腺病毒介导的野生型p53基因对肺腺癌细胞株生长的抑制作用

为研究野生型p53基因对肺腺癌细胞株GLC-82细胞生长的作用,确立腺病毒介导的野生型p53基因在肿瘤治疗中的意义,应用分子克隆技术首先构建了野生型p53复制缺陷型腺病毒重组体,应用生化染色方法确定了重组体的转染效率,以免疫组化法及PCR技术分别确定了腺病毒载体介导的p53基因转染GLC-82细胞后p53蛋白和p53 cDNA的表达情况;最后应用细胞生物学方法检测了p53对GLC-82细胞扩增及细胞周期的影响.结果表明所构建的重组体可以高效、快速转染GLC82细胞,抑制GLC-82细胞扩增,使细胞合成期和分裂后期的量减少。

四氢叶酸还原酶基因C677T突变与阿尔茨海默病有关

目的 调查一些候选基因的多态性与阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)发病的关系。方法 利用Roche公司 Roche Molecular System(RMS)提供的同时检测多种基因多态性的方法 ,检测 1 5种与脂代谢、血压和血栓形成相关基因的 2 9个多态性位点的基因型 ,比较 3 7例 AD患者和 84名健康人在这些等位基因频率方面的差别。结果 AD组载脂蛋白 E(Apo E)常见基因多态性 (ε2、ε3、ε4)和甲烯四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因的 C677T多态性分布与健康对照组相比有显著不同。Apo Eε4和 MTHFR基因的 677T等位基因的频率在AD组显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 MTHFR基因的 677T等位基因可能是除 Apo Eε4外另一个与

载脂蛋白A-Ⅳ基因360位点与阿尔茨海默病和帕金森病的关系研究

目的 探讨载脂蛋白 A- (apolipoprotein A- ,Apo A- )基因 3 60位点多态性和血脂指标与阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)和帕金森病 (Parkinson disease,PD)的关系。方法 应用存在特异性引物的简便、直接的聚合酶链反应 (PCR)方法 ,检测具有临床诊断证据的 3 9例 AD患者 [(77.7± 8.1 )岁 ]、3 6例 PD患者[(74.8± 1 0 .0 )岁 ]和 2 0 8名健康人 [(5 4.3± 1 1 .2 )岁 ]Apo A- 基因 3 60位点 (Gln/His)的突变 ,同时应用常规临床化学方法检测上述人群的血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)水平。结果 在所有患者和健康人群中 ,均未发现 Apo A- 3 60 His等位基因携带者 ;两个病患组与对照组血清 TC和HDL-C水平差异无显著性 ,但病患组血清 TG水平却显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;PD组血清 TG水平显著高于 AD组 (P <0 .0 5 )。结论 此研究未发现 Apo A- 基因 3 60位点突变基因型携带者 ,故无法探讨其与 AD和PD的关系 ;血脂水平与 AD和

同时检测多种心血管疾病相关基因多态性的方法

应用Roche分子系统提供的试剂、材料和实验操作步骤 ,介绍其建立的一种同时检测多种心血管疾病相关基因的多个位点基因型分析方法 ,并且比较所检测的不同中国地区 (北京和香港 )的中国人群之间和中国人与法国人群之间的各等位基因频率的差异。结果发现 ,北京人群和香港人群在所有检测的等位基因频率方面没有显著差别 ,但是中国人和法国人在一些等位基因频率分布方面存在显著差异。总之 ,Roche分子系统建立的是一种快速而有效的分析多基因多位点基因型的方法 ,有益于大规模的人群调查心血管疾病的遗传危险因素。

人类抑癌基因beclin 1在胃癌和直结肠癌中表达下调的研究(英文)

人类抑癌基因beclin 1通过自噬作用调节细胞生长,但在胃癌和直结肠癌中其表达水平和调控机制仍不清楚.通过检测胃癌和直结肠肿瘤组织中beclin 1基因的表达水平,及DNA异常甲基化和杂合子缺失对其表达的影响,发现与癌旁组织相比,35%的胃癌标本和30%的直结肠癌标本中beclin 1基因表达显著下调.同时发现,beclin 1基因5′端存在一高密度CpG岛,在胃癌和直结肠癌中beclin 1的启动子区域和第二个内含子区域存在甲基化,而杂合子缺失仅在胃癌中发生.这些发现表明beclin 1基因的异常甲基化和杂合子缺失对其在胃癌和直结肠癌中的表达起调控作用.

