栒子试管苗的土壤支撑生根培养和带坨移栽

[目的]完善栒子试管苗的生根与移栽技术。[方法]以粘壤土为培养基支撑物,选用不含大量元素并附加0.75mg/LIBA和15g/L蔗糖的MS液体培养基对栒子试管苗茎段进行生根培养,以琼脂支撑培养为对照,研究不同培养方法栒子试管苗的生根情况及其带坨移栽效果。[结果]土壤支撑培养栒子试管苗的生根率(95.0%)、根长(54.3mm)、根数(2.8条)及叶数(7.0片)均显著高于琼脂支撑培养;土壤支撑培养和琼脂支撑培养的栒子试管苗均具有根毛;土壤支撑培养生根栒子试管苗开瓶炼苗21d后带坨移入营养钵中,在移栽后不喷雾、不覆膜、空气相对湿度低至50%的条件下,其成活率高达96.7%。[结论]以粘壤土为培养基支撑物可显著提高栒子试管苗的生根及带坨移栽效果。

海姆维斯蒂栒子嫩枝扦插繁殖的研究

利用L(9 34)正交试验法,通过测定分析扦插成活率、根系总长度、根鲜质量、最粗根直径、单株叶面积及单株叶鲜质量等指标,研究了插条枝段、基质、生长素对海姆维斯蒂栒子嫩枝扦插繁殖效果的影响。结果表明:用中、梢枝段为插条、珍珠岩作扦插基质,海姆维斯蒂栒子的扦插成活率较高,且有利于扦插苗根系及叶片的生长发育;用IBA、NAA生长素处理对扦插成活率及扦插苗生长发育有一定的促进作用。综合各指标分析,海姆维斯蒂栒子嫩枝扦插时以珍珠岩+NAA+梢部插条组合的扦插成活率最高;混合基质(珍珠岩和草炭等量混合)+IBA+梢部插条及珍珠岩+IBA+中部插条两种组合的扦插苗生长发育较好。

基于Gln/GLS1/α-KG代谢轴和线粒体凋亡信号通路探讨木瓜总三萜抗D-半乳糖诱导GES-1细胞衰老的作用机制

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1衰老的影响及作用机制,为TCS在临床上用于预防胃衰老提供科学数据。将体外培养的GES-1细胞和转染谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)过表达(overexpression GLS1,GLS1-OE)质粒的GES-1细胞用D-gal诱导衰老后,给予TCS和谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)抑制剂bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide(BPTES),考察各组细胞存活率、衰老标志物β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性细胞比例、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化;采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法和比色法检测各组细胞上清液和细胞内GLS1活性、谷氨酰胺(glutamine,Gln)、谷氨酸(glutamate,Glu)、α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)、尿素和氨水平;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中GLS1、线粒体凋亡信号通路相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示,与D-gal模型组和GLS1-OE D-gal模型组相比,TCS可显著降低D-gal诱导衰老GES-1细胞和GLS1-OE衰老GES-1细胞SA-β-gal染色阳性细胞率和MMP,抑制衰老细胞存活,促进其细胞凋亡(P<0.01),降低上清液和细胞内GLS1活性和Gln、Glu、α-KG、尿素、氨含量(P<0.01),降低线粒体中细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)浓度以及细胞中GLS1、增殖细胞核抗原mRNA和蛋白表达(P<0.01),降低细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达和前体半胱氨酸蛋白酶(pro-caspase)-9、pro-caspase-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值(P<0.01),升高胞质中Cyto C浓度和细胞中Bax、Bad、凋亡蛋白酶激活因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)mRNA表达及剪切型半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-9、cleaved-caspase-3、剪切型聚ADP核糖聚合酶-1(cleaved-poly ADP ribose polymerase-1,cleaved-PARP-1)蛋白表达(P<0.01)。以上结果表明,TCS可对抗D-gal诱导GES-1细胞衰老,其作用机制与抑制Gln/GLS1/α-KG代谢轴、激活线粒体凋亡通路,进而促进衰老细胞凋亡、清除衰老细胞密切相关。