不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法。方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析。结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得DNA产量和质量均高于试剂盒法。结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法。

新疆地区甲状腺癌组织中ESR1基因表达及其临床意义的探讨

目的:研究雌激素受体(estrogen receptor alpha,ESR1)在新疆地区甲状腺癌组织中的表达,探讨其在临床中的意义。方法:用免疫组织化学SP法检测64例甲状腺癌、21例甲状腺良性腺瘤、13例桥本氏甲状腺炎、6例结节性甲状腺肿和6例癌旁正常组织中ESR1基因表达,结合临床病理因素进行分析。结果:ESR1在甲状腺癌组织中的阳性表达显著高于甲状腺腺瘤、桥本氏甲状腺炎、结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P<0.01);甲状腺癌组织学类型、临床分期、淋巴结转移及预后与ESR1蛋白表达相关(P均<0.05)。结论:ESR1可能在甲状腺癌的发生、发展过程中起到了重要作用,故阻断其作用环节可能为治疗甲状腺癌提供新策略。

新疆哈萨克族人β_2-肾上腺素受体基因G(-1023)A多态性与高血压的关联分析

目的探讨新疆哈萨克族人β2-肾上腺素受体(β2-AR)基因G(-1023)A多态性与原发性高血压的关系。方法用直接测序法对β2-AR基因进行测序,寻找和验证单核苷酸多态性(SNP)在哈萨克族高血压群体中的存在;应用多聚酶链反应、限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)对新疆哈萨克族人β2-AR基因编码区起始点上游1023(-1023)位点进行基因分型。结果(1)在β2-AR基因调控区-1023位点存在一高频SNP;(2)β2-AR基因-1023位点多态基因型频率在该群体中分布符合Hardy-Weinberg平衡;(3)该位点各基因型频率和等位基因频率在哈萨克族高血压组和正常对照组的分布差异均有统计学意义(P<0.05)。结论β2-AR基因-1023位点多态性可能与新疆哈萨克族人高血压相关。

一种从石蜡包埋组织中获取高质量基因组DNA的改良方法

目的:比较现有的DNA制备方法,建立一种从甲醛固定石蜡包埋组织(formalin-fixed paraf-fin-embedded tissues,FFPET)提取高质量基因组DNA的方法。方法:将传统基因组DNA提取方法与市场供应的DNA亲和层析柱结合在一起,以水浴脱腊法替代二甲苯脱腊法,设计一种改良的基因组DNA快速提取方法,从石蜡包埋宫颈癌组织标本提取基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳法和聚合酶链式反应法进行鉴定。结果:改良的基因组DNA提取法整合了水浴脱蜡与DNA亲和层析柱的优点,从石蜡包埋宫颈癌组织中获得了高质量的基因组DNA,特别是能以很高的效率回收大于20 kb的基因组DNA大片段。结论:改良的基因组DNA提取方法简单快捷,是一种从石蜡包埋组织中回收高质量基因组DNA的有效途径。

116例维、汉甲状腺疾病临床病理分析

目的:探讨新疆维、汉两民族中甲状腺疾病的发病趋势。方法:回顾性分析新疆医科大学第一附属医院2005年1月～2007年4月来收集的116例维、汉甲状腺疾病患者的临床病理资料。结果:汉族74例(63.82%),维吾尔族42例(36.18%)。患者女性发病率为男性3.3倍。女性50岁以下发病率为92.13%,而男性为33.33%。男性发病年龄高峰为60～69岁,女性为30～59岁。79例(68.10%)为良性肿瘤及肿瘤样病变,37例(31.90%)为甲状腺癌。良性肿瘤及肿瘤样病变中结节性甲状腺肿49例(62.02%),腺瘤23例(29.11%),桥本甲状腺炎5例(6.33%),亚急性甲状腺炎和乳头状增生各1例(1.27%)。甲状腺癌各分型病理学分析发现乳头状腺癌26例(70.27%),其次滤泡癌7例(18.92%),未分化和癌髓样癌各2例(5.41%)。女性发病率及发病年龄早于男性,女性患者主要是中青年。组织学类型以甲状腺肿的比例最高,其次为甲状腺癌,腺瘤的发病率较低,甲状腺炎最少。乳头状癌占甲状腺癌的比例大。维、汉两个民族甲状腺癌的发病率无显著性差异(P>0.05)。结论:提示新疆维、汉甲状腺疾病的发病率有上升趋势。