四种全血基因组DNA提取方法的比较

为比较酚 氯仿抽提法、经典Miller盐析法、改进的Miller盐析法及胍盐酸法提取人全血基因组DNA的方法 ,分别测定所获DNA的效率和纯度。结果发现四种方法提取的DNA纯度分别为 1.6 2± 0 .2 6、1.5 8± 0 .2 8、1.6 1± 0 .2 8、1.5 6± 0 .2 7,各组间差异无显著性 ;5mL全血所提DNA总量分别为 6 4 .0± 33.0 μg、30 .3± 2 6 .9μg、11.1± 9.2μg和 6 5 .2± 2 4 .0 μg。酚 氯仿法和胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其他两种方法。四种方法提取DNA的纯度相似 ,酚 氯仿法和胍盐酸法的提取效率高 ,胍盐酸法和盐析法的操作较简单、安全。胍盐酸法相对简单快速、安全、效率高 。

北京部分职业人群血清非高密度脂蛋白胆固醇参考值及其分布

非高密度脂蛋白胆固醇代表除高密度脂蛋白胆固醇以外一切有致动脉粥样硬化作用的脂蛋白 (以胆固醇含量表示 )的总和 ,用总胆固醇减去高密度脂蛋白胆固醇即可算出。为了解北京部分职业人群非高密度脂蛋白胆固醇的参考值及其分布 ,选择调查 2 0 0 0～ 2 0 0 1年来院体检的北京市事业及企业单位干部与职工 (不包括体力劳动者 ) ,共计 2 816 1人 (男 女为 6 4 ) ,年龄 2 0～ 85岁。按标准化要求空腹测定总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及甘油三酯水平 ,以Freidewald公式计算低密度脂蛋白胆固醇水平。结果发现 ,非高密度脂蛋白胆固醇随年龄上升 ,5 0岁以下男性高于女性 ,5 0岁以上女性高于男性。非高密度脂蛋白胆固醇年龄标化均值男为 3.4 7mmol L、女为 3.2 9mmol L ,但老年男为 3.90mmol L、老年女高达 4 .2 1mmol L。假定甘油三酯在临界值 (1.7mmol L)时 ,非高密度脂蛋白胆固醇比低密度脂蛋白胆固醇高 0 .77mmol L ,由于该组人群甘油三酯水平较低 ,各年龄组两项指标的差距都或多或少地低于 0 .77mmol L。调查所得非高密度脂蛋白胆固醇水平比美国全国有代表性的数据大约低 2 0 % (男女相近 ) ,以上表明北京部分职业人群动脉粥样硬化性心血管病危险明显低于美国人。

ATP连结盒转运体的研究进展

ATP连结盒转运体（ATP Binding Cassette transporter,ABC transporter,ABC转运体）基因突变所导致的ABC转运体功能障碍，不仅与Tangier病发生相关，而且与其他血脂代谢异常疾病，如家族性高密度脂蛋白（HDL）缺乏症发病相关。对ABC转运体结构和功能的研究与认识有助于揭示脂谢异常的分子机制以及开发升高HDL水平的新药。

1981～2001年北京市职业人群血清总胆固醇水平的变动

分析 1981年至 2 0 0 1年 2 0年间北京市部分职业人群血清总胆固醇水平的变化。在力求做到血脂测定标准化的基础上 ,回顾性分析 2 0年来北京市部分机关和企事业单位工作人员 47434人次总胆固醇水平的变化 ,按年度、性别、年龄分组统计。结果发现 ,总胆固醇水平从 1981年至 1988年间上升幅度较大 ,年龄调整均值男性上升0 .73mmol/L (2 8mg/dL) ,女性上升 0 .6 2mmol/L (2 4mg/dL)。至 1990年已达最高值 ,2 0 0 1年低于 1991年 ,男、女年龄调整均值分别回落 0 .2 1mmol/L (8mg/dL)及 0 .2 3mmol/L (9mg/dL)。男女总胆固醇水平随年龄上升 ,从青年至老年 ,男性上升约 2 0 %,而女性升高达 35 %,上升趋势基本一致。不同年龄组间上升幅度有明显的男女差异 ,青年期男性大于女性 ,中年以后女性上升幅度增大 ,从 40～ 49岁至 5 0～ 5 9岁组男性平均上升 3%,而女性上升达 14%,6 0岁以后上升很少。所以总胆固醇水平在 5 0岁以前男性高于女性 ,5 0岁以后女性高于男性。以 1985年、1991年和 2 0 0 1年为例 ,无论男女 ,年龄标化的高胆固醇检出率 [总胆固醇≥ 5 .17mmol/L (2 0 0mg/dL)、≥ 5 .6 9mmol/L (2 2 0mg/dL)及≥ 6 .0 2mmol/L (2 40mg/dL) ]1991年比 1985年明显增高 ,而 2 0 0 1年与

