海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素、生长抑素阳性细胞的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)阳性细胞的影响,以及Gas、SS在海洛因依赖时的可能作用。方法应用免疫组织化学SABC法和图像分析技术。结果1.与正常组和盐水对照组相比,海洛因依赖大鼠胃窦内的Gas阳性细胞数量增加(P<0.05),染色强度随依赖时间逐渐增强,平均灰度值明显低于空白及盐水对照组(P<0.05),且随依赖时间的延长呈下降的趋势,38d时最低。2.海洛因依赖组大鼠胃窦SS阳性细胞染色强度增强,细胞数量显著高于空白和盐水对照组(P<0.05),平均灰度值低于空白及盐水对照组(P<0.05)。结论大鼠胃窦Gas、SS阳性细胞可能通过增加细胞数量和增加Gas、SS的合成来参与大鼠海洛因依赖的调节过程。

葛根素对慢性乙醇中毒小鼠胃窦黏膜胃泌素、生长抑素表达的影响

目的探讨慢性乙醇中毒小鼠胃窦黏膜胃泌素(Gas)和生长抑素(SS)表达的变化及葛根素预处理的影响。方法健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为生理盐水对照组(SC组)、慢性乙醇中毒组(CAI组)和葛根素预处理组(PUE组)各8只,应用免疫组织化学SABC法和图像分析技术对Gas、SS在各组小鼠胃窦黏膜中的表达进行检测。结果 PUE组小鼠胃窦内Gas阳性细胞数量较CAI组减少(P<0.05),三组阳性细胞的平均灰度值无统计学差异。与CAI组比较,PUE组和SC组胃窦内SS阳性细胞数量较多,免疫染色增强,平均灰度值下降(P均<0.05)。结论乙醇影响小鼠胃窦内Gas、SS的表达,葛根素可调控Gas、SS的表达,对乙醇性胃黏膜损伤有保护作用。

胃泌素和5-羟色胺在海洛因戒断、复吸大鼠胃窦的表达

目的探讨海洛因戒断、复吸对大鼠胃窦内胃泌素(gastrin,Gas)、5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)阳性细胞的影响。方法成年雄性SD大鼠35只,按配对原则随机分为正常对照组(n=5)、生理盐水对照组(n=15)和实验组(n=15),实验组大鼠又分为海洛因戒断组、美沙酮脱毒治疗组和海洛因复吸组,每组5只。采用免疫组织化学SABC法及图像分析法,观察Gas、5-HT在大鼠胃窦中表达的变化。结果①在海洛因戒断、复吸期间,Gas、5-HT在胃窦表达增强,与正常对照组及生理盐水对照组比较,戒断及复吸组大鼠胃窦内的Gas、5-HT阳性细胞免疫染色加深,平均灰度值均低于正常及盐水对照组,且阳性细胞计数增多,差异有统计学意义(P<0.05)。②脱毒治疗组与正常及生理盐水对照组比较,大鼠胃窦内的Gas、5-HT阳性细胞的免疫染色强度无明显变化,平均灰度值及细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论在海洛因戒断、复吸期间,胃窦通过分泌Gas、5-HT增多的方式,参与了机体对抗海洛因的损伤;美沙酮脱毒治疗后胃窦分泌Gas、5-HT有所减少,可能与胃窦功能逐步趋于正常有关。

