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猪δ冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
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作者 方谱县 张蕙畅 +4 位作者 夏思进 江晓翠 孙倩倩 肖少波 方六荣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第6期1-10,共10页
为制备猪δ冠状病毒(PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体,并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学(IHC)检测,本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛... 为制备猪δ冠状病毒(PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体,并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学(IHC)检测,本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛选获得稳定分泌N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对单克隆抗体的免疫反应特异性、亚类进行系统鉴定。结果显示:通过3次亚克隆筛选获得8株可分泌PDCo V N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA和Western blot分析,证实制备的单克隆抗体均与猪δ冠状病毒反应,且不与猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)反应,特异性良好。单克隆抗体亚类鉴定结果表明,1A11、3C6、1E7、1E12株单克隆抗体属Ig G1型,4F3、2A3株单克隆抗体为Ig G2a型,3E4单克隆抗体为Ig M型,8株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用1A11单克隆抗体对PDCo V、PDEV、TGEV感染猪的空肠、回肠组织进行IHC检测,结果表明1A11能与感染PDCo V的组织发生特异性免疫反应,而不与感染PDEV和TGEV的组织发生反应,特异性良好。本研究制备的PDCo V N蛋白单克隆抗体可为PDCo V诊断方法的建立以及N蛋白的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪δ冠状病毒 N蛋白 原核表达系统 单克隆抗体 免疫组化
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10个蓝莓品种主要营养成分与色素含量分析 被引量:47
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作者 葛翠莲 黄春辉 +1 位作者 夏思进 徐小彪 《中国南方果树》 北大核心 2012年第4期33-35,共3页
以首次引进江西省南昌市的美青、布里吉塔、莱茜、维尔、美蓝、园蓝、粉蓝、杰兔、芭尔徳温和灿烂等10个蓝莓品种为试材,对其果实营养品质及色素含量进行分析。结果表明,维生素C含量最高的是美蓝(0.344mg/g)和芭尔徳温(0.343mg/g)蓝莓;... 以首次引进江西省南昌市的美青、布里吉塔、莱茜、维尔、美蓝、园蓝、粉蓝、杰兔、芭尔徳温和灿烂等10个蓝莓品种为试材,对其果实营养品质及色素含量进行分析。结果表明,维生素C含量最高的是美蓝(0.344mg/g)和芭尔徳温(0.343mg/g)蓝莓;美青蓝莓可溶性糖含量最高,达10.22%;莱茜和灿烂的可滴定酸含量最低,分别是0.98%和0.99%;糖酸比最高的是灿烂(10.285),其次是园蓝(9.32)。在果实色素含量方面,园蓝的花青苷和类胡萝卜素含量最高,分别为1.921mg/g、0.039mg/g,而粉蓝的类黄酮含量最高(1.163mg/g)。总体而言,园蓝蓝莓的营养价值较高,含有较丰富的花青苷。 展开更多
关键词 蓝莓 营养成分 色素 花青苷
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蓝莓的栽培利用现状与发展前景 被引量:9
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作者 黄春辉 夏思进 +1 位作者 曲雪艳 徐小彪 《现代园艺》 2011年第5期41-43,共3页
蓝莓是一种经济价值高、具独特保健作用,且适于我国红黄壤地区开发的新兴小浆果,目前在世界果品中越来越受到广泛重视。本文在综述了国内外蓝莓的栽培利用现状之后,对蓝莓的生物学特性和关键栽培管理技术进行了介绍,最后对我国蓝莓产业... 蓝莓是一种经济价值高、具独特保健作用,且适于我国红黄壤地区开发的新兴小浆果,目前在世界果品中越来越受到广泛重视。本文在综述了国内外蓝莓的栽培利用现状之后,对蓝莓的生物学特性和关键栽培管理技术进行了介绍,最后对我国蓝莓产业的发展前景进行了讨论,旨在为我国蓝莓产业化发展提供一定的理论依据和技术支持。 展开更多
关键词 蓝莓 生物学特性 栽培技术 产业发展
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农民散户种植蓝莓应注意什么
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作者 夏思进 《农村百事通》 2011年第17期14-16,共3页
蓝莓属杜鹃花科越橘属多年生灌木.因其果实呈深蓝色而得名。蓝莓单果重0.5~2.5克,大果可达5克.果实表面包裹着一层白色的果霜.晶莹漂亮,果味酸甜可口.有一种特殊的果香味.100%可食。蓝莓除了含有大量的维生素C、维生素E外。... 蓝莓属杜鹃花科越橘属多年生灌木.因其果实呈深蓝色而得名。蓝莓单果重0.5~2.5克,大果可达5克.果实表面包裹着一层白色的果霜.晶莹漂亮,果味酸甜可口.有一种特殊的果香味.100%可食。蓝莓除了含有大量的维生素C、维生素E外。还含有抗氧化性极强的花青素和SOD(超氧化物歧化酶1,对解除视疲劳和改善视力、缓解脑神经衰老、防治泌尿道感染、防癌等方面都有独特的保健效果.是国际市场炙手可热的保健水果.被誉为“第三代水果之王”、“水果皇后”。 展开更多
关键词 蓝莓 超氧化物歧化酶 第三代水果 种植 农民 杜鹃花科 维生素C 维生素E
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猪δ冠状病毒的分离鉴定及其遗传进化分析
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作者 方谱县 刘康 +5 位作者 张蕙畅 夏思进 张健淞 任杰 肖少波 方六荣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期168-175,共8页
通过RT-PCR对采集自河北省2个猪场的5份腹泻仔猪小肠内容物进行检测,结果均为猪δ冠状病毒(PDCoV)阳性。将病料处理后接种LLC-PK1细胞,从2个猪场的病料中各成功分离到1株PDCoV,分别命名为PDCoV CHN-HeB-A1株和CHN-HeB-B2株。通过间接免... 通过RT-PCR对采集自河北省2个猪场的5份腹泻仔猪小肠内容物进行检测,结果均为猪δ冠状病毒(PDCoV)阳性。将病料处理后接种LLC-PK1细胞,从2个猪场的病料中各成功分离到1株PDCoV,分别命名为PDCoV CHN-HeB-A1株和CHN-HeB-B2株。通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blot和电镜观察对分离的病毒进一步鉴定,IFA和Western blot结果证实2株病毒都能与PDCoV M蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,电镜下可观察到直径100~150 nm、呈典型皇冠状的病毒粒子,证实所分离的病毒为PDCoV。全基因组测序以及遗传进化分析结果表明,2株PDCoV与中国大陆毒株相似性较高,为98.7%~99.1%,与中国香港毒株处于同一簇。 展开更多
关键词 猪δ冠状病毒 分离 鉴定 基因组测序 遗传进化
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