七年制学生局部解剖学实验教学改革初探

根据七年制学生的学习特点,探索局部解剖学实验课教学改革方法。通过增加实验课学时数、改变教学模式、采用多样化教学、改革考试方法和内容等方式,使学生在自省与他省能力、科学素养、人文精神、团队协作等多方面、全方位地提高自身的综合素质。

连接蛋白40在成人心肌的表达

目的研究成人心脏不同部位连接蛋白40(Cx40)的表达,探寻其与心律失常发生的内在联系,为临床治疗和药物研发提供形态学基础。方法应用SABC免疫组织化学和图像分析方法,分析和比较成人心脏不同腔室心肌细胞Cx40的表达。全部数据采用SPSS11.5统计软件分析,对心房之间,心室之间,房、室间隔之间以及心房与心室之间连接蛋白的表达进行比较。结果①Cx40在成人心脏4个心腔的壁均有表达,在心房肌阳性颗粒非均质分布于细胞侧面连接处,少量分布于端闰盘处,在心室肌阳性颗粒典型地排列在闰盘处。②Cx40在各心壁的表达存在差异,其中心房多于心室,右房多于左房,左、右心室间无明显差别。③房、室间隔,乳头肌等处亦有Cx40的表达,多见于细胞侧面连接和端闰盘处。房、室间隔处的表达无明显差别。结论成人心脏连接蛋白40的表达主要分布于侧面连接和闺盘处。心房表达多于心室,这种差异可能是引发心律失常的原因之一,也可能与心房和心室之间功能差异有关。

成人前臂后区浅层动脉供应的应用解剖学研究

前臂背侧皮瓣町以分为两种：一种是骨间背侧动脉岛状皮瓣，分别由路来金等、Penteado等于1986年最早描述；另一种是骨间掌侧动脉背侧穿支皮瓣，由Martin等于1989年首先介绍。其中，以骨间后动脉为蒂的前臂背侧逆行岛状皮瓣及复合组织瓣移位术，以其皮瓣质地好、供皮面积大、距离手的受区近、手术操作简单、成活率高、不损伤前臂主要血管等优点，在临床上获得了广泛应用，已成为手部软组织修复和功能重建的主要方法之一。

提高解剖学课堂教学效果探讨

人体解剖学是研究正常人体形态结构的科学,是医学生接触最早、最基础,也是最重要的医学课程之一,其实践性和专业性都很强,是培养实用性人才的必不可少的专业课。因此,提高人体解剖学的教学质量有利于高质量医学专业人才的培养。就如何提高解剖学的课堂教学效果谈了一些实践体会,望能抛砖引玉,以利提高人体解剖学的教学质量。

成年小鼠室管膜下区神经干细胞分离及培养方法改良

目的:改良成鼠神经干细胞(NSCs)分离培养方法,优化培养条件,为系统研究成体干细胞增殖与分化特性以及利用成体干细胞进行细胞治疗奠定基础。方法:视交叉前1.5 mm处离段脑组织,分离前脑室管膜下区(SVZ),通过机械性消化与化学性消化相结合的操作方法制备细胞悬液,应用改良无血清培养基悬浮培养NSCs。nestin免疫荧光染色鉴定NSCs,1%胎牛血清诱导分化后免疫荧光染色鉴定NSCs多向分化潜能。系列稀释实验和5-溴脱氧尿核苷(BrdU)掺入实验比较改良培养与常规培养NSCs自我更新能力和增殖潜能。结果:改良培养条件,NSCs 7～9 d可形成nestin阳性神经球。应用1%FBS诱导后,NSCs分化为形态各异的细胞,包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,分化比例分别是(18.6±3.5)%、(73.2±5.2)%和(3.6±0.4)%。系列稀释实验结果显示当细胞接种数量为500、1000和2000个,改良培养NSCs形成次代神经球数量较常规培养对照组明显增多(P<0.05),并且8 h BrdU掺入率也显著增高达(42.4±6.2)%(P<0.05),表明改良培养条件下NSCs自我更新能力和增殖活力良好。结论:本研究建立了一种简便、操作性强、重复性高的成鼠NSCs分离培养方法。