CD4、CD8和IL-2在海洛因戒断、复吸大鼠胃窦的表达

目的:探讨海洛因戒断、复吸对大鼠胃窦内CD4、CD8和白介素2(interleukin-2,IL-2)表达的影响.方法:正常♂SD大鼠35只,随机分为正常对照组(normal control group,NCG)、盐水对照组(saline control group,SCG)和实验组(experiment group,EG),将EG大鼠又分为戒断组(heroin withdrawal group,HWG)、脱毒治疗组(methadone detoxication group,MDG)和复吸组(heroin relapse group,HRG).采用免疫组织化学SABC法及图像分析法,观察CD4、CD8和IL-2在大鼠胃窦中表达的变化.结果:与正常对照组及SCG比较,HWG及HRG大鼠胃窦内的CD4、IL-2阳性细胞数量有所减少(CD4:NCG 15.944±1.661;HWG8.500±1.150,HRG 10.278±1.074;IL-2:NCG21.824±2.556;HWG 13.118±3.180;HRG 8.529±1.179),染色变浅,表达减弱,平均灰度值升高(CD4:NCG 135.314±3.595;HWG 154.889±3.238,HRG155.455±3.176;IL-2:NCG131.082±4.769;HWG 150.233±4.241;HRG 150.199±4.007);CD8阳性细胞数量增多(NCG 18.611±2.477;HWG 26.167±2.203,HRG 26.778±1.592)染色变深,表达增强,平均灰度值下降(CD8:NCG 138.239±4.047;HWG 123.717±4.622,HRG 125.498±3.056).差异均有统计学意义(P<0.05).MDG与NCG及SCG比较,大鼠胃窦内的CD4、CD8和IL-2阳性细胞的免疫染色强度无明显变化,平均灰度值差异无统计学意义(P>0.05).结论:在海洛因戒断、复吸期间,CD4、IL-2在胃窦表达减弱,CD8表达增强,提示海洛因戒断、复吸对大鼠胃黏膜免疫功能造成损伤;MDG大鼠胃窦CD4、CD8和IL-2的表达与正常组差异无显著性,提示脱毒治疗后胃窦功能逐步趋于正常.

胃泌素、5-羟色胺和生长抑素在急性酒精中毒大鼠胃窦的表达

目的:探讨急性酒精中毒对大鼠胃窦部胃泌素(Gas)、5-羟色胺(5-HT)和生长抑素(SS)免疫反应阳性细胞的影响。方法:正常雄性SD大鼠,随机分为正常组和实验组,实验组大鼠用白酒灌胃,在灌胃后不同时间段取胃窦组织,用免疫组织化学SABC法及图像分析法分析Gas、5-HT和SS阳性细胞的表达。结果:(1)与正常组比较,酒精中毒大鼠胃窦部Gas、5-HT阳性细胞数增多(P<0.05),以1 h组最为明显;SS阳性细胞数减少(P<0.05),以2 h组最为显著;(2)急性酒精中毒大鼠胃窦部Gas、5-HT阳性细胞灰度值均低于正常组(P<0.05),以1 h组最深;SS阳性细胞灰度值高于正常组(P<0.05),以2 h最明显。结论:在急性酒精中毒期间,Gas、5-HT在胃窦部表达增多,而SS分泌减少,提示这几种胃肠激素参与了酒精对胃黏膜的损伤过程。

海洛因依赖期间大鼠胃窦5-羟色胺免疫反应细胞形态和功能变化

目的:探讨胃窦5-羟色胺(5-HT)免疫反应细胞在海洛因依赖期间的作用。方法:应用免疫组织化学SABC法及图像分析方法研究海洛因依赖期间大鼠胃窦5-HT-IR细胞平均灰度值和细胞计数的变化。结果:与正常组及盐水组比较,海洛因依赖组大鼠胃窦5-HT-IR细胞数量显著增加(P<0.01),细胞的平均灰度值较正常和盐水对照组显著降低,在第24天时变化最为明显(P<0.01)。结论:大鼠胃窦5-HT-IR细胞通过增加细胞数和增强5-HT的分泌,参与了机体在海洛因依赖期的调节过程。

海洛因依赖对大鼠胃窦生长抑素和白细胞介素2阳性细胞表达的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠胃窦生长抑素(SS)、白细胞介素2(IL-2)阳性细胞表达的影响。方法:应用免疫组织化学SABC法及图像分析技术。结果:海洛因依赖组大鼠胃窦SS阳性细胞染色强度增强,细胞数量显著高于空白和盐水对照组,平均灰度值低于正常及盐水对照组;IL-2阳性细胞的数量及染色强度显著降低,平均灰度值升高。结论:大鼠胃窦中SS、IL-2阳性细胞通过形态数量及细胞内的SS、IL-2的含量改变参与了在海洛因依赖期间机体的调节过程。

