噬菌体PCCM_KpP1172的鉴定及其对大蜡螟幼虫碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌感染的疗效评估

背景碳青霉烯耐药的高毒力肺炎克雷伯菌感染发生率逐年增加,临床治疗困难,死亡率高。使用具有高裂解能力的噬菌体治疗细菌感染是颇具前景的治疗方法。目的针对碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌分离一株新型裂解性T7噬菌体,对该分离株进行生物学特性测定和基因组学测序分析,为临床开展噬菌体治疗提供可应用的噬菌体资源。方法从肺部感染患者的痰液中分离出肺炎克雷伯菌,通过细菌鉴定、药敏分析、全基因组测序和PCR检测验证菌株的毒力基因与耐药基因,以此株肺炎克雷伯菌为宿主菌,在污水中分离出一株裂解性噬菌体,命名为PCCM_KpP1172。测定该噬菌体生物学特性,分析其基因组序列,并通过大蜡螟幼虫感染模型检测该噬菌体的治疗效果。结果该株肺炎克雷伯菌基因组分析存在耐药基因与毒力基因rmpA2、rmpA、iroN、icu。以此菌株为宿主菌分离到新型肺炎克雷伯菌噬菌体,命名为PCCM_KpP1172,在宿主菌菌苔上可形成完全透明的噬菌斑并伴晕圈;透射电镜下呈现有尾噬菌体目短尾病毒科病毒的典型形态特征;一步生长曲线显示其潜伏期为15 min,最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.0001,对ST11KL64型肺炎克雷伯菌有广泛裂解范围。基因组分析显示,该噬菌体为双链DNA(总长度为40222 bp),G+C含量为53%,基因组包含49个开放阅读框(open reading frames,ORF),无毒力或抗生素耐药性相关基因。基于系统发育分析,该噬菌体可归属于有尾噬菌体目Studiervirinae亚科Przondovirus属的一个新种。此外,噬菌体PCCM_KpP1172可在体外3 h内有效抑制碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的生长,并能提高宿主菌感染的大蜡螟幼虫存活率(P<0.01)。结论本研究针对碳青霉烯耐药的高毒力肺炎克雷伯菌分离并鉴定了一株新的T7噬菌体PCCM_KpP1172,具有高裂解力,无耐药基因和毒力基因,对大蜡螟幼虫感染模型具有良好治疗效果。

哮喘儿童呼出气一氧化氮水平与过敏原、外周血EOS、总IgE的相关性分析

目的 探讨支气管哮喘儿童呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)水平与过敏原、外周血嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)计数、血清总IgE的相关性及临床意义。方法 对解放军总医院海南医院2015年6月-2017年6月儿童门诊确诊的79例哮喘儿童病例资料进行回顾性分析。结果 79例哮喘儿童中,≥2种过敏原患者的FeNO值中位数显著高于0 ~ 1种过敏原患者(15 ppb vs 9 ppb,P=0.002)。尘螨过敏患者的FeNO值中位数显著高于非尘螨过敏患者(20 ppb vs 10 ppb,P=0.000);FeNO与EOS、IgE有显著相关性(r=0.480,P=0.000;r=0.450,P=0.000)。结论 支气管哮喘儿童FeNO水平与过敏原、外周血EOS、总IgE具有紧密联系,其在哮喘儿童的诊疗中有重要临床意义。

肺奴卡菌感染2例报道并文献复习

目的探讨肺奴卡菌感染的临床特征、诊治方法及预后。方法对解放军总医院2009-2011年收治的2例肺奴卡菌感染病例进行报道,同时检索国内同期文献共35例,对以上37例进行回顾性分析。结果 37例肺奴卡菌感染患者中,26例(70.3%)存在基础疾病,21例(56.8%)有糖皮质激素或免疫抑制剂治疗史。孤立性肺部感染26例(70.3%),播散性感染11例(29.7%)。主要临床表现为发热34例(91.9%)、咳嗽29例(78.4%)、咯痰25例(67.6%)等。27例(73.0%)胸部CT主要表现为结节状或肿块影,9例(24.3%)伴有空洞形成。37例均培养出奴卡菌,其中星形奴卡菌感染19例(51.4%),巴西奴卡菌感染2例(5.4%),未分型16例(43.2%)。13例(35.1%)接受复方磺胺甲恶唑单药治疗,16例(43.2%)接受复方磺胺甲恶唑联合其他药物治疗,8例(21.6%)接受喹诺酮类、氨基糖苷类、β-内酰胺类等单用或联合治疗,合并脓胸者给予引流。好转或治愈33例(89.2%),无效1例(2.7%),因呼吸衰竭死亡3例(8.1%)。结论患有基础疾病及免疫功能低下是发生肺奴卡菌感染的基础,胸部CT主要表现为结节状或肿块影、部分伴有空洞形成,奴卡菌培养阳性是确诊该病的惟一方法,治疗药物首选磺胺类,必要时应联合用药。