留学生医学细胞生物学全英文教学探索

新疆医科大学从1992年首次招收留学生,2001年开展规模化留学生教育。目前留学生已遍及巴基斯坦、印度、阿富汗、沙特阿拉伯、独联体、科尼亚、韩国、英国和美国等26个国家,学历层次涵盖本科、硕士、博士,形成了比较完善的对外医学教育体系。生物学教研室从2001年起承担了医学细胞生物学理论和实验教学工作,授课学时达1000多学时。教学质量好,深受广大留学生的喜爱。同时教研室把留学生教育列为教改课题来进行研究。回顾12年来的英语教学经历,深深体会到留学生医学细胞生物学英语教学中有4个重要内容必须足够重视,即教材编写、教学环节的完善、教学方式改革及教师自身提高。

新疆地区199例甲状腺癌临床病理分析

目的:探讨新疆地区人群中甲状腺癌发病状况及病理学特征。方法:对1997年至2006年期间新疆医科大学第一附属医院收治的199例甲状腺癌患者病理学特征进行分析。结果:2004年-2006年新疆地区人群甲状腺癌的年均收治患者人数比以前6年高30%以上;女性患者人数比男性高约2.3倍,不同民族之间无显著差异;50岁以下女性患者为52.56%,男性为37.07%;汉族患者占129例(64.82%),维吾尔族患者47例(23.62%),其他少数民族23例(11.56%);根据甲状腺肿瘤的组织病理学分型情况,乳头状腺癌居首位,136例(68.34%),其类型依次为滤泡癌47例(23.62%),髓样癌11例(5.53%),未分化癌5例(2.51%);参加手术和放/化疗治疗的患者为150例(75.38%),癌症转移并直接进行放/化疗患者28例(14.07%)。结论:过去10年当中我院收治甲状腺癌患者逐年增多,说明新疆地区人群中甲状腺癌的发病率呈逐年上升趋势。其中乳头状癌居首位;女性甲状腺癌的高发年龄分布30岁-50岁,男性人群高发年龄在60岁-69岁,维、汉两族人群甲状腺癌的男女发病比例有明显差异;但甲状腺癌的亚类在维、汉两民族之间无显著性差异。

新疆地区卵巢早衰相关因素分析

目的调查了解新疆地区卵巢早衰(POF)发病的相关影响因素,从而为其预防提供依据。方法对70例POF患者及70例正常妇女进行调查问卷,了解其详细的基本情况、生活社会环境及精神心理情绪状态,并对相关因素进行分析。结果盆腔手术史(OR=4.244、P=0.001)、精神创伤(OR=3.115、P=0.019)、腮腺炎(OR=14.276、P=0.012)、抑郁情绪(OR=2.400、P=0.012)、经常感到压力史(OR=3.692、P=0.001)、经常熬夜(OR=2.944、P=0.003)、接触有害物质(OR=3.414、P=0.042)为POF的危险因素,经常锻炼(OR=0.419、P=0.012)为其保护因素。结论尽早治疗月经紊乱、科学健康的生活习惯、良好的精神心理状态、减少有毒物质的接触、坚持锻炼是有效预防卵巢功能过早衰退的基本保障。

医学细胞生物学在民汉合班班级教学中的初步探索

医学细胞生物学是我国医学教育的一门重要基础课程,新疆医科大学(以下简称"我校")多个医学专业均开设了本课程,在教学中本课程存在教学内容多、学时少、学生难理解的现象,尤其是在新疆民汉合班教学中,更是出现了一些急需解决的问题。正视这些困难并积极寻求解决之道,对于提升民汉合班班级的基础专业课程教学水平,提高学生的语言交往能力及专业知识技能具有重要意义。

制作并使用多媒体教学课件现存的问题与对策思考

为适应高校医学教育新的发展形式,深化教学改革,提高教学质量,教师应从本学科的角度来研究如何制作并合理使用多媒体课件。通过巧妙运用CAI课件来帮助教学,提高教学质量。本文分析制作并使用多媒体课件时存在的问题,并提出解决这些问题的对策思考,让多媒体辅助教学真正在课堂教学中发挥其特有的功能。

500例遗传咨询病人的外周血淋巴细胞核型分析

目的:对染色体异常患者进行核型分析 ,为人类染色体病的研究和临床提供诊断依据。 方法 :对 5 0 0例病人采用了常规人类外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本并进行 G显带核型分析。 结果 :检出异常核型 12 3例 ,占受检病例的 2 4 .6 %。其中智力低下 70例 (5 6 .9% ) ,流产 2 7例 (2 1.9% ) ,性腺发育不全 2 1例 (17.1% ) ,不良生育史 5例 (4.1% )。 结论 :染色体异常患者中智力低下和流产严重危害我区人口素质 。

