Beclin1和LC3在食管癌组织中的表达水平和临床意义

目的探讨Beclin1和LC3在食管鳞癌和腺癌组织中的表达水平和临床意义。方法通过免疫组织化学SP法检测89例食管癌组织标本中Beclin1和LC3的表达情况。结果 Beclin1和LC3在食管癌中的阳性表达率(47.2%,40.4%)均显著低于正常食管癌组织标本组(88.9%,80.6%)(P<0.05)。Beclin1和LC3在食管癌中的表达与TNM分期、组织浸润程度、淋巴结转移和组织分化程度有关(P<0.05),与年龄、性别和组织类型(P>0.05)等无明显差异。Beclin1与LC3在食管鳞癌和腺癌中的表达呈正相关(r=7.935,P=0.005)。结论在食管鳞癌和腺癌中,肿瘤分化程度越低、浸润程度越高、有淋巴结转移、临床分期越高,Beclin1和LC3的表达越低,可能与肿瘤的发生发展与侵袭转移相关。

3例SUN5基因变异导致无头精子症的遗传学分析和助孕治疗结局

畸形精子症是男性不育的常见原因之一[1],其中无头精子症(acephalic spermatozoa syndrome,ASS)是一种严重导致男性不育的罕见畸形精子症,其特征是精液中含有无头精子尾部和一些松散的精子头部,主要表现为头颈部连接处异常[2-3],精子在电子显微镜下通常显示精子头部和尾部之间缺少植入窝和基板[4]。ASS有2种亚型:一种类型表现为没有细胞核的小“针头样”精子,另一种类型是头颈部错误连接的精子[3,5]。

浅谈新产品开发中的质量策划

通过对新产品开发研制整个过程的描述 ,着重论述了质量策划的方法和要求 ,阐明新产品开发需要以顾客和市场需求为中心 ,综合企业实际情况 。

精子-透明质酸结合试验在IVF-ET中的应用价值分析

目的:探讨精子-透明质酸结合试验(HBA)在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值。方法:纳入2019年1~8月于本院因女方输卵管因素致不孕而行IVF-ET助孕的患者163例,男方精液常规分析均正常,根据精子-透明质酸结合率结果分为正常组和异常组,分析两组患者男女双方一般情况,观察正常受精、卵裂、可利用胚胎情况,统计胚胎种植率及临床妊娠率。结果:两组患者一般情况、卵裂率、胚胎种植率、临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05);两组精子-透明质酸结合率、正常受精率、可利用胚胎率差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:精子-透明质酸结合率与精子浓度、前向运动精子率和正常形态率无相关性;HBA对IVF-ET助孕受精情况、胚胎质量有一定的预测作用,精子-透明质酸结合率低于58.5%时,正常受精率和可利用胚胎率偏低;但与胚胎种植率和临床妊娠率尚无明显相关性;HBA在IVF-ET助孕中有一定的应用价值。

不同冻存保护剂对未性成熟小鼠睾丸生精细胞冻存的影响

目的探索不同冻存保护剂对2周龄未性成熟小鼠睾丸生精细胞冻存的影响。方法取2周龄雄性小鼠两步酶法制备睾丸细胞悬液(TCS),根据DMEM/F12培养基中不同浓度二甲基亚砜(DMSO)、蔗糖、海藻糖的组合将冻存保护剂分为5组:A组含10%DMSO和10%胎牛血清(FBS);B组含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖和10%FBS;C组含10%DMSO、0.1 mol/L海藻糖和10%FBS;D组含15%DMSO、0.1 mol/L蔗糖0.1 mol/L海藻糖和10%FBS;E组含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖、0.1 mol/L海藻糖和10%FBS。将5组睾丸细胞采用程序化冻存于液氮中,2月后进行复苏。台盼蓝检测细胞活性,计算各组细胞冻存后的细胞活率和复苏率,流式细胞仪检测睾丸生精细胞的凋亡和线粒体膜电位变化,以新鲜的2周龄小鼠睾丸生精细胞作为对照组。结果与冻存前比较,冻存复苏后各组的细胞活率均显著下降(P<0.05),且冻存组中E组细胞活率下降程度最低[(83.03±1.61)%]、细胞复苏率最高[(87.37±1.66)%](P<0.05)。细胞凋亡比较中,冻存复苏后各组细胞凋亡率均显著高于对照组[(18.77±0.95)%](P<0.05),其中A组细胞凋亡率最高[(57.08±2.40)%],E组细胞凋亡率最低[(29.62±1.95)%](P<0.05)。线粒体膜电位比较中,各组复苏后细胞线粒体膜电位均低于冻存前,除E组外,其余4组均显著低于对照组(P<0.05),在冻存的5组中E组下降程度最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同冷冻保护剂对未性成熟小鼠睾丸生精细胞冻存效果有显著影响,其中含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖、0.1 mol/L海藻糖及10%HBS组合冷冻剂方案是冻存未性成熟小鼠睾丸生精细胞较适宜的冷冻保护剂方案。