纤维化性间质性肺疾病预后因素的前瞻性队列研究

目的探讨纤维化性间质性肺疾病的临床特点和发展为进行性纤维化型及死亡的风险因素。方法选择2019年5月至12月解放军总医院呼吸科收治的58例纤维化性间质性肺疾病患者为研究对象。收集临床资料,行肺CT、肺功能等检查,同时行6 min步行试验,应用加利福尼亚大学圣地亚哥分校呼吸困难问卷(SOBQ)进行呼吸困难评分,并随访至1年进行病情评估。应用SPSS 19.0软件和R 3.6.1软件进行统计分析。根据数据类型,分别采用t检验或χ2检验进行组间比较。采用竞争风险模型的生存分析和Fine-Gray回归模型提取发展为进行性纤维化型和死亡风险的影响因素。结果58例患者中,35例(60.34%)诊断为特发性肺纤维化(IPF),14例(24.14%)诊断为结缔组织病相关间质性肺病,9例(15.52%)归为其他原因所致的肺纤维化;12例(20.69%)患者发展为进行性纤维化型,8例(13.79%)患者死亡(6例死于纤维化急性加重)。单因素分析结果显示,发展为进行性纤维化型的风险因素是诊断为IPF、高分辨CT(HRCT)网格影评分和蜂窝影评分高,死亡的风险因素是6 min步行距离短(<300 m的患者死亡率明显增高)、SOBQ评分高。多因素分析结果显示,HRCT网格影评分高是发展为进行性纤维化型的风险因素(RC=0.687,HR=1.99,95%CI 1.03~3.85,P=0.042),未发现死亡的风险因素。结论诊断为IPF、HRCT网格影和蜂窝影评分高的患者发展为进行性纤维化型的风险更高;6 min步行距离<300 m、SOBQ评分高的患者死亡风险更高。

血清生物标志物对纤维化性间质性肺疾病预后的预测价值

目的探讨与肺泡上皮细胞功能障碍相关的血清生物标志物对纤维化性间质性肺疾病(fibrosing interstitial lung diseases,FILD)预后的预测价值。方法前瞻性入组FILD患者,收集临床资料,检测生物标志物并随访1年进行病情评估。采用竞争风险模型的生存分析和Fine-Gray回归模型提取发展为进行性纤维化型和死亡风险的影响因素。结果共入组58例患者,35例诊断为特发性肺纤维化,14例诊断为结缔组织病相关间质性肺病,9例归为其他原因所致肺纤维化。12例(20.69%)患者发展为进行性纤维化型,8例(13.79%)死亡。单因素分析结果显示发展为进行性纤维化型的风险因素是糖蛋白抗原125(carbohydrate antigen-125,CA-125)基线增高,死亡的风险因素是糖蛋白抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)基线增高;多因素分析结果显示:CA19-9基线增高是死亡的风险因素(回归系数0.007,风险比1.007,95%CI:1.001~1.061,P=0.044)。结论CA-125基线增高的患者发展为进行性纤维化型的风险更高;CA19-9基线增高的患者死亡风险更高。

血培养阳性报警时间在成人凝固酶阴性葡萄球菌血流感染诊断中的意义

目的评价血培养阳性报警时间(time to positivity,TTP)在成人凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococci,Co NS)血流感染诊断中的意义。方法对本院2014年8月-2015年12月血培养中分离出Co NS的142例成年住院病例进行回顾性分析,比较TTP在血流感染组和污染组中的差异,并绘制ROC曲线,分析TTP对成人Co NS血流感染的诊断意义。结果 64例血流感染组患者和78例污染组患者的TTP分别为(24.82±9.46)h、(42.71±19.11)h,差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线显示TTP=24.90 h可作为区分血流感染和污染的最佳切点,此时AUC为0.810(95%CI为0.740~0.880),诊断灵敏度为64.1%,特异度为87.2%。结论 TTP对成人Co NS血流感染的诊断有一定参考价值,可作为一种辅助诊断指标。

