠杆菌BL21成功表达。
关键词
组蛋白脱乙酰酶1(HDAC1)
HDAC1表达
亲和纯化
HDAC1活性
Keywords
Histone deacetylasel (HDAC1)
HDAC1 expression
affinity purification
HDAC1 activity
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
His/GST-HDAC1在大肠杆菌中表达的研究
吴非
嘉屋俊仁
坂口和靖
《生物技术》
CAS
CSCD
2006
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