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猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用
1
作者
孙悦
王尚辉
+6 位作者
涂亚斌
杨勇博
王洪峰
夏大松
蔡雪辉
安同庆
孙明霞
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2023年第4期1-6,共6页
为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRS...
为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
凝胶层析技术
纯化
形态学
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职称材料
猪繁殖与呼吸综合征病毒RFLP 1-4-4 L1C株的分离鉴定及其遗传演化分析
被引量:
3
2
作者
田笑笑
黄昕怡
+4 位作者
夏大松
王海伟
田志军
蔡雪辉
安同庆
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期583-590,597,共9页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RFLP 1-4-4 lineage1C(L1C)变异株自2020年在美国出现以来,给养猪业造成了严重的经济损失。我国目前尚无RFLP 1-4-4 L1C变异株的报道。为了解我国PRRSV RFLP 1-4-4株的流行情况,本研究对我国15个省219份疑...
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RFLP 1-4-4 lineage1C(L1C)变异株自2020年在美国出现以来,给养猪业造成了严重的经济损失。我国目前尚无RFLP 1-4-4 L1C变异株的报道。为了解我国PRRSV RFLP 1-4-4株的流行情况,本研究对我国15个省219份疑似PRRSV感染的临床样品进行了PRRSV ORF5基因的RT-PCR检测与测序。结果显示,41份(18.72%)为PRRSV阳性样品,其中有1份来自黑龙江省样品中的PRRSV ORF5基因为1-4-4模式。将该样品经PAM分离病毒并经PCR和间接免疫荧光试验鉴定,结果显示分离到一株RFLP模式为1-4-4的PRRSV,命名为HLJ-80。采用PCR对分离病毒的全基因组分段扩增并测序拼接后显示其基因组全长15013 nt,利用MegAlign软件分析分离病毒与PRRSV 6株代表株的全基因组序列、ORF基因序列的同源性及其NSP2的氨基酸序列;利用MEGA6.0软件分析分离株ORF5基因序列并绘制其系统发生树(ML法);采用RDP4分析分离株全基因组序列的重组事件。全基因组序列的同源性分析结果显示,HLJ-80株与NADC30株的同源性最高,为93.3%,与其他代表株的同源性均低于90%。除ORF2基因外,其余基因序列均与NADC30株同源性最高(90.6%~99.3%)。ORF5基因的遗传进化树显示,HLJ-80株属于RFLP 1-4-4 L1C株。NSP2氨基酸序列分析结果显示,与VR-2332株相比,HLJ-80株NSP2存在131个氨基酸(111+1+19)的不连续缺失,缺失位置与NADC30株一致。上述结果表明,HLJ-80株与NADC30株的亲缘关系较近。重组分析结果显示,HLJ-80株有可能与PRRSV 2014-81株、SD53-1603株高度同源的病毒株重组而来。将本研究中的41株分离株ORF5基因序列,及GenBank中1996年~2021年我国3125条共计3166条北美洲型PRRSV ORF5基因序列,按照PRRSV RFLP 1-4-4模式和L1C分支谱系分类,并分析我国RFLP 1-4-4 L1C株在时间和地理上的分布;将2016年~2021年GenBank中7个国家全部北美洲型PRRSV ORF5基因序列(共计1918条),按照PRRSV RFLP分类,分析2016年以来我国与不同国家之间PRRSV RFLP的模式特点。结果显示,我国PRRSV RFLP 1-4-4自2003年首次出现,至今已累计达260株(8.2%),其中217株属于L1C分支(83.46%),其余为L8和L1A分支。PRRSV的RFLP分类结果显示,1918条PRRSV ORF5基因共有36种RFLP模式。其中RFLP 1-7-4模式的数量最多占25.96%,RFLP 1-4-4分布最广泛,除越南和印度外,该模式在其余5个国家均有分布,其在我国的数量最多。本研究为了解我国PRRSV RFLP 1-4-4株的流行情况提供了重要参考数据。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
限制性酶切片段长度多态性
分支谱系
RFLP
1-4-4
L1C
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职称材料
scanf()函数的缺陷及解决措施
被引量:
1
3
作者
夏大松
《电脑编程技巧与维护》
1994年第5期52-52,共1页
用C语言编制程序,当需要按照某种格式从标准输入中读取数据时,常调用标准库函数scanf()。将表示数字量的字符转换成数字量。但在实际使用过程中。当程序编制欠妥当或输入不严格时,就会出现错误。请看下面二例:
关键词
库函数
取数据
字符型
程序编制
字符转换
字量
SCANF
请看
换行
执行结果
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职称材料
2.13H安装故障的排除
4
作者