野生型p53基因的导入对膀胱癌细胞抑制作用的观察

转染外源野生型ｐ５３基因对膀胱癌ＥＪ细胞的抑制作用。方法将含外源野生型ｐ５３基因的（ａｄ┐Ｗｔｐ５３）转染膀胱癌ＥＪ细胞，观察生长曲线，细胞周期变化及裸鼠体内抑瘤试验。结果转染了ａｄ┐Ｗｔｐ５３的ＥＪ细胞在体外生长速率下降，在裸鼠体内致瘤性丧失，流式细胞仪显示，ＤＮＡ合成前期或静止期的细胞比例增高。另外，ａｄ┐Ｗｔｐ５３直接注射到肿瘤组织内，可使外源野生型ｐ５３基因在肿瘤细胞内有效、稳定的表达，肿瘤表现为生长减缓，最后停止生长并有缩小。结论腺病毒载体介导基因转染效率高，速度快，安全，是很有前途的体内基因治疗载体。

Rb基因导入对膀胱癌细胞生长的抑制作用

为探讨腺病毒载体介导的外源性Rb基因导入对膀胱癌细胞生长的抑制作用,为膀胱癌的基因治疗提供实验依据,构建了Rb基因的复制缺陷型重组腺病毒载体.体外转染人膀胱癌细胞株EJ.应用免疫组化法、免疫印迹及聚合酶链反应技术检测外源性Rb基因腺病毒载体的转染效率及Rb基因表达效果;用流式细胞仪分析细胞周期;以细胞计数及同位素掺入技术观察外源性Rb基因对EJ细胞生长的抑制效果.结果显示腺病毒载体可有效地将外源基因导入EJ细胞.Rb基因重组腺病毒载体转染细胞后,胞内DNA合成减少,细胞生长受到抑制.流式细胞仪分析显示68%的EJ细胞生长停滞在GO/GI期.结果提示。

大学生社会适应行为方式问卷编制及信效度检验

目的：编制大学生社会适应性问卷,以此作为大学生心理健康教育以及相关干预评估的测量工具。方法：通过文献研究和行为访谈法,以适应性行为特质为观测指标,选取来自北京6所高校中文、理、工、医、体5种学科专业的1~4年级大学生作为被试,被试共有596人。其中,男生291人,女生305人,对收集的问卷条目进行项目检验,形成初步问卷,随机抽取了北京两所高校4个年级的500名本科生进行初步问卷施测,经过采用探索性因素分析形成正式问卷,使用正式问卷再次随机抽取800名大学生进行验证性因素分析。结果：1问卷由开放自信、客观现实、自尊自主、压力应对、情境调控、豁达宽容6个分量表构成,累计方差贡献率为58.089%;2验证性因素分析结果表明6个因子构建的模型（χ^2/df=4.307,GFI=0.836,CFI=0.842,IFI=0.842,RMSEA=0.06）拟合较好;3总体问卷及分量表的系数α分别为0.968,0.892,0.893,0.878,0.809,0.834,0.742。结论：问卷的各个维度具有较好的效度和信度,可以用于大学生社会适应性的测量。

同型半胱氨酸水平与冠心病的关系

目的观察同型半胱氨酸(Hey)水平与冠心病(CHD)的关系,并探讨蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性、叶酸、维生素B12(VitB12)与Hcy水平及CHD的关系。方法 选择190例经冠状动脉造影证实的CHD患者(CHD组)和100例冠状动脉造影正常者为对照组。应用荧光偏振免疫分析法测定Hey水平,离子捕获分析法测定叶酸水平,微粒酶免疫分析法测定VitB12水平。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析MTRRA66G基因多态性。结果 CHD组血Hcy水平显著高于对照组(15.8±8.8)μmol/L与(12.9±6.3)μmol/L,P=0.002。叶酸、VitB12水平与血Hcy水平呈负相关。叶酸、VitB12与CFD无关。MTRR A66G基因多态性GG纯合子、AG杂合子和AA野生型3种基因型组间血Hcy水平差异无显著性意义。(P=0.908)。MTRR A66G各基因型在CHD组和对照组的分布差异无显著性意义(P=0.198)。结论CHD患者血Hcy水平升高,叶酸、VitB12水平与血Hcy水平呈负相关。MTRR A66G基因多态性与血Hcy水平及与CHD均无关。