正常成人窦房结形态学及Cx43、Cx40的表达

目的观察正常成人心脏窦房结的细胞构筑及连接蛋白43、40(connexin43、40,Cx43、Cx40)的表达和分布情况。方法常规石蜡包埋,HE、Masson染色,选定目标部位行Cx43、Cx40免疫组织化学染色,并进行图像及统计分析。结果①正常成人窦房结细胞组成、形态、排布区别于普通工作心肌。②由房肌、窦房结外周到动脉周围结组织,Cx43、Cx40表达逐渐减弱,胞质染色逐渐浅淡;而Cx40的分布范围在动脉周围窦房结组织中多于外周结组织。结论正常成人窦房结的细胞组成、排布及Cx43、Cx40的表达与其电生理起搏、传导特性相符。

银杏提取物对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响

目的:探讨银杏提取物(GBE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠炎症脱髓鞘病变的影响。方法:应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(MOG33-55)配以完全弗氏佐剂(CFA)免疫小鼠,诱发EAE模型。将小鼠分为CFA对照组、EAE模型组和GBE治疗组(每日腹腔注射GBE70mg/kg)。通过神经功能评分、行为学实验以及免疫荧光染色,观察GBE对EAE小鼠的影响。结果:GBE组小鼠各时间段神经功能评分均低于EAE组(P<0.05),行为学检测显示发病高峰期falling latency时间较EAE组延长10s;GBE组较EAE组视神经髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平增高,可见MBP阳性髓鞘结构包绕轴突;海马伞矢状切片免疫荧光染色证实GBE组CD11b阳性小胶质细胞较EAE组明显减少,但是GFAP阳性星形胶质细胞数量与EAE组无明显差别。结论:GBE可能通过抑制小胶质细胞激活从而延缓EAE小鼠脱髓鞘进程,提示GBE对多发性硬化具有一定的治疗作用。

单侧标本开放操作在局部解剖学实习教学改革中的作用探讨

选取人体结构中双侧基本对称的局部,尸体标本单侧开放操作,进行局部解剖学实习教学改革。结果表明引入单侧标本开放操作,能够提高学生的学习兴趣,在一定程度上提高了学习效果。今后需继续扩大研究对象群体,进行进一步探讨和研究。

成人房室交界区过渡细胞束形态学及连接蛋白43和40的表达

目的观察临床上心律失常常见发生部位及射频消融治疗靶点部位———房室交界区和邻近区域的形态学特点及连接蛋白(Cx)43和40的表达,为心律失常发生机制及可能的有效治疗部位提供形态学依据。方法 10例正常成人心脏,选取房室交界区及其邻近部位,常规石蜡包埋,HE、Masson染色,选定目标部位行Cx43、Cx40免疫组织化学染色,并进行图像及统计学分析。结果峡部、冠状窦口周围和远端、二尖瓣纤维环处及与右房瓣上肌环邻近的中心纤维体等处可见较多过渡细胞束走行,并从不同方向与房室结及结后延伸不同部位相连。过渡细胞组成、排布、心肌纤维走行和相互间的联系有别于普通工作心肌。Cx43、Cx40在过渡细胞束1～4及右房瓣上肌环中分布范围小但集中,而在左房近膜部处的过渡细胞中表达较多;峡部Cx43、Cx40表达较集中。结论房室交界区及其邻近区域存在双(多)径传导的形态学基础,且与目前常用的射频消融治疗心律失常靶点部位具有对应关系。

成人本科继续教育中人体解剖学实习教学探讨

成人本科继续教育是医学教育中一支特殊的学生队伍,而人体解剖学作为一门重要的、专业性较强的基础课程,学习效果直接影响其后续课程的开展乃至日常临床工作的进展。结合成人本科教育的特点对人体解剖学实习教学对策作一探讨。

