非洲绿猴肾细胞中猪圆环病毒1型的检测

目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型（porcine circovirus type1，PCV1）感染非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6d后，通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜（电镜）检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA，其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带；定量PCR检测显示，感染6d后病毒总拷贝数是感染前的794．3倍；定性和定量PCR的最低检出浓度均为10^2.0拷贝／ml；电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒；原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。