生长抑素和胰岛淀粉样多肽在生后发育期家兔胃窦黏膜的定位和表达

目的:观察家兔生后发育期间生长抑素(SS)和胰岛淀粉样多肽(IAPP)在胃窦黏膜中的定位和表达,探讨其与机体消化功能的关系。方法:生后5、15、25、35、60和90d家兔各10只,处死后取胃窦组织,常规石蜡包埋,制成连续切片,用免疫组织化学SABC法和图像分析法对SS、IAPP免疫反应阳性细胞的定位和表达进行分析。结果:不同发育阶段兔胃窦黏膜内均有SS和IAPP的表达。阳性产物呈棕黄色,位于细胞质内。家兔生后5和15d,SS阳性细胞分散存在于黏膜上皮内,染色较浅,35d开始逐渐增多,于60d时数量最多(P<0.05),90d时减少至35d水平;细胞平均灰度值于35d时降低,60d时达到最低(P<0.05)。IAPP阳性细胞多数定位于胃窦黏膜结缔组织中,家兔从生后5d开始IAPP阳性细胞数量逐渐增多,尤以60d增多明显(P<0.05);其平均灰度值于35d之后降低,低于5、15和25d组(P<0.05)。结论:SS和IAPP在家兔胃窦黏膜中的表达随生长发育而发生变化,二者可能以内分泌、旁分泌的方式参与生后机体的消化活动,并在胃黏膜的生长修复和自我保护中发挥重要作用。

人体胚胎学教学方法的改进与实践

目的:探索多种教学手段相结合的教学方法在人体胚胎学教学中的作用。方法:选取本院2009级临床专业115名学生,随机分为实验组和对照组,分别采用多种教学手段相结合的方法和传统教学方法进行教学,通过问卷调查和随堂小测的方式评价教学效果,并对结果进行统计分析。结果:实验组对教学方法的评价以及课堂成绩均明显优于对照组(P<0.05)。结论:在人体胚胎学教学中进行多教学手段结合的方式授课教学效果良好,值得进一步研究和推广。

不同时程海洛因依赖大鼠胃窦CD4、CD8和IL-2表达

目的:探讨海洛因依赖期间大鼠胃窦内CD4、CD8及白细胞介素-2(IL-2)的表达。方法:正常成年SD大鼠,随机分为正常对照组(NCG)、盐水对照组(SCG组)和不同时程海洛因依赖组(HDG组);采用免疫组织化学SABC法及图像分析法,观察SCG组和HDG组造模第10、17、24、31及38天时大鼠胃窦黏膜CD4、CD8和IL-2表达。结果:与NCG组及SCG组比较,HDG组大鼠胃窦CD4、IL-2阳性细胞数量减少,染色变浅,图像分析的细胞计数和平均灰度值差异也有统计学意义(P<0.05);HDG组大鼠胃窦CD8阳性细胞较NCG及SCG组细胞数量增多,染色变深,在海洛因依赖第24天变化最为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在海洛因依赖期间,CD4、IL-2在胃窦表达减弱,CD8表达增强,提示海洛因依赖对大鼠胃黏膜免疫功能造成损伤。

葛根素对慢性酒精中毒小鼠结肠组织Cajal间质细胞和C-kit蛋白表达的影响

目的:通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化,探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作用。方法:选取健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和葛根素预处理组,每组8只。慢性酒精中毒组和葛根素预处理组小鼠建立慢性酒精中毒动物模型。通过测量印度墨汁推进长度测定肠道传输速率,应用免疫荧光和透射电镜技术检测ICC分布、数量以及超微结构的改变,采用Western blotting方法分析C-kit蛋白的表达。结果:葛根素预处理组肠道传输速率较慢性酒精中毒组明显增加(P<0.05),但仍低于盐水对照组(P<0.05);葛根素预处理组结肠内ICC的数量较慢性酒精中毒组增多(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与盐水对照组比较,慢性酒精中毒组小鼠结肠ICC的超微结构发生明显改变,线粒体等细胞器明显减少,葛根素预处理组小鼠结肠ICC的超微结构基本恢复正常,线粒体等细胞器明显增加;葛根素预处理组小鼠结肠组织中C-kit蛋白表达水平明显高于慢性酒精中毒组(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根素干预对酒精造成的Cajal间质细胞数量、超微结构及C-kit表达的改变有一定的修复或逆转作用。

