响应面法优化紫叶李皮中总多酚的提取工艺及其抗炎活性

为了优化紫叶李(Prunus cerasifera)皮中总多酚(PTP)提取工艺并研究其抗炎活性,在单因素实验的基础上,以总多酚得率为考察指标,乙醇体积分数、提取时间、提取温度、料液比为考察因素,采用Box-Behnken实验设计结合响应面分析法优化PTP的提取工艺,通过二甲苯致耳肿胀法、蛋清致足趾肿胀法测定PTP的抗炎活性.实验结果表明,PTP的最优工艺条件:乙醇体积分数69%、提取时间1.5h、提取温度81℃、料液比1∶31(g∶mL),该工艺下得率为55.3mg/g.PTP能抑制小鼠耳廓及大鼠足趾炎症.结论是该提取工艺稳定可靠,得率较高,且PTP具有明显的抗炎活性.

紫叶李叶黄酮提取工艺的响应面优化及最佳采收月份的确定

使用高效液相色谱仪测定不同条件下超声辅助提取紫叶李叶中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷花青素、芦丁、槲皮素、山奈酚4种黄酮类物质的得率,并根据4种物质的活性,建立紫叶李叶中黄酮类物质得率权重计算公式。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计-响应面法优化紫叶李叶黄酮类物质提取工艺。应用最佳提取工艺处理不同月份紫叶李叶,并根据4种成分权重计算黄酮类物质得率,确定最佳采收月份。结果表明,紫叶李叶黄酮类物质最佳提取工艺为乙醇体积分数63.93%、液料比25∶1(mL/g)、提取温度44.08℃、提取时间41.62 min;最佳采收月份为8月份。此结果重复性好,可信度高,其中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷花青素得率随时间变化最明显,且与日照条件显著相关,该试验对后期相关具体成分的提取具有借鉴意义。

两种动脉粥样硬化模型制备方法的比较

目的建立两种动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的模型,并对建立方法进行比较研究。方法SPF级雄性SD大鼠18只,随机分为SD正常组(SDN)和SD模型组(SDM),SPF级雄性C57BL/6J小鼠12只,ApoE^(-/-)小鼠24只,分为C57BL/6J空白对照组(CN)、ApoE^(-/-)空白对照组(AN)和ApoE^(-/-)模型组(AM)。采用高脂饲料诱导法建立AS模型。比较各组鼠基本情况,检测血清中血脂、炎症因子以及脂肪酸的含量;进行主动脉窦的免疫组化;对实验鼠整体主动脉进行油红O染色以及主动脉根部切片的HE染色。结果模型组(包括SDM、AM组)鼠与正常组(包括SDN、CN、AN组)鼠在体质量、摄食和摄水方面有明显的改变(P<0.05)。与正常组相比,模型组鼠血清中TC、TG、LDL-C水平均明显升高(P<0.05),HDL-C含量明显降低(P<0.05);CRP、MCP-1、IL-1β、IFN-γ、TXB2、DPP-4含量明显升高(P<0.05),PGF-1α和GLP-1水平显著降低(P<0.05);棕榈油酸和亚油酸含量降低(P<0.05),棕榈酸、油酸、硬脂酸的含量升高(P<0.05)。模型组鼠主动脉窦中TNF-α的表达升高,StAR、PPAR-γ的表达呈阴性。AM组小鼠的动脉粥样硬化指数(atherosclerosis index,AI)是SDM组大鼠的1.67倍,SDM组内膜增厚且局部隆起,中膜弹力纤维紊乱,外膜有轻度炎症细胞浸润的现象,呈现早期的AS病理变化,而AM组有大量红色斑块沉积。结论ApoE^(-/-)小鼠的AS病变程度较SD大鼠明显,并且与SD大鼠相比,AS对ApoE^(-/-)小鼠的脏器损伤更小,因此,ApoE^(-/-)小鼠更适合用于构建AS模型。

基于动物实验的环境健康风险评价模型在白洋淀水质监测中的应用

为探索应用动物实验综合评价白洋淀水质的方法及其可行性,拟建立一个模型,收集实验动物的生理病理变化情况,通过环境健康风险评价,分析了白洋淀水体环境质量。实验结果表明:所有模型中空白对照组未出现明显生理及病理变化,而阳性组及样品组均出现一定的生理及病理变化,研究认为基于动物实验的环境健康风险评价模型能够进行综合性的风险识别,满足环境健康风险评价前提条件。经模型计算出环境质量分值(实验动物)为1.125,白洋淀水质(实验动物)轻度污染,并经试验验证该模型可行,且具有一定的借鉴作用和科学意义。