可视脑片膜片钳技术前庭核团脑片的制备

目的改良脑片制备方法，探讨影响脑片活性的实验因素。方法在国内外报道常用方法的基础上进行改良，制备含有前庭内侧核的脑干脑片，从肉眼观、镜下观和放电特性三个方面判断脑片活性，观察鼠龄、生理溶液、温度等因素对脑片活性的影响。结果建立了稳定的脑片制备方法。通过红外微分干涉相差技术可直接观察脑片表层下50～100μm神经元的立体影像，并可稳定地进行电生理记录；鼠龄越小神经元活性越易恢复，在成年鼠制备脑片时采取心脏灌注、使用高蔗糖溶液、较高温度预孵育等措施可提高脑片活性；孵育和记录温度直接影响神经元的兴奋性，一定范围内提高温度可提高神经元兴奋性，但会缩短恼片存活时间。结论改良的脑片制备方法简单可行，可为电生理研究提供大量具有良好活性的神经元，脑片制备方法的选择和实验环境的控制应根据所选用动物的年龄而调整。

内镜下鼻中隔方形软骨再次成形术的临床观察

目的 探讨鼻中隔尾端方形软骨残留偏曲行内镜下再次软骨成形术的适应证和手术方法。方法 回顾性分析2015年1月至2019年3月19例因鼻中隔方形软骨尾端残余偏曲于首都医科大学附属北京友谊医院行鼻内镜下再次软骨成形术患者的临床资料,统计方形软骨尾端偏曲发生率、手术方法和随访结果。结果 19例患者中单一方形软骨尾端偏曲8例(42.11%),合并多处残留偏曲者11例(57.89%)。18例接受内镜下再次软骨成形术,1例因鼻小柱偏曲及外鼻畸形接受开放式外鼻-鼻中隔成形术。内镜下再次软骨成形术采用鼻中隔偏曲凹面侧半贯穿切口,分离黏软骨膜,完全暴露方形软骨尾端,软骨凹面侧行网格状软骨切开减张。首次鼻中隔手术距再次手术时间为(15.12±11.68)年,所有患者再次手术前均有持续鼻塞症状,术后随访(24.47±13.08)个月,全部患者鼻塞症状均缓解。结论 方形软骨尾端是鼻中隔手术后最常见的偏曲残留部位之一,内镜下软骨切开成形术可用于矫正鼻中隔方形软骨尾端残留偏曲,但不适用于伴鼻小柱偏曲和外鼻畸形的患者。

累及上颌窦牙源性囊肿经鼻内镜手术治疗及预后观察

目的观察分析累及上颌窦的牙源性囊肿鼻内镜手术治疗效果及其预后。方法回顾性分析2016年1月~2021年9月在我科经鼻内镜手术治疗累及上颌窦的牙源性囊肿33例,总结其临床特点、手术进路选择和术后随访结果。结果本组累及上颌窦的牙源性囊肿患者中,包括根尖囊肿22例和含牙囊肿11例。最常见症状是单侧面颊肿痛或颌面部隆起。鼻窦CT或上颌骨锥形束计算机断层扫描成像(CBCT)是主要检查方法,多表现为累及上颌窦腔的薄壁骨性囊肿。全部患者均采用鼻内镜下鼻甲反转扩大下鼻道入路行囊肿造袋术,合并上颌窦口腔瘘者同期行瘘管修补术。术后随访3月左右,所有病例均未见囊肿复发,仅1例出现患侧上列牙麻木感。结论经鼻内镜囊肿造袋术处理累及上颌窦的牙源性囊肿,手术创伤小,囊肿复发率低。

