夏咸柱(中国工程院院士、解放军军事医学科学院军事兽医研究所研究员):加强禽流感防控,严防人间流感大流行

夏成柱院士在题为《加强禽流感防控，严防人间流感大流行》的报告中，首先介绍了流感病毒分型与变异情况，并就动物流感与流感大流行情况作了历史性的回顾。他说，就当前来看，动物流感流行的国家和地区在不断扩大，2014年．印尼有12个省累计暴发260多起H5N1疫情：越南有32个省累计暴发80多起H5N1疫情。此外，朝鲜、柬埔寨、印度等国家在去年都暴发了多起H5N1疫情．其中朝鲜平壤市和黄海北道暴发的疫情造成17万只鸡发病，4万多只鸡死亡：印度发生的4起疫情，造成1．8万只家禽发病，约23万只家禽被销毁。

裂谷热病毒截断的Gn蛋白在E.coli中的表达与多克隆抗体的制备

目的为避免作为中和试验病原的裂谷热病毒(RVFV)存在生物安全隐患,探索建立RVFV假病毒中和试验方法.方法利用pET-30a原核表达载体,构建重组质粒含有截短的Gn蛋白片段,转化BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达目的蛋白通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),表达蛋白的正确与否通过SDS-PAGE和Western Blotting检测,纯化表达蛋白通过带his标签的镍柱.将RVFV Gn蛋白纯化后免疫小鼠,抗体效价通过ELISA检测,多克隆抗体对G蛋白的特异性通过Western Blotting检测.结果成功获得表达目的蛋白,RVFV Gn蛋白纯化后诱导小鼠产生的Gn多克隆抗体水平较高,并且多克隆抗体对G蛋白的特异性较强.结论利用PET30a载体构建了可表达RVFV截短的Gn蛋白的大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3),并且制备的多抗对全长G蛋白的特异性较好,将蛋白纯化免疫Balb/c小鼠,经ELISA检测制备的多克隆抗体,抗体滴度较高.

宁夏野生岩羊PPRV全基因组测定与系统进化分析

为探究宁夏野生岩羊(Pseudois nayaur)小反刍兽疫病毒(Peste des petits rumi-nants virus,PPRV)的分子遗传特征,根据Gen Bank公布的PPRV基因组序列设计并合成13对全基因组扩增引物,通过RT-PCR和DNA测序及拼接获取毒株(wild-bharal/China-NXYH/2021株)全基因组序列,借助DNASTAR和MEGA 7.0软件进行序列分析。结果显示:该毒株属于基因Ⅳ系,基因组全长为15954 nt;在系统进化上,与2013年以来中国流行株和2016—2017年蒙古流行株亲缘关系较近,共同组成一个小的进化分支;在全基因组一致性分析中,与国内新疆流行株goat/China-XJYL/2013一致性最高(99.4%),与国内其他野生动物PPRV株wild-bharal/China-Tibet/2008、Ibex/China-XJBZ/2015和Procapra-przewalskii/China-GS/2018的一致性分别为96.8%、98.8%和99.0%。在H和F蛋白氨基酸多态性分析中,发现该毒株H和F蛋白中均出现了独特的氨基酸突变,分别为H蛋白的R285Q、S421R和F蛋白的R/K/T3W、Q305R。结果表明,小反刍兽疫病毒已传入宁夏野生动物种群,为我国小反刍兽疫根除工作带来新的困难和挑战,需加强对宁夏野生动物PPRV感染情况的追踪和监测,以便及时从传染源和传播途径方面阻断PPRV的传播。