家兔发育期5-羟色胺及嗜铬粒素A在胃窦黏膜中的表达

目的:观察家兔生后发育期间5-羟色胺(5-HT)和嗜铬粒素A(CgA)在胃窦黏膜中的分布、形态和数量变化。方法:生后5、15、25、35、60及90 d家兔各10只,处死后取胃窦组织,用免疫组织化学SABC法和图像分析法观察5-HT、CgA免疫反应细胞的定位和表达。结果:不同发育阶段胃窦黏膜内均有5-HT和CgA的表达,阳性产物位于细胞胞质内;生后5 d和15 d时5-HT阳性细胞分散存在于黏膜上皮内,染色较浅,35 d开始逐渐增多,60 d时数量最多(P<0.05),90 d时减少至35 d水平,细胞平均灰度值于35 d时降低,60 d时达到最低(P<0.05);CgA阳性细胞从生后5 d开始数量逐渐增多,尤以90 d增多明显(P<0.05),平均灰度值于90 d时最低(P<0.05)。结论:家兔生后发育期间胃窦5-HT、CgA阳性细胞的分布和数量变化有一定的规律性,提示其所释放的激素可能参与家兔胃窦的发育和某些生理活动。

胰多肽和嗜铬粒素A在海洛因期间大鼠胃窦的表达

目的探讨海洛因对大鼠胃窦胰多肽（PP）、嗜铬粒素A（CgA）阳性细胞表达的影响,以及PP和CgA在海洛因依赖时的可能作用。方法成年SD大鼠66只,体质量180~220 g,由贵阳医学院实验动物中心提供。按配对原则随机分为正常对照组（n=6）、盐水对照组（n=30）和海洛因依赖组（n=30）,处死取胃窦组织,制成连续石蜡切片,采用免疫组织化学SABC法及图像分析技术观察PP和CgA在大鼠胃窦中的表达。结果海洛因依赖组胃窦PP阳性细胞免疫染色强度增强,细胞数量显著高于正常对照组和盐水对照组,平均灰度值低于正常对照组及盐水对照组;CgA阳性细胞的数量及免疫染色强度显著降低,平均灰度值升高,且在第31天时变化最为明显。结论大鼠胃窦PP和CgA的表达受海洛因的影响发生改变,提示这两种细胞通过合成和分泌的变化,参与了海洛因依赖期间肠道功能紊乱的调节过程。

某食用白酒对大鼠脑垂体ACTH阳性细胞表达及超微结构的影响

目的:研究某品牌食用白酒对大鼠脑垂体ACTH阳性细胞的表达及其超微结构的影响。方法:正常成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组及实验组,其中实验组分为4周组(4 w)、8周组(8 w)及12周组(12w)3个时间点,每个时间点又分为低剂量组[L组,0.8 m L/(kg·day)]、中剂量组[M组,1.6 m L/(kg·day)]及高剂量组[H组,2.4 m L/(kg·day)];各时间段实验大鼠均有5只作正常对照,实验组大鼠予相应食用白酒灌胃,每日11∶00 am及5∶00 pm各灌胃1次;正常对照组不予处理,分别于第4 w末、第8 w末,第12 w末取脑垂体组织;采用免疫组化SABC法、透射电镜技术、图像分析及形态计量法观察大鼠的脑垂体组织学改变、ACTH阳性细胞表达及平均光密度值。结果:与正常组比较,除4 w时H组ACTH阳性细胞表达有所升高之外,其余各组各时间点与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);透射电镜观察结果也表明,除4 w时H组大鼠ACTH阳性细胞超微结构稍有改变外,其余各组结构正常。结论:在本实验设定的剂量和时程内用某食用白酒灌胃,对大鼠垂体ACTH阳性细胞的表达和超微结构无明显影响。