PMFBP1基因变异所致的无头精子症1例患者的临床特征及遗传学分析

目的:分析1例无头精子症造成的原发性男性不育症患者的临床特点和遗传学病因。方法:选取2022年10月1日就诊于河南省人民医院生殖中心的1例男性不育症患者作为研究对象。收集患者夫妇的临床信息、实验室以及精子的电镜检查结果。对患者进行全外显子组测序分析,并对候选致病位点进行Sanger测序家系验证和致病性分析。结果:全外显子组测序显示患者携带PMFBP1基因c.853del(p.Ala285Leufs*24)和c.1276A>T(p.Lys426X)复合杂合变异,既往均未见报道。Sanger测序的结果提示c.853del(p.Ala285Leufs*24)变异遗传自患者已去世的母亲,c.1276A>T(p.Lys426X)变异遗传自父亲。根据美国医学遗传学与基因组学学会相关指南,上述变异均被判定为致病性(PVS1+PM2_Supporting+PP4)。结论:PMFBP1基因变异可能是患者的遗传学病因。新变异的检出丰富了人类无头精子症的致病突变谱。

Y染色体AZFc区不同部分缺失对严重少弱精子症患者ICSI结局的影响

目的探讨Y染色体无精子因子(azoospermia factor, AZF)c区不同部分缺失对严重少弱精子症患者卵胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)临床结局的影响。方法本研究为回顾性队列研究, 分析在河南省人民医院生殖医学中心2017年12月至2020年7月期间经Y染色体AZF区高通量测序筛查、精子浓度<5×106/mL且行射精精子ICSI助孕的严重少弱精子症患者的临床资料, 根据筛查结果将携带AZFc缺失的患者纳入缺失组(n=108), 无AZFc缺失的患者纳入对照组(n=445), 同时按照缺失位点类型将AZFc缺失组分为b2/b4缺失(n=19)、b2/b3缺失(n=30)、gr/gr缺失(n=43)3个亚组, 分别比较各组间及亚组间胚胎发育及妊娠结局情况。结果存在AZFc缺失的患者第3日(day 3, D3)可利用胚胎率、优质胚胎率以及囊胚形成率均低于对照组, 差异均有统计学意义[(70.4%(556/790)比78.5%(2867/3651), P<0.001;24.7%(199/807)比34.3%(1284/3747), P<0.001;51.7%(277/536)比58.0%(1540/2592), P=0.007];种植率、临床妊娠率、移植周期活产率两组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。AZFc区域b2/b3缺失亚组D3可利用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、种植率、临床妊娠率及活产率与对照组比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05);b2/b4缺失亚组优质胚胎率[23.2%(32/138)]低于对照组(P=0.004), 而D3可利用胚胎率、囊胚形成率、种植率、临床妊娠率及活产率与对照组相比, 差异均无统计学意义(均P>0.05);gr/gr缺失亚组D3可利用胚胎率[71.6%(280/391)]、优质胚胎率[20.8%(84/403)]以及囊胚形成率[48.7%(133/273)]均低于对照组(P=0.002、P<0.001、P<0.001), 而种植率、临床妊娠率及活产率与对照组比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 Y染色体AZFc区域b2/b3缺失和b2/b4缺失对严重少弱精子症患者ICSI胚胎发育及妊娠结局均无显著影响, gr/gr缺失对胚胎发育不利影响最大, 但对妊娠结局无影响。