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第12期45-45,共1页
关键词
故障现象
2.13H
汉字点阵信息
汉字操作系统
打印功能
汉字显示
硬盘
系统装入
打印字体
引导文件
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职称材料
FoxBase+通用组合查询技巧的实现
5
作者
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第5期21-21,共1页
关键词
数据库
管理系统
FOXBASE+
组合查询
下载PDF
职称材料
中文Windows 3.1下挂接拼音词汇输入法
6
作者
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第9期30-30,共1页
关键词
拼音词汇输入法
汉字输入法
WINDOWS
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职称材料
线性组合预测在税收管理中的应用
被引量:
4
7
作者
邓成樑
夏大松
《运筹与管理》
CSCD
1994年第3期74-77,共4页
本义论述了组合预测理论中,对组合预测值采用“各个个体预测值的加权算术平均值”的不合理性,提出了用多重线性组合预测模型进行预测的方法,并将它运用于对××市税收的实际预测中去,预测精度高,效果好。
关键词
线性组合预测
税收管理
税收预测
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用
1
作者
孙悦
王尚辉
涂亚斌
杨勇博
王洪峰
夏大松
蔡雪辉
安同庆
孙明霞
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室
哈尔滨维科生物技术有限公司
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2023年第4期1-6,共6页
基金
国家自然科学基金(32072851)
兽医生物技术国家重点实验室开放课题(SKLVBF202110)。
文摘
为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
凝胶层析技术
纯化
形态学
Keywords
PRRSV
gel chromatography
purification
morphology
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒RFLP 1-4-4 L1C株的分离鉴定及其遗传演化分析
被引量:
3
2
作者
田笑笑
黄昕怡
夏大松
王海伟
田志军
蔡雪辉
安同庆
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期583-590,597,共9页
基金
国家自然科学基金(32072851、31941019)
兽医生物技术国家重点实验室开放课题(SKLVBF202110)。
文摘
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RFLP 1-4-4 lineage1C(L1C)变异株自2020年在美国出现以来,给养猪业造成了严重的经济损失。我国目前尚无RFLP 1-4-4 L1C变异株的报道。为了解我国PRRSV RFLP 1-4-4株的流行情况,本研究对我国15个省219份疑似PRRSV感染的临床样品进行了PRRSV ORF5基因的RT-PCR检测与测序。结果显示,41份(18.72%)为PRRSV阳性样品,其中有1份来自黑龙江省样品中的PRRSV ORF5基因为1-4-4模式。将该样品经PAM分离病毒并经PCR和间接免疫荧光试验鉴定,结果显示分离到一株RFLP模式为1-4-4的PRRSV,命名为HLJ-80。采用PCR对分离病毒的全基因组分段扩增并测序拼接后显示其基因组全长15013 nt,利用MegAlign软件分析分离病毒与PRRSV 6株代表株的全基因组序列、ORF基因序列的同源性及其NSP2的氨基酸序列;利用MEGA6.0软件分析分离株ORF5基因序列并绘制其系统发生树(ML法);采用RDP4分析分离株全基因组序列的重组事件。全基因组序列的同源性分析结果显示,HLJ-80株与NADC30株的同源性最高,为93.3%,与其他代表株的同源性均低于90%。除ORF2基因外,其余基因序列均与NADC30株同源性最高(90.6%~99.3%)。ORF5基因的遗传进化树显示,HLJ-80株属于RFLP 1-4-4 L1C株。NSP2氨基酸序列分析结果显示,与VR-2332株相比,HLJ-80株NSP2存在131个氨基酸(111+1+19)的不连续缺失,缺失位置与NADC30株一致。上述结果表明,HLJ-80株与NADC30株的亲缘关系较近。重组分析结果显示,HLJ-80株有可能与PRRSV 2014-81株、SD53-1603株高度同源的病毒株重组而来。将本研究中的41株分离株ORF5基因序列,及GenBank中1996年~2021年我国3125条共计3166条北美洲型PRRSV ORF5基因序列,按照PRRSV RFLP 1-4-4模式和L1C分支谱系分类,并分析我国RFLP 1-4-4 L1C株在时间和地理上的分布;将2016年~2021年GenBank中7个国家全部北美洲型PRRSV ORF5基因序列(共计1918条),按照PRRSV RFLP分类,分析2016年以来我国与不同国家之间PRRSV RFLP的模式特点。结果显示,我国PRRSV RFLP 1-4-4自2003年首次出现,至今已累计达260株(8.2%),其中217株属于L1C分支(83.46%),其余为L8和L1A分支。PRRSV的RFLP分类结果显示,1918条PRRSV ORF5基因共有36种RFLP模式。其中RFLP 1-7-4模式的数量最多占25.96%,RFLP 1-4-4分布最广泛,除越南和印度外,该模式在其余5个国家均有分布,其在我国的数量最多。本研究为了解我国PRRSV RFLP 1-4-4株的流行情况提供了重要参考数据。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
