禽大肠杆菌病的研究鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定

为了解我国鸡致病性大肠杆菌的血清型,本试验鉴定了从我国8个省、市(自治区)收集的鸡致病性大肠杆菌109侏,在已定型的80株中,O78为34株,占定型菌株的42.5%,O2为14株,占17.5%;O1为7株,占8.75%;O7为4株,占5%;O11为5株,占6.25%,已定的其他血清型还有 O20、O22、O23、O25、O36、O46、O65、O73、O88、O109、O157。由此可见我国流行的鸡致病性大肠杆菌的血清型主要有 O78、O2、O1,为定型菌株的50.45%。

鸡传染性支气管炎病毒SD060311株和GD080122(肾型)株的全基因组序列分析

通过对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株SD060311和GD080122(肾型)的基因组进行RT-PCR扩增和基因序列测定,结果表明其基因组大小分别为27788nt和27407nt,与已报道的IBV全基因组序列大小不完全一致,但基因组编码基因的顺序与已报道的IBV一致,均为5′cap-Replicase-S-3a-3b-3c-M-5a-5b-N-poly(A)3′。与已报道的IBV毒株和火鸡冠状病毒进行比较,绘制系统进化树,结果显示,SD060311和GD080122(肾型)分离株自成一支,与中国分离株BJ株和A2株的亲缘关系最近。本研究不仅丰富了冠状病毒的生物信息数据库,且为进一步研究IBV致病机理和变异机制等奠定了基础。

矿物油佐剂注射动物的局部病理学观察

1981年以来,我们进行了矿物油佐剂的系统研究,选出了国产的杭州7号白油、石化院的合成白油、司本80用于制油乳剂苗—禽霍乱油苗、鸡新城疫油苗、兔出败油苗、炭疽纯化油苗等,均证明提高了免疫效果,延长了免疫期。但是,关于国产的矿物油及乳化剂对动物的毒性尚缺少充足的试验资料,为了进一步明确这个问题,本试验采用上述三种国产矿物油佐剂,以不同剂量,适当途径注射动物,观察了试验动物的全身反应及局部病理学变化。

禽大肠杆菌病防制的研究 鸡致病性大肠杆菌O78菌株的纤毛特性观察

本试验采用透射电子显微镜技术,在我国首次观察到了鸡致病性大肠杆菌 O78菌株的纤毛存在。72小时培养物负染观察可见菌体表面带有密集、匀质、僵直的、粗细不同、长短不一的纤毛。并应用动物红细胞凝集试验(HA),首次对078菌株在不同培养条件下的纤毛表达情况进行了检测。结果发现 O78菌株的纤毛表达适宜的培养基为改良Minca 汤,最佳的培养温度为37℃,静止培养的最佳时间为72小时。对27个 O78菌株的HA 检测发现,纤毛阳性菌株的检出率为74%。O78菌株的纤毛血凝性质属于甘露糖敏感血凝类型(MSHA),甘露糖能抑制该纤毛与动物红细胞的凝集。

沙拉沙星注射液对人工诱发仔猪大肠杆菌病的临床疗效试验

本试验以 5%氟哌酸注射液为对照药物 ,用沙拉沙星注射液 1 .2 5、2 .5及 5mg/kg体重3个剂量分别肌肉注射人工诱发大肠杆菌病仔猪 ,连续用药 3d,治愈率分别是 85.7%、92 .8%、1 0 0 % 。

西藏牦牛大肠埃希氏菌的分离鉴定与毒力测定

从自然病死的西藏牦牛的心、肝、脾、肾、淋巴结与血液病料中分离到128株疑似大肠杆菌,鉴定结果表明,有32株为大肠埃希氏菌,其中的10株菌有致病性;在这10株中3株毒力较强,为产毒性大肠埃希氏菌,致病率达90%以上,其余7株中等毒力,致病率达50%。首次鉴定出牦牛大肠杆菌血清型有18种:O142,O148,O158,O26,O43,O159,O39,O108,O91,O21,O14,O13,O36,O88,O24,O18,O68和O25。3株毒力较强菌株的血清型鉴定结果表明,1号菌株为O148,O142,O158混合型;2号菌株为O26,O148,O142,O158混合型;30号菌株为O26,O148混合型。