小鼠血清中CCL2和CXCL2水平与硼替佐米干预aGVHD效果的相关性研究

目的本研究探讨CCL2和CXCL2血清水平在异基因移植后的变化,进一步探究CCL2和CXCL2与硼替佐米干预异基因骨髓移植后a GVHD效果的关系。方法应用流式细胞小球微阵技术检测小鼠血清中趋化因子CCL2和CXCL2的水平。结果 GVHD小鼠血清中CCL2和CXCL2的水平明显增高,给予标准剂量硼替佐米产生GVHD时小鼠血清中CCL2和CXCL2的水平明显增高而给予低剂量硼替佐米时小鼠血清中CCL2和CXCL2的水平明显降低。结论血清趋化因子CCL2和CXCL2作为一组潜在的生物标志,可能作为一种监测方法用来评估硼替佐米干预异基因造血干细胞移植时的安全性和有效性。

左旋肉碱复合营养素治疗弱精子症疗效分析

目的探讨左旋肉碱复合营养素(希维力)治疗男性不育症中特发性弱精子症的有效性与安全性。方法对84例特发性弱精子症患者单一应用希维力,15g/次,2次/d,治疗周期为3个月。分别于治疗前1周及治疗3个月后,采用计算机辅助的精液分析检测精子活力,观察精液参数变化、服药后的不良反应和女方妊娠情况。结果 84例患者均完成本研究,其中72例患者精液质量明显改善,精子浓度、前向运动精子率和前向运动精子总数均明显提高(P<0.01),有9位女性在男方服用希维力期间获得妊娠。结论希维力治疗特发性弱精子症安全有效,可显著提高精液中前向运动精子的活力和总数,提高女方临床妊娠率。

炎性细胞模型中姜黄素对胆固醇逆转运蛋白ABCA1和ABCG1基因的影响

目的探讨炎性反应模型中,姜黄素对胆固醇逆转运蛋白基因表达的影响。方法将RAW264.7细胞分为6组:空白对照组,姜黄素10μmol/L组,姜黄素20μmol/L组,脂多糖(LPS)组,姜黄素10μmol/L+LPS组和姜黄素20μmol/L+LPS组。应用荧光定量PCR检测各组中RAW264.7细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G1(ABCG1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达情况。结果 LPS刺激可显著上调RAW264.7细胞ABCA1和TNF-α基因的表达(P<0.05),下调ABCG1基因的表达(P<0.05);姜黄素处理后可进一步上调ABCA1基因的表达(P<0.05),但是对ABCG1和TNF-α基因的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在炎性反应条件下,姜黄素可进一步上调胆固醇逆转运关键基因ABCA1的表达,这可能是其抗动脉硬化的分子机制之一。

罕见的变异型克氏综合征一例

患者男,37岁,因“婚后未育12年”来院就诊。体格检查:身高179 cm,体重69 kg,体质指数21.53 kg/m^2,头发、胡须发育正常,双侧胸廓对称,无男乳女化表现,专科检查:阴毛发育正常,阴茎疲软状态下牵长7cm,双侧睾丸1mL,质软。双侧附睾输精管精索未见异常。连续2次以上精液离心后镜检未见精子。

DNAH1基因突变引起精子鞭毛多发形态异常的不育患者辅助生殖助孕结局分析

目的探讨DNAH1基因突变引起的精子鞭毛多发形态异常(multiple morphological abnormalities of the sperm flagella,MMAF)不育患者行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)助孕后的临床结局。方法回顾性队列研究分析2018年2月至2020年1月期间在河南省人民医院生殖中心就诊的39例MMAF不育患者的临床资料和基因检测结果,12例由DNAH1突变引起的MMAF患者为DNAH1阳性组,27例未提示DNAH1突变的MMAF患者为DNAH1阴性组,选择同一时期男女双方年龄匹配进行ICSI助孕治疗的100例精子形态正常的男性不育症患者作为对照组,观察并分析3组不育夫妇进行辅助生殖助孕的治疗结局。结果39例MMAF患者均行全外显子组测序检测,其中12例患者检测到DNAH1基因突变,分别为10例复合杂合突变和2例纯合突变,另27例患者未检测到目前已知的引起MMAF的基因突变。3组患者夫妇均行ICSI助孕治疗,DNAH1阳性组、DNAH1阴性组和对照组在获卵数和MII卵子数上的差异均有统计学意义[(17.08±5.32)枚、(9.59±3.98)枚和(10.44±6.33)枚,P=0.001;(14.58±5.18)枚、(6.78±3.38)枚和(8.32±5.31)枚,P<0.001],在胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率和活产率上的差异均无统计学意义(均P>0.05)。12例由DNAH1突变引起的不育患者夫妇共接受12个取卵周期,形成第3天胚胎79枚,首次新鲜胚胎或复融胚胎移植共12次,获得10个亲生子代。结论对于由DNAH1基因突变引起的MMAF患者,ICSI助孕可以帮助其生育亲生子代,且有较高的临床妊娠率和活产率。

