珍菊汤对小鼠急性肝损伤保护作用研究

【目的】探讨自组方剂珍菊汤对3种不同诱因导致的急性肝损伤模型小鼠的保护作用。【方法】利用高效液相色谱(HPLC)测定珍菊汤主要成分及其含量。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率、羟基自由基清除率、总还原能力测定和对5-脂氧合酶(5-LOX)活性的抑制率探究珍菊汤的抗氧化和抗炎作用。选取42只小鼠随机分为7组进行24 h经口急性毒性试验及21 d蓄积毒性试验对其安全性进行评价。另选取113只小鼠,其中随机选取8只为空白对照组(Control),其余105只随机平均分配至3种药物诱导的急性肝损伤试验,每个试验35只。各急性肝损伤试验内再随机分为模型组(Model)、阳性药物水飞蓟宾组(Silybin)及珍菊汤高(H)、中(M)和低(L)剂量组,每组7只。Control和Model组连续灌胃生理盐水14 d;阳性药物Silybin组按50 mg/kg剂量连续灌胃14 d;珍菊汤高、中、低剂量组分别按照生药浓度10.0、5.0和2.5 g/kg连续灌胃珍菊汤14 d;第15天分别以四氯化碳(CCl 4)、对乙酰氨基酚(APAP)和酒精(Alcohol)诱导急性肝损伤模型,于第16或20天剖解,检测肝脏病理,血清生化指标、抗氧化指标、炎性因子及肝脏特异性基因miRNA(miR-122)变化。【结果】高效液相色谱测定得出每1 g珍菊汤组方中含有芦丁0.27 mg,木犀草苷2.72 mg,异绿原酸A 0.26 mg,盐酸小檗碱0.28 mg。珍菊汤DPPH自由基清除半数抑制浓度(IC 50)和羟自由基清除IC 50分别为2.394和104 mg/mL,总还原能力为3.73±0.04,抗炎率为75.97%±3.11%。经口急性毒性试验和蓄积毒性试验表明珍菊汤安全无毒。CCl 4、APAP和Alcohol所致急性肝损伤病理模型中,Model组小鼠肝组织出现不同程度病变,不同剂量珍菊汤组和阳性药物Silybin组均有一定程度改善。与Model组相比,珍菊汤高剂量干预后,肝脏血清生化指标谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(T-CHO)显著降低(P<0.05);抗氧化指标丙二醛(MDA)显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)显著升高(P<0.05);炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肝脏miR-122基因显著降低(P<0.05)。【结论】珍菊汤是一种安全无毒的组方药物,灌胃10.0 g/kg能够显著改善小鼠肝脏病变,提高小鼠肝脏抗氧化能力,对CCl 4、APAP和Alcohol所致急性肝损伤具有较好的保护作用。