蛋白质亚细胞定位的生物信息学研究

细胞中蛋白质合成后被转运到特定的细胞器中,只有转运到正确的部位才能参与细胞的各种生命活动,如果定位发生偏差,将会对细胞功能甚至生命产生重大影响.蛋白质的亚细胞定位是蛋白质功能研究的重要方面,也是生物信息学中的热点问题,数据库的构建和亚细胞定位分析及预测加速了蛋白质结构和功能的研究.

中枢神经系统疾病患儿血清和脑脊液髓鞘碱性蛋白的定量分析

目的 探讨小儿中枢神经系统（ＣＮＳ） 疾病脑脊液（ＣＳＦ） 和血清髓鞘碱性蛋白（ ＭＢＰ） 水平的改变及临床意义，寻找反映小儿ＣＮＳ损伤的生化指标。方法 证实为ＣＮＳ疾病的患儿８５ 例，其中男５８ 例，女２７ 例，年龄１ 月～１３ 岁。采用ＥＬＩＳＡ 法对病例血清及部分病例ＣＳＦ标本作ＭＢＰ定量测定。结果 疾病组中ＣＮＳ感染、颅内出血、及颅内占位性病变等病例中ＣＳＦ和血清ＭＢＰ均值都明显高于正常对照组。结论 任何原因导致ＣＮＳ髓鞘结构的破坏时，其ＭＢＰ在ＣＳＦ的水平升高，当血清ＭＢＰ含量也升高时，提示血脑屏障（ＢＢＢ） 破坏，通透性升高。结果显示对ＣＳＦ和血清ＭＢＰ的检测，可作为一项反映ＣＮＳ损伤的生化指标。

基于序列保守性和蛋白质相互作用的真核蛋白质亚细胞定位预测

蛋白质的亚细胞定位是进行蛋白质功能研究的重要信息.蛋白质合成后被转运到特定的细胞器中,只有转运到正确的部位才能参与细胞的各种生命活动,有效地发挥功能.尝试了将保守序列及蛋白质相互作用数据的编码信息结合传统的氨基酸组成编码,采用支持向量机进行蛋白质亚细胞定位预测,在真核生物中5轮交叉验证精度达到91.8%,得到了显著的提高.

外部性脑积水血清和脑脊液髓鞘碱性蛋白的变化

目的 探讨围生期高危因素造成外部性脑积水 (EH)小儿的血清及脑脊液髓鞘碱性蛋白 (MBP)检测的临床意义。方法 采用华西医大陈俊杰报道的ELISA法对入组病例血清及脑脊液进行定量分析。结果 入组病例血清及脑脊液MBP值均高于对照组 (P <0 .0 1 ) ,并有显著差异。结论 高危因素所致EH小儿存在脱髓鞘病理改变和血脑屏障破坏 ,其脑脊液中MBP含量升高 ,小儿血脑屏障发育不完善 ,血清MBP亦升高 。

致痫剂马桑内酯引起培养的大鼠皮层神经细胞凋亡

用有致痫作用的马桑内酯处理培养的大鼠皮层神经细胞。以原位ＤＮＡ 断端标记法检测培养神经细胞的凋亡，配以培养液中乳酸脱氢酶的检测，观察马桑内酯对培养皮层神经细胞的毒性作用，并与已知的神经毒剂海人酸作比较。结果显示，马桑内酯可诱导培养大鼠皮层神经细胞凋亡，而引起细胞坏死的作用不如海人酸明显，其对培养大鼠皮层神经细胞的神经毒作用以导致神经细胞凋亡为主。

家兔腹主动脉球囊导管损伤后血管平滑肌细胞凋亡和一氧化氮合成酶基因表达

采用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法，观察兔腹主动脉经球囊导管损伤后0、8、24h，3天和5天时血管中膜平行肌细胞和外膜细胞凋亡的变化．提取血管组织RNA，采用反转录一多聚酶链反应测定一氧化氮合成酶基因表达。结果表明，血管损伤后8h可见中膜平滑肌细胞凋亡增加，24h达高峰，3天和5天仍维持在较高水平，外膜细胞凋亡无明显改变。而诱导型一氧化氮合成酶基因表达亦于8h明显增加，在24h达最高，与细胞凋亡存在平行关系。提示中膜平滑肌细胞凋亡是球囊导管损伤血管的一个早期反应，诱导型一氧化氮合成酸可能参与了此过程。

IL-1β诱导体外培养的大鼠中脑黑质神经元c-jun表达

应用细胞原位杂交技术，观察经重组小鼠白细胞介素-19（IL-1β）处理后的体外培养的新生1d大鼠中脑黑质神经元c－jun基因的表达．结果显示，培养的黑质细胞多为酪氨酸羟化酶阳性神经元，IL-1β可诱导体外培养的黑质神经元c－junmRNA表达，高水平的表达出现在IL-1β处理后2～4h。说明IL－1β有兴奋黑质神经元的作用，并提示黑质神经元上可能存在IL－1β受体．

单纯疱疹病毒性脑炎的病理和病毒抗原研究

用免疫组化方法研究7例散发性病毒性脑炎尸检标本脑组织中单纯疤疹病毒抗原的存在和分布,发现2例为单纯疤疹病毒性脑炎。病毒抗原分布于大脑皮质的神经元,胶质细胞和单核细胞,而浸润的淋巴细胞内无抗原存在。结果表明,单纯疱疹病毒是国内散发性病毒性脑炎的重要病原。