海洛因戒断与复吸对大鼠结肠5-羟色胺和P物质表达的影响

目的探讨海洛因戒断、脱毒和复吸期间5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)在大鼠结肠表达的变化。方法将正常雄性SD大鼠35只,随机分为实验组15只、盐水对照组15只和正常对照组5只,实验组大鼠又分戒断组(HWG)、脱毒治疗组(MDG)和复吸组(HRG)。取正常对照组、盐水对照组及实验组大鼠的结肠组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果戒断组和复吸组大鼠结肠内的5-HT-、SP-免疫反应(IR)细胞的平均灰度值低于正常及盐水对照组,免疫反应细胞计数增多,差异有统计学意义(P<0.05)。脱毒治疗组与正常及盐水对照组比较,大鼠结肠内的5-HT-、SP-IR细胞的平均灰度值及细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在海洛因戒断、复吸期间,结肠分泌5-HT、SP增多;美沙酮脱毒治疗后,5-HT、SP的表达与正常组差异无显著性,提示结肠分泌的5-HT、SP参与了海洛因戒断、脱毒和复吸期间机体的调节。

胰岛淀粉样多肽、葡萄糖转运蛋白2在海洛因戒断、脱毒和复吸大鼠胰岛β细胞中的表达

目的探讨在大鼠海洛因戒断、脱毒治疗和复吸期间,胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在胰岛β细胞内表达的变化。方法正常雄性SD大鼠32只,随机分为实验组(n=24)和正常对照组(n=8),实验组又分为海洛因依赖戒断组、美沙酮脱毒治疗组和海洛因复吸组。各组大鼠取胰腺组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果海洛因戒断时IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色较正常对照组变深,平均灰度值均低于正常组(P<0.05),IAPP面数密度增大(P<0.05);美沙酮脱毒期间,IAPP和GLUT2免疫阳性细胞染色变浅,平均灰度值较戒断时升高,与正常组差异无统计学意义,IAPP面数密度于正常组比较无明显差异(P>0.05);海洛因复吸期间,IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色又加深,平均灰度值降低(P<0.05),IAPP面数密度再次增大(P<0.05)。结论在海洛因戒断和复吸期间,表达于大鼠胰岛β细胞的IAPP和GLUT2合成增加,美沙酮脱毒期间合成减少,两者变化规律一致,提示在海洛因戒断,脱毒和复吸过程中,两者的合成同步,可能参与调节海洛因戒断,美沙酮脱毒治疗及复吸大鼠机体能量代谢过程,与调节大鼠摄食、体重及保护胰岛细胞功能有关。

海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区、伏隔核神经元P物质和神经肽Y表达的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)神经元P物质(SP)、神经肽Y(NPY)表达的影响,为进一步揭示海洛因依赖的中枢机制提供重要的原位形态学资料。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为海洛因依赖组、生理盐水对照组及正常对照组。建立海洛因依赖模型,并分别于第10、17、24、31、38天取脑组织,免疫组织化学SABC法显示VTA、NAc区神经元SP、NPY免疫反应细胞并用图像分析法测定平均灰度值。结果海洛因依赖组VTA、NAc区的SP、NPY免疫反应细胞与生理盐水及正常对照组比较,免疫反应强度明显减弱、染色变浅。平均灰度值测定,海洛因依赖组各时间点大鼠VTA、NAc区的SP、NPY免疫反应细胞平均灰度值均高于正常对照组及生理盐水对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验结果提示,海洛因依赖使VTA、NAc区SP、NPY的分泌受到抑制,可能导致内源性阿片肽的分泌受影响,SP、NPY可能是药物依赖形成机制中的关键信号分子。