邻苯二甲酸二丁酯通过AMPK/mTOR信号通路对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)通过腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMP activated protein kinase/mammalian rapamycin target protein,AMPK/mTOR)信号通路对大鼠睾丸间质细胞(Leydig)凋亡的影响。方法生殖功能损伤大鼠模型按照体质量排序分组法分为模型(DBP)组17只、模型+AMPK抑制剂[DBP+化合物C(compound C,CC)]组17只、模型+AMPK激动剂[DBP+二甲双胍(metformin,MF)]组17只、DBP+AMPK抑制剂+激活剂(DBP+CC+MF)组17只。另取11只大鼠作为空白组。空白组和DBP组腹腔注射等量生理盐水,DBP+CC组、DBP+MF组分别腹腔注射20 mg/kg CC、200 mg/kg MF,DBP+CC+MF组腹腔注射20 mg/kg CC+200 mg/kg MF,qd,连续4周。放射性免疫分析法检测各组血清黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、睾酮水平;全自动精子质量分析系统分析精子质量;HE染色法观察睾丸生精小管上皮细胞病变情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)法和流式细胞术检测Leydig细胞凋亡情况;RT-PCR法和Western blotting法检测AMPK、mTOR、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)mRNA和蛋白及p-AMPK、p-mTOR蛋白的表达。结果与DBP组的血清FSH水平[(9.07±0.52)U/L]相比,DBP+MF组血清FSH水平[(9.88±0.67)U/L]升高,DBP+CC组[(6.82±0.60)U/L]降低,差异均有统计学意义(均P<0.001);与DBP组血清LH、睾酮水平、精子浓度及(a+b)级精子占比[(4.51±0.75)U/L、(3.25±0.11)mg/L、(16.46±3.40)×10^(6)/mL、(25.43±4.36)%]相比,DBP+MF组血清LH、睾酮水平及精子浓度、(a+b)级精子占比[(3.97±0.70)U/L、(2.96±0.11)mg/L、(13.15±2.63)×10^(6)mL、(22.20±4.13)%]降低,DBP+CC组[(6.52±0.71)U/L、(4.48±0.15)mg/L、(25.47±2.18)×10^(6)/mL、(45.60±4.78)%]升高,差异均有统计学意义(DBP组比DBP+MF组PLH=0.038,其余均P<0.001)。HE染色显示,空白组睾丸组织结构正常;DBP组和DBP+CC+MF组生精小管上皮细胞萎缩、扭曲呈不规则形态,DBP+MF组病变更为严重,核周现大量空泡;DBP+CC组病变较DBP组有所改善。与DBP组Leydig细胞凋亡数、p-AMPK/AMPK蛋白及Caspase 3 mRNA和蛋白相对表达量(142.40±26.78、0.70±0.07、1.85±0.14、0.80±0.09)相比,DBP+MF组Leydig细胞凋亡数、p-AMPK/AMPK及Caspase 3 mRNA和蛋白相对表达量(286.60±30.17、0.95±0.08、2.17±0.18、1.23±0.10)升高,DBP+CC组(88.00±21.34、0.42±0.04、1.35±0.15、0.54±0.06)]降低,差异均有统计学意义(均P<0.001);与DBP组p-mTOR/mTOR(0.45±0.06)相比,DBP+MF组(0.23±0.04)降低,DBP+CC组(0.84±0.07)升高(均P<0.001)。结论DBP可致大鼠生殖系统受损,Leydig细胞凋亡率升高,其机制可能与AMPK活化、mTOR抑制有关。