鸡传染性支气管炎病毒基因型与血清型相关性初步研究

为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因型与血清型之间的相关性,本研究以国内不同地区的17株IBV分离株、2株疫苗株(M41、W93)和1株强毒株(X株)为研究对象,经RT-PCR扩增获得20株IBV的S1基因并进行测序。将其分别与GenBank中的20株国内外参考IBV株的S1基因进行序列比较,绘制S1基因系统进化树。结果表明:这20株IBV与20株参考病毒株可分为3个基因型:LX4型、Mass型和X型,其中本研究中绝大多数IBV株属于LX4型。根据这一基因分型结果,从这3个基因型中分别选取差异性较大的6株IBV,即X型的X株,Mass型中的M41、W93、333-3株,LX4型中的DC07-1、333-7株,将其分别免疫SPF鸡制备高免血清,进行血清交叉中和试验,计算IBV各病毒株间抗原性的相关系数(R)。结果表明:6株IBV经血清交叉中和试验可分为3个血清型:333-3、M41、W93株为同一血清型,DC07-1、333-7株为同一血清型,X株为另外一个血清型。以上结果表明:IBV的基因分型与血清分型相一致。这为目前IBV的分型提供一定的参考依据,对今后鸡传染性支气管炎的防控具有一定的意义。

兽用疫苗的分类及命名

一、兽医疫苗1．病名＋制品种类。马传染性贫血活疫苗、传染性支气管炎灭活疫苗、猪萎缩性鼻炎灭活疫苗。2．病名＋X型（亚型）＋制品种类。

中国禽用疫苗现状及品牌疫苗的选择

一，中国兽用疫苗近期发展的三个阶段 1990-2005年：探索阶段改革开放后，畜牧业快速发展，用于预防传染病的兽用疫苗随之大量需求，由于疫苗研发滞后，疫苗市场供应出现短缺，大量的中试产品在实际生产中使用。

不同制备方法对鸡胚成纤维细胞产量的影响

采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞 (CEF)单层 ,在同等条件下均以成纤维细胞为主 ,并伴有少量的上皮细胞 ,仅有全胚法含有极少量的肝细胞 ;培养时细胞贴壁和生长状况 3种方法无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;CEF的产量 ,半胚法明显高于其他

鸡马立克病活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒检测方法的建立

为建立鸡马立克病(MD)活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的间接免疫荧光检测方法,本研究通过向MD活疫苗中添加不同剂量的REV,用拟定的方法对样品检测REV。结果表明,Ⅰ型MD活疫苗、火鸡疱疹病毒活疫苗(Fc-126株)和MD二价活疫苗(HVT+CVI988株)中污染REV的最低检出量分别为每500羽份疫苗中污染5TCID50、10TCID50和15TCID50的REV。应用建立的方法对国内10家企业生产的43批MD活疫苗进行了检验,结果显示,2个企业生产的4批疫苗REV检测阳性。随机选取了5批IFA检测阴性样品和4批IFA检测阳性样品,按鸡检查法进行外源病毒检验,结果两种方法对REV污染检验结果的符合率为100%。因此,本研究建立的IFA法可替代鸡检查法,用于疫苗中REV污染的检验。

多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株

用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。

支原体检验用培养基的改进

对于支原体检验,最关键的问题是培养基的质量。支原体生长要求的条件非常苛刻,质量好的培养基能使支原体生长滴度达到10-9/ml,反之质量差的只能达到10-1/ml。培养基的质量严重影响着支原体检验的准确性。长期以来许多检验人员对支原体检验培养基的配制方法深感棘手,为此对...