5-HT、SP在海洛因戒断、脱毒、复吸大鼠直肠组织中的表达

目的:探讨海洛因戒断、脱毒及复吸期间大鼠直肠内5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)表达的改变.方法:正常♂SD大鼠,随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组,实验组分别建立海洛因依赖戒断模型,美沙酮脱毒治疗模型和海洛因复吸模型.取各组大鼠直肠组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究.结果:与正常对照组及盐水对照组比较,实验组大鼠直肠内的5-HT、SP细胞免疫染色加深;图像分析5-HT、SP阳性细胞的细胞计数增多(5-HT:10d:5.09±3.39vs3.16±2.05,2.80±2.13;24d:5.05±3.04vs3.16±2.05,2.81±1.85;SP:10d:2.55±1.35vs1.29±0.86,1.37±0.93;24d:2.57±1.27vs1.29±0.86,1.39±0.79,均P<0.05),平均灰度值低于正常及盐水对照组(F=36.642,4.583,P<0.05).实验组与正常及盐水对照组比较,5-HT、SP阳性细胞免疫染色、细胞计数及平均灰度值变化差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:5-HT、SP在大鼠直肠黏膜表达的改变,提示二者参与海洛因戒断、脱毒和复吸期间消化系功能恢复的调节过程.

胰岛淀粉样多肽和P物质在不同发育阶段家兔直肠的表达及分布特点

目的观察不同发育阶段家兔直肠内胰岛淀粉样多肽(islet amyloid polypeptide,IAPP)、P物质(substance P,SP)的表达及分布特点。方法收集生后5、15、25、35、60 d及90 d家兔各10只。取直肠组织入Bouin液固定,梯度酒精脱水,常规石蜡包埋,制成连续切片。用免疫组织化学SABC法和图像分析法对IAPP、SP免疫反应阳性细胞的定位和表达进行观察。结果生后5 d家兔直肠内可见少量散在分布IAPP阳性细胞,多位于上皮;35 d IAPP阳性细胞的数量呈明显上升趋势,至60 d达到最多(P<0.05),90 d时减少(P<0.05),主要分布于固有层。图像分析测得IAPP阳性细胞的平均灰度值随家兔的生长发育逐渐降低,60 d达最低(P<0.05)。SP阳性细胞于生后15 d始出现,35 d后细胞数量明显增多(P<0.05),60 d达最高(P<0.05)。其平均灰度值也于35 d开始下降(P<0.05),于60 d达最低水平(P<0.05)。结论 IAPP、SP在直肠的表达随家兔的生长发育而逐渐变化,推测两者参与调节生后发育期间家兔直肠消化功能的成熟过程。

大鼠海洛因戒断、脱毒和复吸对胰岛B细胞及血糖浓度的影响

目的：探讨在大鼠海洛因戒断、脱毒治疗和复吸期间，胰岛B细胞发生的形态和功能变化以及血中葡萄糖浓度的改变。方法：正常雄性SD大鼠，随机分为正常对照组和实验组，实验组分别建立海洛因依赖戒断模型、美沙酮脱毒治疗模型和海洛因复吸模型。免疫组织化学显色、图像分析观察胰岛B细胞在戒断、脱毒和复吸期间的形态改变；放射免疫检测血清胰岛素水平的变化。血糖仪测各组空腹血糖水平的变化。结果：光镜下，戒断、脱毒和复吸期间胰岛B细胞免疫反应显色均变浅。放射免疫检测血中胰岛素水平在戒断期间尚未发生改变，但脱毒组与复吸组胰岛素浓度均低于正常组，复吸组较脱毒组浓度又稍有升高；戒断组血糖水平较正常对照组升高，脱毒组和复吸组均无明显变化。结论：海洛因戒断、脱毒和复吸期间，胰岛素水平先减少后增多；戒断时血糖升高，脱毒和复吸时恢复正常。表明胰岛B细胞通过改变合成和分泌胰岛素维持机体血糖内稳态。