骨钙素对不育男性生育力及体外受精-胚胎移植/卵胞浆内单精子显微注射治疗结局的影响

目的探讨男性不育患者血清骨钙素(osteocalcin,OC)水平与生育力及体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET)/卵胞浆内单精子显微注射技术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗结局的关系。方法行IVF-ET/ICSI助孕的男性不育患者88例,其中OC严重低下组(OC<14μg/L)29例、OC低下组(14~18μg/L)25例、OC正常组(OC>18μg/L)34例。比较3组IVF-ET/ICSI治疗前血清25-羟基维生素D[25-hydroxyvitamin D,25(OH)D]、性激素、精液检测结果及治疗结局。结果OC严重低下组治疗前血清25(OH)D水平[(17.39±4.97)μg/L]低于OC低下组[(19.17±5.29)μg/L]、OC正常组[(19.15±5.48)μg/L](P<0.05),OC低下组与OC正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组治疗前卵泡刺激素、黄体生成素、泌乳素、睾酮、游离睾酮、雌二醇水平比较差异无统计学意义(P>0.05),3组配偶治疗前血清抗苗勒氏管激素水平及窦卵泡数比较差异无统计学意义(P>0.05)。OC正常组治疗前精子密度[(86.24±48.46)×10^6/mL]高于OC严重低下组[(55.80±37.03)×10^6/mL]、OC低下组[(59.73±41.33)×10^6/mL](P<0.05),OC严重低下组精子密度与OC低下组比较差异无统计学意义(P>0.05);OC严重低下组、OC低下组、OC正常组精液体积[(3.68±1.22)、(3.25±1.29)、(3.83±1.53)mL]、前向运动精子百分比[(40.61±16.52)%、(38.10±20.17)%、(39.66±19.64)%]、非前向运动精子百分比[(8.12±2.90)%、(7.10±3.31)%、(6.86±3.59)%]、不动精子百分比[(51.26±16.73)%、(54.80±21.66)%、(48.23±22.11)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。OC严重低下组、OC低下组、OC正常组治疗后配偶2PN率(79.24%、76.74%、79.88%)、2PN卵裂率(95.72%、94.44%、96.99%)、优质胚胎率(61.45%、63.10%、62.02%)、种植率(50.00%、48.00%、49.15%)、妊娠率(58.62%、64.00%、61.76%)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论OC严重降低可影响血清25(OH)D水平及精子生成,进而降低生育能力,血清OC水平对IVF-ET/ICSI治疗结局无明显影响。

非梗阻性无精子症患者血清抗缪勒氏管激素水平与睾丸显微取精结果的关系

目的探讨非梗阻性无精子症患者血清抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)、抑制素B(inhibin B, InhB)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、雌二醇(estradiol, E_2)、总睾酮(total testosterone, TT)水平与睾丸显微取精术(microdissection testicular sperm extraction, M-TESE)结果的相关性。方法非梗阻性无精子症患者58例,均行M-TESE,并依据检查结果分为获精组32例和无精组26例。采用ELISA法检测2组血清AMH、InhB水平,采用电化学发光法检测2组血清FSH、LH、E_2、TT水平;绘制ROC曲线,分析血清AMH水平预测M-TESE获精的效能。结果获精组血清AMH[(1.75±1.64)μg/L]水平低于无精组[(5.40±4.80)μg/L](P<0.05),血清InhB[(19.18±16.92)ng/L]、FSH[(24.73±14.00)u/L]、LH[(16.83±9.26)u/L]、E_2[(72.56±35.67)pmol/L]、TT[(9.82±7.39)nmol/L]水平与无精组[(13.63±7.28)ng/L、(26.10±9.78)u/L、(14.47±6.55)u/L、(95.86±57.51)pmol/L、(12.73±7.39)nmol/L]比较差异无统计学意义(P>0.05);AMH以2.425μg/L为最佳截断值,预测M-TESE获精的AUC为0.737(95%CI:0.602～0.873,P=0.002),灵敏度为65.4%、特异度为78.1%。结论对非梗阻性无精子症患者,检测血清AMH有助于预测M-TESE能否获得精子。