浅析移频自动闭塞系统中信号抗干扰技术

目前在闭塞区间通过轨道电路传输的信息越来越复杂,信息传送的可靠性和安全性问题便显得日益突出。自动闭塞的行车信息以铁轨作为信道进行传输时,轨道电路具有高电感、高漏泄电导、大牵引电流和串音干扰的缺点,由于传输系统复杂性,不可避免地叠加有各种外界干扰。这些干扰将会对信号设备产生影响,甚至危及行车安全。因此在移频自动闭塞系统中抗干扰技术十分重要。

浅谈铁路FSK信号的频谱分析

频谱分析技术是解决泄漏和噪声的问题分析方法之一。铁路信号频谱细化后,并不是简单的一条谱线,而是一簇谱线。为提取有用频谱,必须把残留的泄漏频谱剔除。工频谐波干扰是影响信号频谱的主要原因之一,也是造成现场无码区段乱上灯的重要根源。由于工频基波、谐波有其特定的谱结构,因此,可以利用其相互关联的特征,去除干扰。

浅谈铁路FSK信号解调技术

本文对铁路FSK信号解调技术加以分析。

可视化-环介导等温扩增技术检测肠出血性大肠杆菌O157:H

目的建立可视化的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)联合横向流动试纸条(lateral flow dipstick,LFD)方法检测肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)0157:H7的分析方法。方法以EHEC 0157:H7的遗传标志性基因z3276基因序列为检测靶标设计6条LAMP特异性引物,其中2条环引物分别标记异硫氰酸荧光素和地高辛,用LFD检测扩增产物,建立EHEC0157:H7 LAMP-LFD检测方法。结果所建立的检测方法能够特异性的检测EHEC 0157:H7,与试验对照菌株EHEC 026、0145、045、0121,及其他主要大肠杆菌血清型025、078、0103、O111、0127、0138、0139、0141,及禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)E058、肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)SEC627、EPEC SEC689、K12-MG1655、BL21,和其他种属的受试菌,不存在交叉反应;对EHEC 0157:H7纯培养物的最低检测限为1.3 CFU/mL。结论本研究所建立的LAMP-LFD检测方法特异性和敏感性良好,操作简单,结果可视。

土地所长王加成

土地所长王加成夏学峰，周序蒙王加成，一个普通的乡土地管理所所长，富贵不淫、威武不屈，最终赢得了人民的厚爱。威胁不惧１９８８年８月，江苏省响水县张集乡退伍军人王加成，通过考试被县土地管理局招聘为土地管理员，组织上分配他来到地处偏僻的双满乡工作。当时，双...

猪IFN-δ5的表达纯化及其抗PEDV感染的作用分析

【目的】试验旨在建立大量表达及纯化猪δ5干扰素(pIFN-δ5)的方法,并对其抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染的作用进行分析。【方法】根据GenBank中pIFN-δ5序列(登录号:NM_001164854.1)设计引物,以猪肝脏组织cDNA为模板进行PCR扩增;将目的基因连接入经EcoRⅤ和HindⅢ双酶切的线性化pET-32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,并进行SDS-PAGE和Western blotting检测;pIFN-δ5蛋白大量表达后使用镍离子亲和层析柱纯化,并测定蛋白纯度;采用细胞病变抑制法检测pIFN-δ5的干扰素效价,采用CCK8方法检测pIFN-δ5的细胞毒性,进一步测定其抗PEDV的感染能力。【结果】试验成功构建了重组表达质粒pET-pIFNδ5,经诱导条件摸索发现,在D值为0.5~0.6、IPTG浓度为0.8 mmol/L、37℃诱导条件下,目的蛋白pIFN-δ5主要表达于菌体裂解上清中;经大量表达并纯化后可获得纯度>95%的pIFN-δ5蛋白。使用VSV/MDCK细胞滴定系统检测pIFN-δ5的比活性为5×10^(4)U/mg;CCK8检测表明pIFN-δ5的细胞毒性较小。实时荧光定量PCR、Western blotting和间接免疫荧光检测结果表明,pIFN-δ5具有显著抗PEDV感染能力。【结论】本试验建立了表达和纯化pIFN-δ5的方法,通过一系列的体外抗病毒试验证实pIFN-δ5具有良好的抗PEDV感染的活性,为将pIFN-δ5作为抗病毒药物及临床应用奠定了基础。

江苏地区屠宰场大肠杆菌O157:H7的分子流行病学研究

本研究用多重PCR检测44株大肠杆菌O157:H7的主要毒力基因,使用多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳两种分型技术鉴定菌株之间亲缘关系,自动化仪器测定病原菌对常用抗生素的敏感性。结果表明,44株大肠杆菌O157:H7的毒力因子stx1、stx2、hly和eae检出率分别为59.09%、93.18%、75.00%和100%,共分为6个毒力基因表型;多位点序列分型研究发现所有菌株分属3个ST型,分别为ST11、ST4429和ST1423,其中ST11为优势型。脉冲场凝胶电泳聚类分析将所有菌株分成19个PT型,具有显著多态性。44株O157:H7对14种常用兽用抗生素具有不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、磺胺异恶唑、链霉素和阿奇霉素强耐药。

中枢神经系统感染患儿髓鞘碱性蛋白的检测及分析

目的 评价髓鞘碱性蛋白 (MBP)在小儿中枢神经系统病毒和细菌感染中的临床意义。方法 对 48例中枢神经系统感染性疾病患儿血清及脑脊液 (CSF)的MBP进行定量检测。结果 病毒性感染组与细菌性感染组血清和CSF中MBP水平较对照组显著升高 (P <0 0 0 1)。