标本血量不足对凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间检测结果的影响

目的：分析标本血量不足对患者凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）检测结果的影响。方法选择58例血量不足标本，要求血细胞比容在20％～55％，离心后无溶血、脂血及黄疸。按血量与抗凝剂比例分为8∶1组与7∶1组两组，再分别抽取两组患者合格血量（2．7 mL ）标本作为各自对照组，检测4个组血样的PT、APTT。结果 PT在血量与抗凝剂比例为8∶1组和8∶1对照组相比差异无统计学意义（P＞0．05），在血量与抗凝剂比例为7∶1组与7∶1对照组相比差异有统计学意义（P＜0．05）；APTT在血量与抗凝剂比例为8∶1、7∶1组与相应的对照组相比差异有统计学意义（P＜0．05）。结论凝血项目的检测中，PT、APTT 的结果受血液和抗凝剂比例的影响。

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中银杏内酯B的含量

建立测定人血浆中银杏内酯B的含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆50μL,加入2.5mol/L盐酸溶液10μL酸化,再加入内标2μg/mL银杏内酯C20μL,以1mL乙醚萃取后,取提取液500μL挥干溶剂,然后用30%的乙腈500μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:色谱柱为ZorbaxC18柱(4.5*150mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;流速:0.6mL/min,柱温:35℃。质谱条件:ESI电离源;负离子模式;用于定量分析的离子对分别为m/z423.1→m/z367.2(银杏内酯B)和m/z439.1→383.2(内标:银杏内酯C)。该方法血浆中银杏内酯B的最低定量限为5ng,线性范围为5ng/mL^0.5μg/mL。本方法操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。

肿瘤患者化疗期血浆D-二聚体水平的分布

目的了解化疗期间血浆D-二聚体的浓度随化疗变化的趋势和特点,为排除肿瘤并发的静脉血栓提供依据。方法将101例化疗患者分为胃癌、肠癌、肺癌三组,以自动化乳胶比浊法定量检测患者血浆D-二聚体的浓度,并以广义线性模型进行重复测量资料的方差分析,判断肿瘤类型和化疗时间对D-二聚体浓度的影响。结果胃癌与肠癌、肺癌之间差异有统计学意义(P<0.05),后两者之间差异无统计学意义,单一病种化疗的不同时期D-二聚体浓度差异无统计学意义(F=1.358,P>0.05),肿瘤类型与化疗时间对D-二聚体变化无联合作用(F=0.565,P>0.05)。结论肿瘤患者D-二聚体的变化不受化疗因素影响;不同肿瘤类型之间D-二聚体的差异提示可建立各组临界值,作为预后参照。

液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中紫杉醇的含量

建立测定人血浆中紫杉醇含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆300μL,加入50ng/mL多西他赛溶液100μL,再加入1.2mL无水乙醚涡旋震荡提取2min后,离心(12000转,15min),取上清液吹干,然后用80%乙腈300μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:采用ASB C_(18)柱(2.1×50mm,5μm),流动相:乙腈-4mmol/L醋酸铵(80:20,V/V),流速为0.3mL/min。质谱条件:ESI电离源,正离子模式,多反应监测(MRM)方式,用于定量分析的离子对分别为m/z 876.5→m/z 308.1(紫杉醇)和m/z 830.6→m/z 549.2(内标,多西他赛)。该方法紫杉醇的线性范围为0.2～1000ng/mL,最低检测限为0.2ng/mL。本方法操作简便、快速、结果准确、可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。

哮喘大鼠凝血指标变化的研究

目的探讨过敏性哮喘大鼠凝血指标的改变。方法将28只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组和哮喘组。哮喘组采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)+氢氧化铝凝胶致敏3次后OVA激发1次建模,正常对照组以0.9%氯化钠溶液(normal saline,NS)为替代品致敏和激发。建模后通过观察大鼠行为学改变,检测支气管肺泡灌洗液(bron-choalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞构成,肺组织病理学,肺组织匀浆中细胞因子水平评价造模效果,通过检测血浆凝血四项,血浆及灌洗液中凝血因子活性对哮喘大鼠凝血平衡紊乱进行探讨。结果①哮喘组大鼠激发后可见喘息、口唇紫绀等典型的哮喘症状。②哮喘组大鼠肺组织HE染色见血管及气道周围有大量炎症细胞浸润,以嗜酸细胞浸润增多最为特异,同时伴随有气道狭窄。③与正常对照组相比,哮喘组大鼠BALF中炎性细胞总数(3.40±0.53×105/ml vs 10.69±0.84×105/ml)及嗜酸细胞(2.15±0.33%vs 27.79±2.58%)明显增多,肺组织匀浆中IFN-γ水平明显下降,TNF-α水平明显上升。④与正常组相比,哮喘组大鼠血浆aPTT显著缩短,PT显著延长,Fbg增高;血浆中FⅡ、FⅤ、FⅧ活性显著降低,FⅫ活性显著升高;BALF中FⅡ、FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅫ活性显著升高,FⅪ活性显著降低。结论哮喘大鼠存在凝血平衡紊乱。

液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中乐福昔布的含量

建立测定人血浆中乐福昔布含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆250μL,然后加入200ng/mL内标塞来昔布50μL,加入1mL无水乙醚涡旋震荡提取2min,离心10分钟(12000转/分)后,取上清液,下层再加入乙醚,同法再萃取一次,合并2次萃取液,吹干溶剂后,用30%的乙腈250μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:采用ASB C18柱(2.1×50mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,流速:0.4mL/min。质谱条件:ESI电离源,正离子模式,多反应监测(MRM)方式,用于定量分析的离子对分别为m/z 395.1→m/z 296.1(乐福昔布)和m/z 382.2→m/z 281.0(内标,塞来昔布)。该方法乐福昔布的线性范围为0.4～800 ng/mL,最低检测限为0.2ng/mL。本方法操作简便、快速、结果准确、可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。