显微镜下睾丸取精术联合辅助生殖技术治疗克氏综合征疗效分析

目的探讨显微镜下睾丸取精术联合辅助生殖技术治疗克氏综合征的疗效及结局。方法95例克氏综合征患者分为显微手术组65例和对照组30例,显微手术组行显微镜下睾丸取精术,对照组行睾丸穿刺活检术,比较2组患者临床资料、获精率,并随访治疗结局。比较显微手术组取精成功者中同周期治疗者与非同周期治疗者双原核率、双原核卵裂率、D3可利用胚胎率、种植率和妊娠率。结果显微手术组获精率(46.15%)高于对照组(6.67%)(P<0.05),手术时间[(76.8±19.8)min]长于对照组[(13.8±5.0)min](P<0.05);显微手术组年龄[(29.0±3.8)岁]、睾丸体积[(1.3±0.6)mL]、促卵泡生成素[(33.1±8.8)u/L]、促黄体生成素[(20.1±6.9)u/L]、总睾酮[(1.9±1.3)μg/L]、雌二醇[(21.7±12.0)ng/L]与对照组[(28.6±2.9)岁、(1.3±0.5)mL、(33.3±11.4)u/L、(20.2±7.0)u/L、(2.4±1.2)μg/L、(22.6±13.8)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05);显微手术组获取精子者30例均进入试管周期,其中同周期治疗者14例,非同周期治疗者16例,同周期治疗者双原核率(68.05%)、双原核卵裂率(96.52%)、D3胚胎可利用率(73.87%)高于非同周期治疗者(52.53%、83.13%、59.42%)(P<0.05),种植率(61.11%)和妊娠率(69.23%)与非同周期治疗者(38.09%、38.46%)比较差异无统计学意义(P>0.05);显微手术组已生育3个遗传学子代,12例获临床妊娠。结论显微镜下睾丸取精术是帮助克氏综合征患者获取精子的一种有效方法,克氏综合征患者采用同周期显微手术联合辅助生殖技术更易获得遗传学子代。

2种类型非梗阻性无精子症患者行显微睾丸取精术联合辅助生殖技术助孕结局分析

目的比较特发性非梗阻性无精子症(idiopathic non-obstructive azoospermia, iNOA)、纯合型克氏综合征患者行显微镜下睾丸取精术(microdissection testicular sperm extraction, micro-TESE),配偶同周期行卵胞质内单精子显微注射技术(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕的妊娠结局。方法 iNOA患者41例为iNOA组,纯合型克氏综合征患者42例为克氏综合征组,均行micro-TESE成功获取精子。2组患者配偶同周期取卵行ICSI助孕。比较2组患者年龄、体质量指数、双侧睾丸体积及血清卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平;比较2组配偶年龄、体质量指数、基础窦卵泡数及血清抗苗勒管激素、卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平;比较2组患者手术时间、有活动精子比率;比较2组妊娠结局及配偶双原核率、卵裂率、胚胎种植率、临床妊娠率。结果 2组患者年龄、体质量指数,配偶年龄、体质量指数、基础窦卵泡数及血清抗苗勒管激素、卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。克氏综合征组患者左、右侧睾丸体积[(1.45±0.77)、(1.36±0.53)mL]均小于iNOA组[(6.78±4.05)、(7.15±3.91)mL](P<0.05),血清卵泡刺激素[(40.13±17.07)u/L]、黄体生成素[(21.31±7.60)u/L]水平均高于iNOA组[(21.16±14.93)、(10.77±7.54)u/L](P<0.05),血清总睾酮水平[(2.42±1.28)nmol/L]低于iNOA组[(3.44±2.10)nmol/L](P<0.05)。克氏综合征组患者手术时间[(69.0±16.9)min]短于iNOA组[(82.0±23.8)min](P<0.05),有活动精子比率(16.7%)与iNOA组(9.8%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。克氏综合征组活产率(68.4%)高于iNOA组(44.4%)(P<0.05),配偶双原核率(62.9%)、卵裂率(94.0%)、胚胎种植率(60.3%)、临床妊娠率(76.3%)、早期流产率(10.3%)与iNOA组(63.7%、92.5%、47.6%、63.9%、13.0%)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 iNOA与克氏综合征患者采用micro-TESE,配偶同周期行ICSI助孕均可获得亲生子代,克氏综合征患者活产率较高。