鲍曼不动杆菌血流感染危险因素及菌株耐药性分析

目的探讨鲍曼不动杆菌血流感染患者的感染危险因素及细菌耐药性。方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心呼吸科2015年1月～2017年12月住院的115例鲍曼不动杆菌血流感染患者的病例资料,分别从患者年龄、性别、基础疾病、机械通气、侵入性操作、经验性抗菌药物的使用以及细菌耐药性等方面进行分析。结果115例患者中男性80例(69.6%),女性35例(30.4%),平均年龄(51.7±19.8)岁。进行侵入性操作97例(84.3%),机械通气患者60例(52.2%)。103例(89.6%)患者入院后接受经验性抗菌药物治疗,其中接受碳氢酶烯类抗生素66例(57.4%),同时接受3种或3种以上抗菌药物联合应用者79例(68.7%),经治疗后死亡患者45例(39.1%)。菌株耐药率均较高,2015、2016及2017年度,分离菌株包括碳青霉烯类药物在内的所有抗菌药物的敏感率均低于35%。结论鲍曼不动杆菌血流感染患者多有接受侵入性操作、机械通气以及多种抗生素的经验性治疗史等危险因素,病死率高,且多为耐药菌株感染,应引起重视。

多重耐药鲍曼不动杆菌血流感染及患者预后的危险因素分析

目的探讨影响多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)血流感染及患者预后的危险因素。方法回顾性分析2015年1月至2017年12月中国人民解放军总医院第一医学中心收治的115例血流感染患者的临床资料。115例患者血培养结果均为鲍曼不动杆菌(Ab)或MDR-Ab感染,并根据该结果分为Ab组(20例)和MDR-Ab组(95例);根据MDR-Ab血流感染患者的病情转归,分为死亡组(42例)和存活组(53例)。收集患者年龄、性别、入住重症监护病房(ICU)、经验性抗菌药物使用等临床资料。分析患者感染MDR-Ab及其预后的危险因素。结果MDR-Ab组病死率明显高于Ab组[44.2%(42/95)比15.0%(3/20)](P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,侵入性操作、经验性使用碳青霉烯类药物、经验性治疗的抗菌药物种类≥3种是发生MDR-Ab血流感染的独立危险因素(均P<0.05)。死亡组入住ICU、机械通气、合并免疫抑制状态、血流感染前器官衰竭比例均明显高于存活组(均P<0.05)。经验性抗菌药物使用方面,死亡组使用碳青霉烯类药物、喹诺酮类药物、抗真菌药物、使用碳青霉烯类药物≥3 d、使用抗真菌药物≥3 d、使用抗菌药物种类≥3种比例均明显高于存活组(均P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析,机械通气、血流感染前器官衰竭、免疫抑制状态以及经验性使用碳青霉烯类药物是MDR-Ab血流感染患者死亡的独立危险因素(均P<0.05)。结论侵入性操作、经验性使用碳青霉烯类药物、经验性治疗的抗菌药物种类≥3种是MDR-Ab血流感染的独立危险因素。机械通气、血流感染前器官衰竭、合并免疫抑制状态和经验性使用碳青霉烯类药物是MDR-Ab血流感染患者死亡的独立危险因素。

机械气道廓清技术临床应用专家共识

机械气道廓清技术是指通过机械方法清除气道淤积分泌物、维持气道通畅的治疗手段。目前机械气道廓清技术在临床中应用广泛,在清除呼吸道分泌物、改善呼吸困难症状、预防和减少呼吸道感染等方面有显著作用,但有关机械气道廓清技术临床应用的专业指导和规范流程尚未达成共识,因此,中华医学会呼吸病学分会呼吸治疗学组组织相关专家撰写了机械气道廓清技术临床应用专家共识。共识对机械气道廓清技术的定义、发展历史、工作原理和作用机制及临床应用等方面进行了系统性阐述,旨在增强对机械气道廓清技术的认知,为临床工作者提供规范的机械气道廓清技术应用流程,指导临床规范应用。

人苍白杆菌血流感染的临床研究

目的探讨人苍白杆菌血流感染患者的特点,为临床诊疗提供参考。方法回顾性分析2011年1月-2013年12月医院6例患者送检血液标本鉴定为人苍白杆菌感染的临床资料,采用VITEK-2全自动细菌鉴定分析系统及其配套的革兰阴性杆菌鉴定卡进行细菌鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验。结果血液标本中共检出6株人苍白杆菌,其感染患者多有严重基础疾病、存在免疫功能低下;6例患者均出现发热及C-反应蛋白升高,4例患者白细胞升高占66.7%、5例出现中性粒细胞升高占83.3%;6株人苍白杆菌对青霉素类、头孢呋辛、头孢他啶等二、三代头孢菌素以及含酶抑制剂的复合抗菌药物几乎均耐药,对亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、米诺环素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶敏感性较高;治愈或好转4例,放弃治疗或死亡2例。结论人苍白杆菌感染为机会性感染,病原菌的分离和鉴定是诊断本病的关键,治疗应依据菌株的药敏结果选择合理的抗菌药物。