Gq/11蛋白在ARDS时大鼠肺损伤中的动态变化

目的研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时大鼠肺Gq/11蛋白的动态变化。方法采用尾静脉注射油酸法复制大鼠ARDS模型,并将其分为对照组(C组)和油酸组(OA组),又根据不同时限将其分为30min、60min、90min和120min4个亚组;紫外法测定血管紧张肽转化酶(ACE)活性,免疫印迹法检测各组大鼠肺组织中的Gq/11蛋白含量。结果OA各组随时间延长Gq/11蛋白含量较C组分别高(19.24±2.38)%、(35.12±2.01)%、(43.93±1.62)%、(48.63±1.88)%(P<0.01),OA组除了30min组其它各组血浆及肺组织的ACE活性显著低于C组,并随着时间延长而更低(P<0.01)。结论Gq/11蛋白的表达上调在ARDS肺损伤中可能占有一定地位,并参与ARDS的发生发展。

基于核磁共振的甲状腺乳头状癌患者血浆的代谢组学研究

目的通过核磁共振代谢组学方法进行甲状腺乳头状癌患者与健康对照者血浆代谢组研究,并探讨甲状腺乳头状癌组代谢组学上的变化及意义。方法收集健康对照组(n=29)和甲状腺乳头状癌组(n=31)血浆样品,进行核磁共振氢谱(1 H-NMR)检测。通过最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法得到两组血浆的差异性代谢物,并探讨相关生化过程的改变。结果两组血浆代谢物有明显的差异,与健康对照组相比,甲状腺乳头状癌组血浆中的极低密度脂蛋白、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、低密度脂蛋白、乳酸、丙氨酸、糖蛋白、谷氨酰胺、肉碱、α-酮戊二酸、肌酸、甘氨酸、不饱和脂类、酪氨酸、甲基组氨酸、苯丙氨酸的含量降低,丙酮酸、柠檬酸、肌酸酐、胆碱、鲨肌醇、β-葡萄糖、肌醇、α-葡萄糖和甲酸的含量增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论根据血浆代谢物的差异可以分辨健康对照组与甲状腺乳头状癌组血浆中的差异性代谢物。这种基于核磁共振氢谱技术的代谢组学方法可为甲状腺乳头状癌的诊断提供可靠代谢依据。

如何实现医学院校医学遗传学教学的形成性评价

高等医学教育教学评价模式的改革是大势所趋。形成性评价的应用在激发学生的创新力和培养实践能力方面发挥着重要的作用。有效结合目前高等医学院校现状,积极探索和完善形成性评价机制,体现先进的教学思想和教师的教学经验利于学生综合素质的提高,推进素质教育进程。该文阐述实现医学院校医学遗传学教学形成性评价的几个具体实施方案。

慢性应激对卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH及β- EP水平的影响

目的:通过检测慢性应激致卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP水平及观察卵巢组织形态以及激素水平的变化,探讨中药木尼孜其合剂对卵巢早衰的作用。方法:选用90只性成熟Wistar雌鼠,随机选取10只设为正常组(C组),其余80只为应激模型组,模型建成之后从中筛选出成卵巢早衰者分为POF模型组(POF组)及POF药物干预高、中、低剂量组,用ELISA试剂盒检测大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP激素水平及观察卵巢组织形态变化。结果:木尼孜其合剂对慢性应激致卵巢早衰大鼠卵巢组织形态有一定的改善作用。与正常对照组比较模型对照组的E_2、β-EP激素水平明显降低(P<0.05), LH、FSH的水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,各药物干预药组上述指标均有不同程度的改变(P<0.05)。结论:慢性应激(湿、寒、光照)能够导致POF的发生,中药木尼孜其合剂有防治卵巢早衰的作用,其作用机制与能够改变血清中E2、β-EP、LH及FSH等激素水平有关。

维吾尔族妇女宫颈癌早期与中晚期患者血浆蛋白质组的二维液相色谱比较分析

目的运用蛋白质二维液相色谱技术,分析维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者血浆低丰度蛋白质组谱特征,寻找肿瘤临床早期和中晚期之间的血浆蛋白组差异。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者血浆标本共46例,其中临床分期为Ⅰ-Ⅱa的早期患者26例,Ⅱb-Ⅳ的中晚期患者20例;利用高丰度蛋白去除方法,制备血浆低丰度蛋白质组样品,经蛋白质二维液相色谱系统分析,研究不同宫颈癌临床分期患者血浆蛋白质组差异。结果建立了早期和中晚期宫颈鳞癌患者的蛋白质组差异图谱;以2倍以上的血浆蛋白质含量变化作为蛋白质峰组分的定量差异标准,并将宫颈癌早期患者设为对照,综合分析二组的有效蛋白组分,发现中晚期肿瘤患者血浆中5个低丰度蛋白组分含量明显上升,而10个组分下降。结论维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者不同临床分期之间存在血浆低丰度蛋白质组差异,为进一步鉴定肿瘤演进过程特异的血浆标志蛋白提供了客观依据。

