雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的影响

目的探讨雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的干预作用。方法雄性SD大鼠采用抽签法随机分为3组:对照组、野百合碱组和雷帕霉素干预组。采用经颈外静脉右心导管插管术检测右心室收缩压;计算右心室肥厚指数;采用HE染色,观察肺细小动脉结构改变情况。结果与对照组相比,野百合碱组大鼠体质量明显减轻,右心室收缩压显著升高,右心室肥厚指数明显增加,肺动脉重构显著。与野百合碱组相比,雷帕霉素干预组大鼠虽然体质量显著减轻,但右心室收缩压明显改善;右心室肥厚指数显著降低;肺动脉重构程度明显减轻。结论雷帕霉素有效干预了野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的形成。提示雷帕霉素有可能作为临床上预防和治疗肺动脉高压的新药。

低氧对大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞功能的影响

目的培养鉴定大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),探讨其对缺氧刺激反应性的不同。方法酶消化法分离大鼠不同级别PASMCs并分为3组:大肺动脉组,包括肺动脉干及肺内一级主干;中动脉组,包括肺内主干的第二级和第三级分支;小肺动脉组,包括肺内主干四级分支后的更细小分支。分别给予常氧(DMEM+2%FBS、5%CO2、21%O2、37℃)和低氧(DMEM+2%FBS、5%CO2、3%O2、37℃)培养48 h,用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法和Western blotting检测增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的蛋白表达水平的方法检测细胞的增生能力;应用伤口愈合实验检测细胞的迁移能力。结果倒置显微镜下PASMCs呈现长梭形,免疫荧光法检测平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)为阳性,生理情况下(常氧),3组肺动脉平滑肌细胞增生及迁移能力均较一致;低氧培养48 h后,中小肺动脉平滑肌细胞的增生与迁移能力均显著高于大动脉,PCNA结果与MTT结果一致,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在低氧条件刺激下,不同级别肺动脉平滑肌细胞反应性不同,中小肺动脉平滑肌细胞的增生及迁移能力均显著高于大肺动脉平滑肌细胞。

微信在医学研究生教学管理工作中的应用及挑战

微信作为最受欢迎的社交软件,正深刻改变研究生的生活和学习方式。分析微信在医学研究生教学管理中的良性应用和带来的挑战,采取相应措施充分发挥微信的优势,提升研究生教育的实效性,进而实现研究生教学管理的线上线下无缝对接。

大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞对血小板源性生长因子的反应性及其意义

目的分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞（PASMC），观察其对血小板源性生长因子（PDGF）反应性的差异，探讨相同刺激因素下，不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制。方法分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组：大动脉组，包括肺动脉干及肺内一级主干；中动脉组，指肺内主干二、三级分支；小动脉组，包括肺内动脉四级及以上分支。分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定。给予PDGF刺激，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性；Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力；伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化。结果不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别；免疫荧光染色结果显示，三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、钙结合蛋白（S100A4）和平滑肌调宁蛋白（calponin）抗体染色均呈阳性，各组间荧光强度无明显差异。正常培养条件下3组细胞增殖率分别为（137．0±12．1）％、（166．1±23．6）％、（156．8±2．5）％，Western blot检测PCNA表达灰度值分别为（0．41±0．10）、（0．55±0．18）和（0．48±0．28），迁移到空白区域的细胞个数分别为（49±14）、（68±13）和（71±7），组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。给予10ug/L PDGF干预48h后，中、小动脉组PASMC的增殖率分别为（215．7±17．8）％、（195．2±6．6）％，均高于大动脉组[（167．0±14．4）％，均P〈0．01]，干预后3组细胞内PCNA蛋白表达灰度值分别为（0．93±0．11）、（1．21±0．14）和（0．62±0．03），迁移到空白区域的细胞个数分别为（194±46）、（171±16）和（68±21），中、小肺动脉组与大动脉组相比差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论尽管不同分支PASMC通常无明显差异，但其增殖与迁移能力的改变在PDGF刺激下根据血管级别而有所不同。提示在相同病理条件下，不同级别肺动脉的病理改变可能与平滑肌细胞本身的反应性不同有关。

Effects of platelet-derived growth factor on the function of smooth muscle cells from different orders of pulmonary artery

Objective To explore the functional responses of normal rat pulmonary artery smooth muscle cells(PASMCs)from different orders of pulmonary artery to the platelet-derived growth factor(PDGF).Methods The pulmonary artery branches were gently isolated from Sprague-Dawley rats(250-350 g)and eventually cut into three groups according to the vascular