三种布鲁氏菌病疫苗株的毒力比较

为系统比较我国现有布鲁氏菌病疫苗株A19、M5和S2的毒力,分别用上述3种疫苗株以1×105CFU/只免疫Balb/c小鼠,免疫后每隔2周采集小鼠脾脏,分离细菌,测定各疫苗株在小鼠脾脏中的存留时间。结果 A19、M5、S2在小鼠体内存活时间依次为14周、大于16周、6周。将以上3种疫苗株分别以1×109CFU/只免疫Hartley豚鼠,15日后测定豚鼠脾脏含菌量,结果 A19、M5、S2免疫后每克脾脏含菌量分别为2.8×104CFU、大于6.7×105CFU、3.8×103CFU。研究结果表明,我国目前使用的布鲁氏菌疫苗中,S2毒力最弱,A19其次,M5最强。

数学模型在全国布病监测点疫情监测预报中的应用

根据1990～1995年布氏菌病全国监测点羊、牛、猪、人的血清学阳性率资料,利用灰色模型和加权平均法,建立了两种数学预报模型,将两种预报值取算术平均进行综合后,给出了1996～1997的布病阳性率预报值。

兔病毒性出血症病毒西藏分离株毒力的测定

对一株兔病毒性出血症病毒(RHDV)西藏株进行血凝性、特异性、致病性及毒力鉴定。结果表明:此株RHDV血凝价高达10240以上;RHDV抗血清可特异性抑制该株病毒对人“O”型红细胞的凝集;RHDV的最小致死量为10-5/mL。说明此分离株是一株具有高致病力的RHDV强毒株。

鸡抗REV血清的制备与检定

用网状内皮组织增生症病毒(REV)HA9901株免疫SPF鸡,无菌采血制备鸡抗REV血清。通过ELISAI、FA、AGP、HI等方法对制备的血清进行检测,未检出禽类常见的其他17种(或亚型)病毒的抗体,该血清具有良好的特异性。通过测定,该血清用于间接免疫荧光试验(IFA)的效价为1∶2000,用于IFA检测REV的染色效果与REV单抗(11B18和11B54的混合物)相当。试验结果表明,该批血清1000倍稀释可作为一抗,用于REV的间接免疫荧光检测。

仔猪大肠杆菌腹泻K88、K99、987P三价灭活菌苗的研究

自行分离含有 K88、K99、987P 纤毛抗原的大肠埃希氏杆菌3株,用同一种培养基和连续通气培养方法,研制成功仔猪大肠杆菌性腹泻 K88、K99、987P 三价灭活菌苗,共试制13批,1.4万头份,经试验室枪验后,在北京、河北等省、市进行了区城试验,免疫怀孕母猪1万余头,其中对12个猪场的770头怀孕母猪和7235头仔猪进行了观察统计,结果免疫组,10日龄内仔猪腹泻发病率平均11.4%,死亡率平均4.2%;非免疫对照组,发病率平均40.7%,死亡率平均21.8%。免疫组与对照组相比较,免疫组仔猪发病率平均下降29%,死亡率平均下降17.6%。12个猪场用菌苗后的经济效益增值12.4万元。菌苗安全,在4—8℃保存期一年。

含LacZ表达盒的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建

根据GenBank已发表的鸭瘟病毒活疫苗C-KCE株基因组序列设计一对引物,扩增出含TK基因完整ORF的2.7 kb的片段,克隆至pMD18T simple载体。利用该片段内的两个酶切位点Xho I和EcoR V,切除TK基因内的244 bp,用T4 DNA聚合酶补平末端;pVAX1-LacZ用Nru I和Nar I双酶切,回收含LacZ表达盒的4.1 kb片段,通过平末端连接将LacZ表达盒插入到TK基因中,从而获得了转移载体pTK-LacZ,为构建重组鸭瘟病毒奠定了基础。

兽用生物制品的支原体污染检验及注意事项

制备支原体污染检验培养基所使用原材料水、血清、无机盐类、乳蛋白水解物、琼脂的质量要求 ,制备培养基方法 ,检验操作及检验中注意事项。