别把过敏性鼻炎当感冒

在临床上，常有患者把过敏性鼻炎当成感冒，乱吃感冒药，结果病情越来越重。那么，如何鉴别感冒和过敏性鼻炎？

豚鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性

本文旨在探讨豚鼠I型前庭毛细胞上有无胆碱能受体存在，并对其相应的离子通道特性进行研究。应用全细胞膜片钳技术检测急性分离的豚鼠I型前庭毛细胞对乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）的反应。结果显示，7．5％（21／279）的I型前庭毛细胞对10-1000μmol／L ACh敏感，引发明显的外向电流。该电流对ACh的反应呈浓度依赖性，半数激活浓度（EC50）为（63.78±2．31）μmol／L，但该电流为非电压依赖性。在-50mV钳制电压和正常细胞外液中，100μmol／L ACh激活-持久缓慢的外向电流，电流幅值为（170±15）pA，该电流幅值依赖于胞外钙离子浓度，可被胞外给予的钙依赖性钾通道拮抗剂TEA阻断。I型前庭毛细胞的再次激活时间不小于1min。长时间暴露在ACh的情况下，受体离子通道不会发生自发性关闭。以上结果提示，部分豚鼠I型前庭毛细胞上存在胆碱能受体，胞外给予ACh可激活-持久缓慢的外向电流，其胆碱能受体通道对于ACh的作用呈浓度依赖性和外钙依赖性、非电压依赖性或失敏性。本研究结果对于阐明前庭传出神经的功能及其作用机制，证实并揭示I型前庭毛细胞上存在传出神经递质受体以及日后临床指导眩晕疾病的康复治疗具有重要的意义。

豚鼠Ⅰ型前庭毛细胞改良分离法

目的探索一种能提供更多数量并更长时间保留豚鼠单离Ⅰ型前庭毛细胞细胞活性的分离方法。方法将耳廓反射正常的杂色豚鼠48只随机分为胶原酶Ⅳ+常用分离法组(A组)、胰蛋白酶+常用分离法组(B组)、胶原酶Ⅳ+改良分离法组(C组)和胰蛋白酶+改良分离法组(D组),每组12只,分别用0.25%胶原酶Ⅳ和0.05%胰蛋白酶结合文献报道常用液体和改良液体外加机械分离法分离豚鼠前庭Ⅰ型毛细胞,通过光镜、膜片钳、胞内钙成像等方法观察、鉴定和评价Ⅰ的活性。结果A组平均每耳分离出存活单离Ⅰ型前庭毛细胞25个,3h后存活细胞约14个,6h后存活细胞约8个,3h静息膜电位平均为-55±10mV,胞内钙离子浓度平均为105±15nmol/L;B组平均每耳分离开存活单离Ⅰ型前庭毛细胞40个,3h后存活细胞约19个,6h后存活细胞约6个,3h静息膜电位平均为-60±10mV,胞内钙离子浓度平均为95±10nmol/L;C组平均每耳分离出存活单离Ⅰ型前庭毛细胞24个,3h后存活细胞约为17个,6h后存活细胞约11个,3h静息膜电位平均为-55±10mV,胞内钙离子浓度平均为95±15nmol/L;D组平均每耳分离出Ⅰ型前庭毛细胞42个,3h后存活细胞约30个,6h后存活细胞约23个,3h静息膜电位平均为-60±10mV,胞内钙离子浓度平均为90±10nmol/L,且胞内钙离子浓度更稳定。结论与传统的胶原酶Ⅳ酶解加机械分离法相比,以胰蛋白酶酶解结合改良式液体外加机械分离技术分离方法简便易行,能提供足够量的存活时间较长的豚鼠单离Ⅰ型前庭毛细胞,适用于对细胞活性要求较高的实验如膜片钳电生理研究等。

N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠内耳耳蜗及前庭中的表达

目的研究N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节中的表达。方法运用RT-PCR技术分别检测大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节编码N型乙酰胆碱受体α10亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠前庭终器、基底膜上有表达,在Scarpa’s神经节、螺旋神经节中无表达。结论在前庭终器和基底膜上扩增出标志N型乙酰胆碱受体α10亚基基因表达的PCR产物,为乙酰胆碱是内耳重要的神经递质之一提供了支持,并为N型乙酰胆碱受体在内耳中的传入-传出调节中的作用提供了依据。

鼻腔呼吸道上皮腺瘤样错构瘤的临床特征分析

目的:分析鼻腔呼吸上皮腺瘤样错构瘤(respiratory epithelial adenomatoid hamartoma,REAH)病理及临床特点,总结诊断要点,提高该病诊治经验。方法:回顾性分析16例REAH的临床资料,总结该病的临床表现、病理学特点、影像学特征、手术治疗方式及预后。结果:16例鼻腔REAH患者,同时伴有鼻窦炎10例(62.50%),伴有内翻性乳头状瘤1例(6.25%),伴有血管瘤1例(6.25%);5例(31.25%)患者有鼻腔鼻窦手术史,其中1例有3次鼻腔鼻窦手术史,1例有2次鼻腔鼻窦手术史,3例有1次鼻腔鼻窦手术史;发生于双侧嗅裂10例(62.50%),单侧嗅裂2例(12.50%),单侧中鼻甲3例(18.75%),鼻咽部1例(6.25%)。16例患者均经病理诊断为REAH,其中病变位于双侧嗅裂患者的术前鼻窦CT上均可观察到嗅裂对称性增宽及中鼻甲外移,双侧嗅裂宽度平均为(9.90±2.70)mm,宽窄嗅裂比值为1.21±0.19,两侧鼻窦Lund-Mackay评分差异无统计学意义。患者手术均在全身麻醉鼻内镜下完成,随访1~66个月,均无复发。结论:结合临床表现及内镜检查和影像学特征有助于REAH的术前诊断,通过内镜下的完整切除可以达到良好的治疗效果。