长链非编码RNA-HIT通过上皮-间充质转化促进膀胱癌增殖和侵袭

研究表明,长链非编码RNA(lncRNA)-HIT通过诱导上皮-间充质转化(EMT)而促进肿瘤细胞侵袭及转移[1],而EMT也参与膀胱癌的侵袭和转移[2]。本研究分别在尿路上皮细胞人输尿管上皮永生化细胞(SV-HUC-1)过表达和膀胱癌细胞T24和干扰长链非编码RNA(lncRNA)-HIT,检测lncRNA-HIT对膀胱癌细胞EMT相关基因表达的影响,并检测其对膀胱癌细胞增殖及侵袭等生物学的影响。

长链非编码RNA-HIT在膀胱癌组织的表达及其对膀胱癌细胞生物学的影响

目的观察人膀胱移行细胞癌(BTCC)患者肿瘤组织及膀胱癌细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)HIT的表达,探讨lncRNA-HIT对膀胱癌细胞的生物学影响。方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2016年9月至2019年3月华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院54例BTCC患者手术切除的癌组织及其配对毗邻正常黏膜组织中lncRNA-HIT的表达水平;统计分析其表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。采用短发卡RNA(shRNA)干扰lncRNA-HIT,观察其对膀胱癌细胞的凋亡、增殖及侵袭等生物学的影响。两组均数间比较用t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析。结果BTCC患者癌组织中lncRNA-HIT的表达量较配对癌旁正常组织上调(t=5.763,P<0.05);lncRNA-HIT在膀胱癌细胞株EJ、UMUC3和T24细胞的表达较正常膀胱细胞系SV-HUC-1细胞明显上调(t=15.030、13.020、14.050,P<0.05)。lncRNA-HIT异常增高与患者肿瘤分级(χ^2=6.862,P<0.01)、分期(χ^2=14.814,P<0.01)、淋巴结转移(χ^2=9.429,P<0.01)、远处转移(χ^2=12.523,P<0.01)等密切相关,但与性别(χ^2=0.441,P>0.05)和年龄(χ^2=0.106,P>0.05)无明显相关,体外靶向干扰实验显示下调lncRNA-HIT可以显著促进膀胱癌细胞的凋亡,抑制膀胱癌细胞增殖和其侵袭能力。结论lncRNA-HIT在BTCC患者肿瘤组织中显著增高。

未羧化骨钙素对老年大鼠睾丸间质细胞睾酮合成功能的影响

目的:通过建立老年大鼠模型,探究未羧化骨钙素对老年雄性大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响。方法:30只3月龄成年雄性大鼠,随机对半分为正常对照组和实验组,实验组颈背部皮下注射D-半乳糖溶液300 mg·kg^-1·d^-1,对照组颈背部皮下注射等剂量生理盐水,注射时间为8周。验证衰老模型构建成功后,取大鼠的睾丸间质细胞,分别用不同质量浓度0(等量PBS溶液)、1、3 ng/mL的非羧化骨钙素刺激大鼠睾丸间质细胞,24 h后收取培养液采用睾酮ELISA检测试剂盒进行睾酮浓度检测;并在24 h后收集细胞提取RNA,然后采用荧光定量PCR法检测睾丸间质细胞睾酮合成关键酶StAR、Cyp11a、Cyp17的表达。结果:同加入等量PBS溶液的对照组大鼠睾丸间质细胞相比,加入等量PBS溶液的模型组大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮水平下降(P<0.05);对模型组大鼠睾丸间质细胞分别进行1、3 ng/mL未羧化骨钙素处理,相较于模型组加入等量PBS溶液处理的睾丸间质细胞,骨钙素处理组睾丸间质细胞培养液上清中睾酮水平均升高(P<0.05);与加入等量PBS溶液的模型组大鼠睾丸间质细胞相比,经过1 ng/mL未羧化骨钙素处理后的模型组大鼠睾丸间质细胞的StAR、Cyp11a、Cyp17基因的表达有明显的上升;经过3 ng/mL未羧化骨钙素处理后的模型组大鼠睾丸间质细胞的StAR、Cyp11a、Cyp17基因的表达有显著上升。结论:本研究成功的构建了D-半乳糖诱导的衰老大鼠模型,证明了未羧化的骨钙素可以促进D-半乳糖诱导的老年大鼠睾丸间质细胞睾酮合成,并且该作用可能是由于未羧化骨钙素促进其睾酮合成关键酶的表达引起的。