通过病毒分离鉴定和基因检测首次发现虎流感

应用 F8 1 猫肾传代细胞 ,从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病料中分离获得 1株病毒 ,经形态学、理化学、生物学和血清学系统鉴定 ,证明为流感病毒。采用流感病毒核蛋白基因引物 ,对分离病毒及该虎病料进行 RT- PCR扩增和序列分析 ,结果从分离病毒和虎病料中均扩增出与理论值大小相符的 4 6 4 bp基因片段 ;其序列与 A、B、C 3型流感病毒相比较 ,同源性分别为 84 .9%、35 .0 %、2 4 .8%。由此说明 ,所分离病毒为 A型流感病毒 ,命名为 A/虎 /哈尔滨 (中国 ) / 0 1/ 2 0 0 2。用此分离病毒静脉接种于 3月龄家猫 3只 ,均出现与病虎相似的临床症状 ,其中 1只耐过 ,2只死亡。死亡猫剖检变化与死虎相似 ,主要呈现肺炎病变 ,并可从病料中回收到所接种病毒。以此分离病毒为 HA抗原 ,进行虎与猫血清的 HI抗体检测 ,结果康复虎血清比其病初血清、康复猫血清比其接种前血清 HI抗体均增高 4倍以上 ,表明该病毒具有致病性 ,是引起该虎与试验猫发病甚至死亡的病原。

宠物源人兽共患病防控战略研究

近年来,宠物越来越受到人们的关注,同时带来的人兽共患病问题也接踵而至。本文分析了宠物源人兽共患病的病原情况和防控现状,阐明了我国宠物源人兽共患病防控仍然面临巨大挑战,提出了加速提高宠物医疗技术水平、加快宠物药品的研制与注册等建议,对于防控宠物源人兽共患病有一定的借鉴意义。

犬瘟热疫苗弱毒的复壮与免疫试验

将一株犬瘟热疫苗株病毒通过Ｖｅｒｏ细胞２０代（ＣＤＶ／Ｒ－２０）后又通过敏感犬的腹腔巨噬细胞，获得一株免疫原性更高的弱毒株（ＣＤＶ／Ｒ－２０／８）。接种同样剂量１０４ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８和ＣＤＶ／Ｒ－２０的犬，产生出血清中和（ＳＮ）抗体价的几何平均数分别为１：５４和１：２６。前者为后者的２倍多。接种１０５ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８能完全保护犬（１０／１０）抵抗ＣＤＶ强毒的攻击，接种１０４ＴＣＩＤ５０的保护９／１０犬，而对照犬５只全部发病，其中４只死亡。犬体内ＳＮ价可持续一年之久。冻干培养物在４和－３０℃中可分别保存９个月和１２个月而效力不减。

犬瘟热病毒高压灭活疫苗的制备与应用

本试验用静水压高压灭活的方法对 CDV进行灭活 ,并加入蜂胶佐剂制备犬瘟热病毒高压灭活疫苗。将此灭活疫苗免疫接种 CDV易感犬 ,同时以用福尔马林灭活的犬瘟热病毒灭活疫苗为对照 ,检测结果表明 :犬瘟热病毒高压灭活疫苗安全、可靠 ,其诱导试验犬所产生中和抗体的能力明显高于该病毒的福尔马林灭活苗 ,临床应用证明该疫苗对犬的保护率达 89%。

犬冠状病毒超免疫血清的制备及应用

采用犬冠状病毒 (CCV)弱毒株和强毒株多次免疫健康犬 ,采集超免疫血清 ,其CCV血清中和 (SN)抗体效价高达 1∶2 10。试验结果表明 ,该超免疫血清安全、特异、无毒副作用 ,每只幼犬注射 1.5mL/kg体重的该血清即可使 90 %以上的犬获得 10 15d的被动免疫保护 ;对 110只患CCV性肠炎病犬的临床治疗结果表明 ,该超免疫血清治疗效果可靠 ,其治愈率达 94%。