下鼻甲反转扩大下鼻道入路处理上颌窦及毗邻结构病变

目的：探讨下鼻甲反转扩大下鼻道入路处理上颌窦及毗邻结构病变的可行性及手术疗效。方法：28例患者中,上颌骨囊肿9例（其中4例伴上颌窦口腔瘘）,牙源性上颌窦炎2例（其中1例伴口腔瘘）,上颌窦囊肿3例,上颌窦后鼻孔息肉2例,上颌窦内翻性乳头状瘤5例,上颌窦内翻性乳头状瘤伴中度分化鳞状细胞癌浸润1例,眶下壁骨折4例,上颌窦前壁骨折1例,颞下窝囊肿伴真菌性上颌窦炎1例。全部患者均在鼻内镜下经扩大下鼻道入路完成手术。结果：均无术中并发症,随访3～36个月未见复发。结论：下鼻甲反转扩大下鼻道入路可用于处理各种上颌窦腔、窦壁、翼腭窝和颞下窝病变,手术视野清楚,成功率高。

共同腔畸形患者人工耳蜗植入手术进路的选择

目的:探讨共同腔畸形患者人工耳蜗植入手术进路的选择。方法:对17例耳蜗前庭外半规管共同腔畸形患者进行术前影像学及听力学评估,选择常规面隐窝进路或经乳突侧外半规管进路2种手术方法行人工耳蜗植入。结果:17例耳蜗前庭外半规管共同腔畸形患者全部顺利开放共同腔并植入电极,其中3例经常规面隐窝入路,14例经乳突侧外半规管入路。全部患者成功植入电极,4例术中出现"井喷",无面瘫、脑脊液漏及脑膜炎等并发症发生。术后随访,全部患者建立主观听觉,EABR检出非典型Ⅴ波,平均声场听阈为65dB HL,汉语单元音言语识别率平均为75%,单辅音半开放式测试识别水平<10%。结论:①共同腔畸形患者人工耳蜗植入手术进路的选择:如果术前影像学检查在共同腔畸形的中后鼓室部可见耳蜗底转或大部分底转结构,按常规面隐窝进路植入电极;如前庭、外半规管、耳蜗完全融合呈近球形,经乳突侧外半规管进路植入电极。②共同腔畸形患者人工耳蜗植入进路的选择会影响电极植入位置的准确性和术后疗效。③共同腔畸形患者人工耳蜗植入术后效果较差,达不到社会语言交流水平。

大鼠前庭内侧核神经元的内在膜特性及其对前庭模拟传入信号的反应

目的观察大鼠前庭内侧核神经元的膜特性及其对前庭外周模拟传入信号的放电反应，探讨前庭系统生理功能的可能机制。方法运用红外微分干涉相差技术，可视状态下对前庭内侧核神经元进行全细胞记录，按平均动作电位形状对神经元分型，比较不同类型神经元膜特性的差异。向胞内注入刺激电流以模拟头部作直线加速和匀速旋转运动时外周前庭的传入信号，观察神经元的放电反应。结果在大鼠前庭内侧核神经元可记录到放电活动，在低钙高镁人工脑脊液中放电活动仍然存在。神经元可被分为有单相后超极化及A样整流的A型（33％），有双相后超极化的B型（63％），以及同时具有或不具有以上特征的其他型（4％）；A、B型神经元的部分主动膜特性存在明显差异，对同样的模拟传入信号可作出不同的反应。结论大鼠前庭内侧核神经元的放电基于其内在膜特性的自发活动；大部分神经元的放电表现为典型的A型或B型，但仍有少量非典型放电存在；A、B型神经元膜特性和放电反应特性的差异是它们执行不同生理功能的基础。

