艾纳香总黄酮提取工艺优化及其含量测定方法研究

目的：建立测定艾纳香中总黄酮含量的方法;考察艾纳香总黄酮提取工艺;比较艾纳香中不同部位总黄酮含量。方法：分别将样品、二氢槲皮素、槲皮素、芦丁、柚皮苷通过不同方法显色后在200～800 nm波长范围内扫描,对比扫描图选择适宜的对照品及显色方法;运用单因素及正交实验考察艾纳香总黄酮提取工艺;将艾纳香侧枝分为上部叶、中部叶、下部叶、上部茎、中部茎、下部茎6个部分,比较不同部位总黄酮含量。结果：以二氢槲皮素为对照品,经亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色后,在494 nm处检测,在0.0054～0.0324 mg/m L（r=0.9999）范围内线性关系良好;艾纳香总黄酮最佳提取工艺为：提取溶剂50%乙醇,提取温度60℃,料液比1∶300,超声功率400 W,提取时间60 min,提取1次;艾纳香的叶比茎总黄酮含量高,最高为73.7 mg/g,且上部叶〉中部叶〉下部叶〉中部茎〉上部茎〉下部茎。结论：该研究中总黄酮含量测定方法准确、提取方法简便,可用于艾纳香总黄酮的提取及含量测定;测定艾纳香不同部位总黄酮含量,为艾纳香资源开发与综合利用提供了科学依据。

四倍体艾纳香植株诱导及其倍性鉴定

在离体条件下,应用秋水仙素浸泡法和混合培养法,对艾纳香组培苗进行了不同浓度和时间的诱变处理,并通过植物形态学、细胞学、细胞中DNA含量等鉴定其倍性。结果表明,与浸泡法相比,混合培养法更适合四倍体艾纳香诱导,其中以0.025%秋水仙素处理9 d诱导效果最佳,诱变率高达65%。与二倍体植株相比,四倍体艾纳香植株形态特征变化明显,表现植株的枝条变粗壮,叶片变厚、颜色变深。四倍体叶片的气孔及其保卫细胞明显增大,并且其细胞中DNA含量是二倍体的两倍,表明四倍体艾纳香植株诱导成功。