低氧预处理增强老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对H9C2细胞氧化应激损伤的保护作用

背景:老年缺血性心脏损伤患者自体干细胞移植治疗效果欠佳,需要探索提高老年干细胞修复再生能力的有效途径。目的:探讨低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对心肌的保护作用,为改善老年患者自体干细胞移植疗效提供实验支持。方法:将青年人骨髓间充质干细胞置于常氧培养箱培养,老年人骨髓间充质干细胞分别置于常氧和低氧培养箱培养,收集条件培养基分为青年常氧培养基组、老年常氧培养基组和老年低氧培养基组。H9C2细胞用3种条件培养基在常氧培养箱中培养24 h后,加入300μmol/L过氧化氢继续培养30 min诱导氧化应激,采用CCK-8法检测细胞活性,活性氧试剂盒检测活性氧水平反映氧化应激损伤程度,Western blot检测Bax、Bcl-2表达量反映细胞凋亡水平,Western blot检测p-AKT表达量反映AKT活化水平。另外,老年低氧培养基处理及过氧化氢诱导细胞氧化应激前,用含50μmol/L LY294002的DMEM培养液培养2 h,以阻断PI3K/AKT通路的激活,然后采用CCK-8法检测细胞活性。结果与结论:①与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞活力显著增加(P<0.01);凋亡相关蛋白Bax表达显著降低(P<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达显著增高(P<0.05);活性氧水平显著降低(P<0.05);②与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞中p-AKT蛋白表达显著增高(P<0.05);③与老年低氧培养基组比较,应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,H9C2细胞活力下降(P<0.05);④结果提示,低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基通过AKT通路减弱H9C2细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,提高细胞活性。

力竭游泳运动后大鼠伏核内NF-κB、cAMP的表达

目的:观察力竭游泳运动后大鼠伏核(NAc)内核转录因子-κB(NF-κB)和环腺苷酸(cAMP)的表达。方法:成年雄性SD大鼠随机分为对照组和力竭组。建立一周力竭游泳运动模型后,按0、4、8、12、16、20、24 h七个时间点,采用免疫印迹和免疫组织化学技术观察NF-κB在伏核内的表达变化,应用酶联免疫吸附技术检测伏核内cAMP的含量变化,并与对照组进行比较。结果:对照组伏核内NF-κB的表达较少,cAMP含量较低,力竭组NF-κB的表达明显增多,cAMP含量也明显增加,两者均于8 h达到较高水平,随后维持在较高水平,于16 h后开始回落,24 h已明显下降。结论:力竭游泳训练1周可以使大鼠伏核内NF-κB与cAMP得到有效的活化,且两者的表达变化具有明显相同时效性,提示它们可能具有协同效应。

不同形式游泳运动后大鼠孤束核内c-fos的表达

目的:建立不同形式大鼠游泳运动模型,探讨运动后大鼠孤束核内c-fos的表达及其时效性分布规律。方法:将55只正常雄性SD大鼠随机分为对照组(5只)、持续游泳运动组(25只)和间歇游泳运动组(25只)。持续游泳运动组和间歇游泳运动组通过6周游泳训练建立运动模型,在运动结束后0、0.5、1、2、4 h等不同时间点取材,冰冻切片,SABC法行免疫组织化学染色,计数孤束核内c-fos阳性神经元的数目,并进行统计学分析。结果:持续游泳运动组大鼠c-fos阳性神经元数在运动结束后逐渐增加,至0.5 h达高峰,之后回落,2 h时达运动后的低点,而后重新升高。间歇游泳运动组大鼠运动后孤束核内c-fos阳性神经元数显著增高至峰值,之后下降,至0.5 h后重新缓慢升高至接近于峰值水平,并维持于这一较高的表达水平。结论:孤束核在大鼠不同游泳运动后机体的调节作用中起重要作用。

不同形式游泳运动后大鼠孤束核内c—fos的表达

目的：建立不同形式大鼠游泳运动模型，探讨运动后大鼠孤束核内c—fos的表达及其时效性分布规律，方法：将55只正常雄性SD大鼠随机分为对照组（5只）、持续游泳运动组（25只）和问歇游泳运动组（25只）。持续游泳运动组和间歇游泳运动组通过6周游泳训练建立运动模型，在运动结束后0、0．5、1、2、4h等不同时间点取材，冰冻切片，SABC法行免疫组织化学染色，计数孤束核内c—fos阳性神经元的数目，并进行统计学分析。结果：持续游泳运动组大鼠c—Fos阳性神经元数在运动结袁后逐渐增加，至0．5h达高峰，之后回落，2h时达运动后的低点，而后重新升高。间歇游泳运动组，运动后c—fos阳性神经元数显著增高至峰值，之后下降，至0．5h后重新缓慢升高至接近于峰值水平，并维持于这一较高的表达水平。结论：孤来核在大鼠不同游泳运动后机体的调节作用中起重要作用。