Rb基因对肺腺癌细胞株生长的抑制作用

目的：探讨重组腺病毒载体的转染效率及其介导外源Ｒｂ基因进肿瘤细胞的效果，观察外源Ｒｂ基因在肿瘤细胞内的表达及其对肿瘤细胞生长的抑制作用。为肿瘤的基因治疗提供实验依据。方法：构建Ｒｂ基因重组腺病毒载体。体外转染人肺腺癌细胞株ＧＬＣ－８２。应用免疫组化和聚合酶链反应等技术，观察Ｒｂ基因在细胞内的状态及表达情况。应用细胞计数及流式细胞仪检测肿瘤细胞的生长情况。结果：ＧＬＣ－８２细胞内存在基因组Ｒｂ基因，但较少表达Ｒｂ蛋白。应用重组腺病毒载体可以有效导入Ｒｂ基因，表达Ｒｂ蛋白。外源Ｒｂ基因的导入可有效抑制癌细胞生长，使静止期和合成前期细胞增多，合成后期和分裂期细胞减少。结论：证明了重组腺病毒载体是介导外源抑癌基因进入肿瘤细胞的有效途径。导入外源Ｒｂ基因可有效抑制癌细胞增生。

腺病毒介导野生型p53基因诱导膀胱癌细胞凋亡

p53基因是一种抑癌基因,它在肿瘤发生过程中有重要作用.p53基因的突变可引起细胞增殖,导致悼瘤的发生.迄今已在许多恶性肿瘤细胞中发现p53基因的突变.将外源野生型p53基因导入p53基因突变的肿瘤细胞,能抑制其恶性增殖,逆转其恶性表型.这些研究为肿瘤的基因治疗奠定了基础;值得注意的是,至今大多数研究均用有p53基因缺失或突变的肿瘤细胞,但并非所有的肿瘤细胞都发生p53基因突变;本文将外源野生型p53基因导入表达内源野生型p53基因的膀胱癌细胞株EJ,观察其抑制效应及凋亡的诱导作用.

在全基因组范围内筛选酵母中砷抗性相关基因

砷化物是广泛应用的抗癌药物,特别是对白血病有显著疗效.然而,治疗过程中病人会因对砷化物具有耐药性而影响治疗效果,而目前对于砷抗性机制尚缺全面深入的研究.利用酵母作为模式生物,使用不同浓度的砷对由4757个酵母缺失型突变体组成的菌株库进行筛查.共鉴定出104个基因/开放阅读框(ORF),其缺失导致酵母对砷的抗性增加.生物信息学分析结果提示,这些基因与mRNA分解代谢、应激反应、组蛋白乙酰化和蛋白质合成及分解代谢等功能有关.同时这些基因中多于半数具有哺乳动物同源类似物.所以,进一步研究这些基因有望为人类砷化物的耐药性及毒性机制研究提供富有价值的新线索.

一种文本数据挖掘与可视化的新方法

传统搜索引擎的搜索结果采用的是以一维列表的形式展现,随着文献数据的急剧增多,用户对于搜索结果的辨识和分析速度也在急剧下降。为了弥补传统工具的这一不足,本文开发了"语义图"(semantic map,SMAP),此工具对文献数据进行数据挖掘和可视化,包括关联匹配和聚类,将搜索结果以二维矩阵图的形式展示出来,方便用户理解数据之间的内部联系,并帮助用户迅速从整体上把握搜索结果。最后以蛋白质组学文献分析过程为例具体展示了此工具的应用。

大规模单核苷酸多态性位点验证的集群解决方案

随着高通量的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)检测技术的发展,世界各地的实验研究积累了大量的SNP数据,但是目前尚无一个全面综合的SNP数据库。SNP在致病基因发现、司法鉴定、个体化医疗等方面的应用得到了极大的关注和发展,因此有必要建立一个整合的人类SNP数据库。在整合中需要进行大规模的单核苷酸多态性位点的验证,该工作通过一个自主开发的、健壮的、用户友好的生物信息学集群计算工具包EasyC luster在集群系统上得以高效完成。

四川省提出为铁路建设创造良好环境

2010年8月2日，四川省召开铁路建设专题会议，肯定成都铁路局在加快四川铁路建设进程中作出的努力和取得的成绩，提出继续坚持部省共建、省市（州）共建体制和铁路建设协调机制，努力为四川铁路建设创造良好环境，有力推动铁路成为建设西部综合交通枢纽的“火车头”。