慢性应激致卵巢早衰大鼠C3与CYP51蛋白表达水平比较

目的:制作慢性应激致卵巢早衰大鼠模型并用中药木尼孜其合剂进行药物干预,检测各组大鼠C3与CYP51蛋白表达,为治疗慢性应激型致POF提供依据。方法:选用90只性成熟Wistar雌鼠,随机选取10只设为正常组,其余80只为慢性应激模型组,模型建成之后从中筛选出成卵巢早衰者分为POF模型组(POF组)及POF药物干预高、中、低剂量组。用免疫组织化学技术检测卵巢中C3与CYP51蛋白表达。结果:C3蛋白主要表达在颗粒层细胞及卵泡液中,POF组大鼠较C组表达显著升高(P<0. 05),各药物干预组在不同程度上能够降低其表达; CYP51蛋白在各组主要表达在间质以及黄体中,POF组大鼠较C组表达显著下降(P<0. 05),各药物干预组在不同程度上能够降升高其表达。结论:慢性应激能够导致POF的发生;POF模型卵巢结构及形态的变化及炎性反应的出现可能是促进POF的重要因素之一;中药木尼孜其合剂可能通过下调C3蛋白、上调CYP51蛋白从而改善慢性应激型卵巢早衰大鼠的卵巢功能。

甲状腺乳头状癌与基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)基因启动子甲基化的关系研究

目的研究基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)基因启动子甲基化水平与甲状腺乳头状癌发生的内在联系,建立基于启动子高甲基化抑癌基因的甲状腺乳头状癌早期诊断方法。方法收集甲状腺手术切除的组织标本共46例,其中甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)29例,结节性甲状腺肿(nodular goiter)17例。经提取DNA,设计并合成BSP引物,PCR扩增,采用亚硫酸氢盐法克隆测序(bisulfite sequencing)和Sequenom Mass ARRAY甲基化DNA定量分析法检测甲状腺乳头状癌组织TIMP3基因启动子CpG片段的甲基化水平。结果亚硫酸盐修饰测序结果显示TIMP3基因在甲状腺乳头状癌组织中的高甲基化克隆百分比为70%,显著高于结节性甲状腺肿的0%(P<0.05)。TIMP3基因启动子区5个CpG位点在甲状腺乳头状癌组织中的甲基化有呈较高的甲状腺乳头状癌特异性。Sequenom Mass ARRAY提供的单一CpG位点甲基化定量数据显示TIMP3基因在甲状腺乳头状癌组织的甲基化率均值(0.28)高于结节性甲状腺肿的甲基化率均值(0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。TIMP3基因启动子3个CpG位点在甲状腺乳头状癌组织中的甲基化率均值高于结节性甲状腺肿甲基化率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TIMP3基因CpG-16及CpG-17位点可能为甲状腺乳头状癌的启动子甲基化检测的关键位点,有望成为甲状腺癌早期诊断的分子标志物。

不同复合应激致卵巢早衰大鼠的SRB1、CYP2E1蛋白表达水平比较

目的比较卵巢早衰(POF)及中医寒邪、热邪复合应激大鼠的SRB1、CYP2E1蛋白表达水平,探讨其相互关系,为研究POF的发生、发展提供依据。方法选用50只性功能正常的雌性Wistar大鼠,随机分为POF组(A组)、热邪复合应激模型组(B组)、寒邪复合应激模型组(C组),以及2个正常对照组(N1组、N2组)。采用免疫组织化学法检测各组大鼠卵巢组织中SRB1、CYP2E1蛋白的表达水平。结果通过各组大鼠生物学表征的定性和定量指标,以及相关中医专家的断定确认模型复制成功。与N1组相比,A组和B组SRB1、CYP2E1表达升高(P<0.05)。与N2组相比,C组SRB1、CYP2E1表达升高(P<0.05)。A组与B、C组的SRB1、CYP2E1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),B组与C组的SRB1、CYP2E1表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论西医POF、热邪和寒邪复合应激大鼠的SRB1、CYP2E1表达水平有不同程度的变化。寒邪、热邪导致的POF可能与体内胆固醇代谢异常及活性氧等物质的产生有一定联系。与寒邪复合应激相比,热邪复合应激大鼠更易发生POF。