宠物与人类健康

本文围绕宠物与人类健康主题,阐述了宠物对人类健康的积极作用;宠物对人类健康的负面影响,并对保障我国宠物业健康发展提出建议。

野生动物疫病与公共卫生

我国面临的人畜共患病形势严峻,目前在我国范围内,传统的人畜共患病呈上升趋势,世界上的新发人畜共患病在我国已有发生,部分还未传入我国的新发人畜共患病也已经在我国周边国家流行。人畜共患病对人类的威胁正在加大,要控制人畜共患病在人间的流行和传播,主要还要从控制人畜共患病在动物间流行传播入手。政府应建立人畜共患病防控机构,建立跨专业领域的疫情通报机制,实现跨学科跨部门与地区间、国际间的整体合作,加强动物疫病的检测、监控,加强技术储备以应对日益严峻的形势。2006年5月18～21日,由中国科协、卫生部联合主办,世界卫生组织协办,中华预防医学会、中国畜牧兽医学会和中国微生物学会共同承办的“全国人畜共患病学术研讨会”在北京胜利召开,本次会议是迄今我国第一次卫生部门与农业部门共同参与探讨防控人畜共患病的研讨会,充分体现了多学科交叉、多专业领域人员参与,是我国人畜共患病领域的一个具有里程碑意义的学术会议。本刊将陆续刊登研讨会部分精选论文,以飨读者。

宠物与宠物保健品

介绍了宠物的定义与分类,宠物与人类健康的新理念,宠物福利与保健等与宠物相关的常识。重点阐述了宠物保健品特别是宠物生物制品的研发现状,并对宠物保健品的监管提出了几点建议。

关口前移,从源头防控人兽共患病

一．人鲁共患病形势严峻 人兽共患病定义。在1959年，世界卫生组织（WHO）和粮农组织（FAO）专家委员会对人兽共患病下的定义是“在脊椎动物与人之间自然传播的疾病或感染”。

实验动物与人兽共患病

一、人兽共患病已引起广泛关注 目前有1415种人类疾病的病原体，细菌和立克次体538种，真菌307种，蠕虫287种，病毒和朊蛋白217种，原生动物66种，其中61％属于人兽共患病，有60％人类疫病源于动物。并且在175种被认为是“新发”疾病中，有132种是人兽共患病。

加强疫病防控 保障牛羊产品安全

一，几种主要牛羊疫病 （一）结核病防控情况 1．人结核疲情严重。感染率达30％～40％，80％的结核病人在发展中国家，在全球22个高负担国家中，中国第二，印度第一。全球约有5000万头以上的牛感染了牛结核病，每年造成大约30亿美元的经济损失。

2020年前中国很难根除狂犬病

中国狂犬病死亡人数居世界第二位世卫组织曾倡议到2020年消除人间狂犬病,中国狂犬病死亡人数居世界第二位。面对中国严峻的防控形势,到2020年前消除狂犬病,中国的任务很艰巨。荷兰、法国、

我国犬瘟热病毒的生态学调查研究

本研究应用电子显微镜技术检查了１７种毛皮动物和野生动物的６７６份材料，从犬、貂、貉、狐、熊、小熊猫、大熊猫、狼、狮、虎、猞猁、金猫等１２种动物病料中，检出含有ＣＤＶ材料４８７份。应用间接ＥＬＩＳＡ、免疫荧光和中和试验等技术检测了８种动物１５８份血清，其中从犬、狐、小熊猫、虎、金猫，狼等６种动物的１０６份血清中检出了抗ＣＤＶ抗体。应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因探针检查了４种动物的３７份材料，其中有２９份阳性。本研究证实的大熊猫、虎、狮、小熊猫、金猫、猞猁、熊、狼等动物对犬瘟热病毒的感染，丰富了犬瘟热病毒生态学的内容。

犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应诊断方法的建立和初步应用

根据Ｂａｒｅｔ报道的犬瘟热病毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增３２４ｂｐ基因片段的引物。将异硫氰酸胍－酚－仿一步法提取得到的细胞总ＲＮＡ进行反转录，以此产物为模板进行ＰＣＲ扩增，并对ＰＣＲ扩增条件进行了优化。经鉴定，以此对引物进行的ＰＣＲ扩增，得到了与设计片段大小和酶切位点相同的产物，且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的三种病原的核酸，这表明此方法为特异性的。对２７条（只）临床病例和３２份细胞培养物进行检查，并与电子显微镜负染检查结果进行了比较。初步应用研究的结果表明，此方法可用于犬瘟热病毒的临床诊断和实验研究。