限制性酶切片段长度多态性
分支谱系
RFLP
1-4-4
L1C
Keywords
PRRSV
restriction fragment length polymorphism
lineage
RFLP 1-4-4 L1C
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
scanf()函数的缺陷及解决措施
被引量:
1
3
作者
夏大松
出处
《电脑编程技巧与维护》
1994年第5期52-52,共1页
文摘
用C语言编制程序,当需要按照某种格式从标准输入中读取数据时,常调用标准库函数scanf()。将表示数字量的字符转换成数字量。但在实际使用过程中。当程序编制欠妥当或输入不严格时,就会出现错误。请看下面二例:
关键词
库函数
取数据
字符型
程序编制
字符转换
字量
SCANF
请看
换行
执行结果
分类号
TP311.52 [自动化与计算机技术—计算机软件与理论]
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职称材料
题名
2.13H安装故障的排除
4
作者
夏大松
出处
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第12期45-45,共1页
关键词
故障现象
2.13H
汉字点阵信息
汉字操作系统
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汉字显示
硬盘
系统装入
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引导文件
分类号
TP3 [自动化与计算机技术—计算机科学与技术]
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职称材料
题名
FoxBase+通用组合查询技巧的实现
5
作者
夏大松
出处
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第5期21-21,共1页
关键词
数据库
管理系统
FOXBASE+
组合查询
分类号
TP311.13 [自动化与计算机技术—计算机软件与理论]
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职称材料
题名
中文Windows 3.1下挂接拼音词汇输入法
6
作者
夏大松
出处
《电脑技术——Hello-IT》
1995年第9期30-30,共1页
关键词
拼音词汇输入法
汉字输入法
WINDOWS
分类号
TP316 [自动化与计算机技术—计算机软件与理论]
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职称材料
题名
线性组合预测在税收管理中的应用
被引量:
4
7
作者
邓成樑
夏大松
机构
华中理工大学管理学院
出处
《运筹与管理》
CSCD
1994年第3期74-77,共4页
文摘
本义论述了组合预测理论中,对组合预测值采用“各个个体预测值的加权算术平均值”的不合理性,提出了用多重线性组合预测模型进行预测的方法,并将它运用于对××市税收的实际预测中去,预测精度高,效果好。
关键词
线性组合预测
税收管理
税收预测
分类号
O221.1 [理学—运筹学与控制论]
F810.423 [经济管理—财政学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用
孙悦
王尚辉
涂亚斌
杨勇博
王洪峰
夏大松
蔡雪辉
安同庆
孙明霞
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2023
0
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职称材料
2
猪繁殖与呼吸综合征病毒RFLP 1-4-4 L1C株的分离鉴定及其遗传演化分析
田笑笑
黄昕怡
夏大松
王海伟
田志军
蔡雪辉
安同庆
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
下载PDF
职称材料
3
scanf()函数的缺陷及解决措施
夏大松
《电脑编程技巧与维护》
1994
1
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职称材料
4
2.13H安装故障的排除
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995
0
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职称材料
5
FoxBase+通用组合查询技巧的实现
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995
0
下载PDF
职称材料
6
中文Windows 3.1下挂接拼音词汇输入法
夏大松
《电脑技术——Hello-IT》
1995
0
下载PDF
职称材料
7
线性组合预测在税收管理中的应用
邓成樑
夏大松
《运筹与管理》
CSCD
1994
4
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职称材料
已选择
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