慢性鼻-鼻窦炎患者鼻内镜手术前心理学特征初步分析

目的 对慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者鼻内镜手术前的心理学特征进行初步研究,分析导致心理问题的危险因素.方法 连续选取2013年8月至2014年4月间在首都医科大学附属北京友谊医院行鼻内镜手术的患者117例,采用Zung焦虑自评量表（SAS）、Zung抑郁自评量表（SDS）、症状自评性量表（SCL-90）、鼻腔鼻窦结局测量20条（SNOT-20）、视觉模拟量表（VAS）以及Lund-MackayCT评价系统进行术前心理状态、生活质量和疾病严重程度的评估.以SPSS 19.0软件进行统计学分析.结果 回收有效问卷115份.SAS、SDS的平均标准分分别为（39.40±11.55）、（54.05±10.96）分,明显高于中国常模的（29.78±10.46）、（41.88 ±10.57）分,差异有统计学意义（t值分别为5.648、7.529,P值均＜0.01）.所有患者SCL-90各因子中躯体化、焦虑、抑郁和总均分的水平高于中国常模,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.SAS、SDS平均标准分只与躯体化、焦虑、抑郁因子有相关性（r值分别为0.681、0.781、0.531、0.866、0.674、0.557,P值均＜0.05）.115例患者根据SAS、SDS得分结果分为正常组、焦虑抑郁共病组和单独焦虑抑郁组共3组.通过多元Logistic回归分析发现,性别、伴鼻息肉、合并变应性鼻炎（AR）和鼻塞症状与焦虑抑郁共病组有相关性;性别、合并哮喘与单独焦虑抑郁组有相关性.上述三个亚组的SNOT-20总分与其两个子量表得分差异无统计学意义（P值均＞0.05）.结论 CRS患者术前焦虑抑郁情绪明显高于普通人群,部分患者心理调查结果显示处于焦虑或抑郁状态.可能导致患者处于焦虑抑郁共病状态的独立危险因素包括女性、伴鼻息肉、合并AR和鼻塞症状严重;导致患者处于单独焦虑抑郁状态的独立危险因素包括女性及合并哮喘.

可视法脑片膜片钳技术观察大鼠前庭内侧核神经元毒蕈碱样胆碱能受体的电生理特性

目的建立大鼠前庭内侧核脑片可视法膜片钳实验技术,探讨前庭内侧核神经元毒蕈碱样胆碱能受体(muscarinic cholinergic receptor,M 受体)介导电流的生物学特性。方法选用15只Wistar 大鼠用于制备前庭内侧核脑片,应用红外微分干涉相差(infrared differential interferencecontrast,IR-DIC)技术结合电荷耦合式感光成像(charge coupled device-camera,CCD-camera)系统,在可视法膜片钳全细胞记录模式下对20个正常功能状态的前庭内侧核神经元 M 受体的通道电流性质进行观察和分析。结果可视法脑片膜片钳技术可对神经元直接进行准确定位和功能状态的筛选。前庭内侧核神经元给予毒草碱后电流-电压(I-V)曲线斜率增加,毒蕈碱引发效应电流的反转电位为(-88.4±4.9)mV(±s,下同),表明 M 受体去极化效应是由钾电导的减少所介导;M 受体介导电流的电压敏感性测试显示:毒蕈碱引发的效应曲线呈线性关系,反转电位为(-86.7±3.5)mV,提示毒蕈碱所阻断的钾电流为非电压敏感性的漏钾电流。结论可视法脑片膜片钳实验技术克服了盲法脑片膜片钳技术的缺陷,提高了神经元封接的成功率。通过对前庭内侧核神经元 M 受体通道电流性质的分析,进一步揭示毒蕈碱样胆碱能机制的兴奋性调节作用,为临床抗胆碱药物的应用提供新思路。

累及双侧鼻腔及颈部淋巴结的混合型Rosai-Dorfman病1例

Rosai-Dorfman病是一种罕见的病因不明的良性组织细胞增生性疾病。该病临床特征不典型,极易误诊或漏诊。本文报道1例患者,曾因"鼻塞伴颈部淋巴结肿大"于外院诊断淋巴结炎,行手术切除颈部淋巴结,鼻塞给予药物治疗。1年后患者鼻塞加重,于我科行鼻内镜下手术治疗,淋巴结和鼻腔病变均经病理检查确诊为Rosai-Dorfman病。术后给予患者全身糖皮质激素和甲氨蝶呤序贯治疗,并进行2年严密随访,目前症状恢复满意,无复发倾向。