急性弓形虫感染对BALB/c孕鼠胚胎发育的影响

目的观察BALB/c孕鼠胚胎器官发生期急性弓形虫感染对胚胎发育的影响。方法采用整体致畸试验,将受精鼠随机分为阴性对照A组、B1-B4染虫组和环磷酰胺阳性对照C组。孕8 d时A组腹腔注射无菌PBS,B1-B4组分别注射弓形虫速殖子25、50、100、200个/只,C组小鼠注射环磷酰胺20 mg/kg体重。孕18 d处死孕鼠,观察胚胎生长发育状况。结果与A组相比,B2组胎盘、胎鼠重量减轻（P〈0.05）;B3、B4组孕鼠体重、胎盘、胎鼠重量减轻（P〈0.05）,着床数下降（P〈0.05）,活胎率、吸收胎率、死胎率、流产率升高（P〈0.05）,B4组胎鼠畸形率增高（P〈0.01）。结论 BALB/c小鼠妊娠期急性弓形虫感染可致胎盘功能障碍,胎鼠生长发育缓慢,并出现胎鼠畸形、死胎和流产等病理性妊娠。

基于k-means聚类方法的分类肺康复对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的干预效果

目的探讨基于k-means聚类方法的分类肺康复对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的干预效果。方法选取2018年1—6月在大同市第五人民医院呼吸科就诊的242例COPD稳定期患者,收集其一般资料〔包括年龄、病程、基础疾病种类、体质指数(BMI)、急性加重次数〕、肺功能指标〔包括第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV_1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV_1%pred)〕、6分钟步行距离(6MWD)、呼吸困难情况〔包括改良英国医学研究学会呼吸困难指数(mMRC)评分、呼吸困难次数〕、营养受损评分、慢性阻塞性肺疾病评估测试量表(CAT)评分、焦虑自评量表(SAS)评分及日常生活能力量表(ADL)评分。采用k-means聚类方法确定本组COPD稳定期患者最佳分类为3类,之后在第1类COPD稳定期患者中随机选取30例作为A1组、30例作为B1组,在第2类COPD稳定期患者中随机选取30例作为A2组、30例作为B2组,在第3类COPD稳定期患者中随机选取30例作为A3组、30例作为B3组。A1组、A2组及A3组患者给予常规康复方案,B1组、B2组及B3组患者给予基于k-means聚类方法的分类肺康复;六组患者均连续干预6个月。比较A1组与B1组患者干预前后肺功能指标和6MWD,A2组与B2组患者干预前后急性加重次数、肺功能指标、6MWD及mMRC评分,A3组与B3组患者干预前后肺功能指标、6MWD、mMRC评分、营养受损评分、CAT评分及SAS评分。结果 (1)A1组与B1组患者干预前FEV_1/FVC、FEV_1%pred、6MWD及干预后FEV_1/FVC、FEV_1%pred比较,差异无统计学意义(P>0.05);B1组患者干预后6MWD长于A1组(P<0.05)。(2)A2组与B2组患者干预前急性加重次数、FEV1/FVC、FEV1%pred、6MWD、mMRC评分及干预后FEV_1/FVC、FEV_1%pred、6MWD比较,差异无统计学意义(P>0.05);B2组患者干预后急性加重次数少于A2组,mMRC评分低于A2组(P<0.05)。(3)A3组与B3组患者干预前FEV_1/FVC、FEV_1%pred、6MWD、m MRC评分、营养受损评分、CAT评分、SAS评分及干预后FEV_1/FVC、FEV_1%pred、6MWD比较,差异无统计学意义(P>0.05);B3组患者干预后mMRC评分、营养受损评分、CAT评分、SAS评分均低于A3组(P<0.05)。结论基于k-means聚类方法的分类肺康复能针对性地提高第1类COPD稳定期患者运动耐力,减少第2类COPD稳定期患者急性加重次数及减轻其呼吸困难程度,减轻第3类COPD稳定期患者呼吸困难程度及焦虑情绪、改善其营养状况及生存质量。