microRNA-23a调控斑马鱼颅神经嵴细胞迁移和分化

目的探讨miRNA-23a对斑马鱼颅面软骨,尤其是咽区软骨发育过程中神经嵴细胞诱导、迁移和分化的影响。方法通过在胚胎中注射吗啉环修饰的反义核苷酸(antisense morpholino oligonucleotide,MO),抑制胚胎内源性miRNA-23a的活性。阿尔新蓝染色观察敲低mi RNA-23a对斑马鱼颅部软骨发育的影响。整胚原位杂交检测不同发育时期神经嵴细胞特异基因的表达情况。分别在Tg(sox10:EGFP)和Tg(col2a1:h2a-mCherry)转基因胚胎中敲低mi RNA-23a,激光共聚焦显微镜活体检测咽区软骨形成和神经嵴细胞向软骨分化过程中存在的缺陷。结果受精后96小时的敲低miRNA-23a胚胎头部背侧颅骨部分的索旁软骨后段缺失,且头部腹侧咽区软骨中的麦氏软骨、腭方软骨和角舌骨明显变短,基舌骨和角鳃骨缺失。后续的原位杂交实验及共聚焦显微镜拍摄结果表明,敲低miRNA-23a没有影响神经嵴细胞的形成及向头部迁移,但从后脑迁移到咽区的神经嵴细胞明显减少,而且不能分化为成熟的软骨细胞,致使角鳃骨缺失。结论 miRNA-23a对颅神经嵴细胞向咽区迁移并分化为软骨细胞具有重要作用。

常见探究实验的分类归纳——以“细胞呼吸”为例

实验探究能力是高考生物的考查重点。其中,有关细胞呼吸的探究实验更是高频考点。在教学中,教师可帮助学生从酵母菌的呼吸方式的探究、呼吸速率的测定、呼吸熵的测定等三个方面对有关细胞呼吸的探究实验进行分类归纳,以使学生更好地掌握知识。