光学相差显微镜下前庭囊斑两型毛细胞的形态学鉴别

目的:探讨电生理实验中,光学相差显微镜下较为可靠的前庭两型毛细胞辨别标准。方法:对于豚鼠椭圆囊和球囊分离所得的前庭毛细胞,分别对细胞胞体的长、宽以及表皮板纤毛的长度进行测量,并对长宽比和纤毛胞长比进行分析。结果:豚鼠椭圆囊和球囊的两型前庭毛细胞相比,细胞的宽度和纤毛的长度比较差异无统计学意义,Ⅰ型毛细胞的长度明显较长,长宽比较大,纤毛胞长比较小。结论:在既往以是否有明显的颈部来区分两型前庭毛细胞的基础上,结合细胞的长宽比和纤毛胞长比进一步进行辨别,有助于更准确地区分两型毛细胞。

大气颗粒物致肺泡巨噬细胞免疫反应研究进展

大气颗粒物(particulate matter,PM)进入机体后可引起肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)发生免疫反应,在多种疾病的产生与发展中起重要作用。AMs通过多种模式识别吞噬PM,并激活下游信号通路,诱导炎症反应发生。AMs作为一种抗原提呈细胞,可诱导T细胞活化,启动适应性免疫应答。PM在不同条件下诱导AMs发生M1/M2极化,使其发挥不同的免疫作用。研究显示,除了PM的粒径大小,其成分(如金属含量、有机化合物)和环境温度等因素也会通过影响AMs的免疫反应而影响PM对机体的危害程度。对于慢性阻塞性肺疾病患者,PM所造成的AMs吞噬功能障碍是导致该疾病急性加重的关键因素。该文对PM引起的AMs免疫反应及有关研究进展进行综述。

北京大气污染物暴露对大鼠嗅觉的影响

目的研究北京大气PM2.5和O3暴露对SD大鼠嗅觉的影响。方法于2018年10月,采用随机数字表法将20只8周龄的SD大鼠分为暴露组和对照组(每组各10只),分别饲养于大气污染物暴露系统和清洁级实验环境中,并检测各系统的PM2.5和O3浓度。采用食物小球埋藏实验(BFT)评价不同饲养时间SD大鼠的嗅觉损伤的程度,并采用重复性方差分析两组大鼠的BFT时间差异。结果暴露组大鼠暴露PM2.5和O3浓度分别为(22.65±11.47)、(12.36±5.87)μg/m^3;对照组均为0μg/m^3。重复测量资料的方差分析结果显示,PM2.5和O3暴露组BFT所用时间长于对照组(F=6.49,P=0.031);随着饲养时间的增加,BFT所用时间有所延长(F=61.69,P<0.001)。结论大气中PM2.5和O3暴露可能导致大鼠嗅觉损伤。

亚慢性PM_(2.5)和O_(3)共同暴露对大鼠鼻黏膜ATP总量及ATP酶活性的影响

目的:探讨细颗粒物(fine particle matter,PM_(2.5))和臭氧(ozone,O_(3))亚慢性共同暴露对大鼠鼻黏膜组织腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)总量及ATP酶活性的影响。方法:采用随机数字表法将20只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠均分为对照组和暴露组,每组各10只,分别饲养于常规清洁级环境和本团队既往所搭建的大气污染物暴露系统中,连续暴露208 d。暴露期间,监测暴露系统内PM_(2.5)和O_(3)浓度,采用自测和站点数据相结合的方法对暴露系统内PM_(2.5)和O_(3)进行综合评估。在暴露第208天处死大鼠取心、肝、脾、肾、睾丸等主要器官和鼻黏膜组织,称量各脏器重量并计算脏器系数。利用所收集鼻黏膜组织,使用生物发光法测定ATP总量,使用分光光度法检测Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性。使用两独立样本t检验比较各指标组间差异。结果:自第3周开始至暴露结束,暴露组大鼠体质量高于对照组(P<0.05),两组间脏器系数差异无统计学意义。暴露组日均PM_(2.5)浓度为(30.68±19.23)μg/m3,O_(3)最大8 h浓度(O_(3)-8 h)为(82.45±35.81)μg/m3。暴露组大鼠鼻黏膜组织ATP化学发光值(792.4±274.1)IU/L低于对照组(1126.8±218.1)IU/L,鼻黏膜组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性(1.53±0.85)U/mg低于对照组(4.31±1.60)U/mg(P<0.05)。对照组和暴露组鼻黏膜组织的蛋白含量分别为(302.14±52.51)mg/L和(234.58±53.49)mg/L,Ca^(2+)-ATP酶活性分别为(0.81±0.27)U/mg和(0.99±0.73)U/mg,组间差异均无统计学意义。结论:亚慢性PM_(2.5)和O_(3)共同暴露可能影响大鼠鼻黏膜组织供氧能力。