日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1/Th2细胞因子水平的动态变化

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化 ,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法 采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变 ,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后 0、4、6、8和 12周血清及脾淋巴细胞IL 2、IFNγ 和IL 4水平的动态变化。结果 小鼠感染后 6周出现明显肝肉芽肿病变 ,8周肉芽肿反应达高峰 ;12周则明显缩小 ;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL 2和IFNγ 在感染后 4～ 6周开始上升 ,8周达高峰 ,随后下降 ;而Th2细胞因子IL 4在感染后 8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论 Th1细胞因子IL 2和IFNγ 与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关 ,而Th2细胞因子IL 4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。

日本血吸虫感染可诱导共刺激分子(ICOS)转基因小鼠的免疫应答及其病理反应

目的观察ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后的免疫应答及其免疫病理反应。方法收集ICOS转基因小鼠及对照组野生型小鼠分别感染30条日本血吸虫尾蚴后4～8周的血清及脾淋巴细胞培养上清,用ELISA双抗体夹心法检测血清抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平和培养上清中的Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ),Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平。取小鼠感染后6、8周肝脏,常规石蜡连续切片,HE染色,在光镜观察单个虫卵肉芽肿病变。结果转基因小鼠IFN-γ的表达水平无显著变化,而6、8周时转基因小鼠的IL-4水平呈显著上调表达,分别为(20.8±1.6)pg/ml和(25.3±3.4)pg/ml(P<0.01)。转基因小鼠血清IgG、IgG1表达水平也均高于对照组。在转基因小鼠,反映Th1/Th2免疫平衡的Th2分化指数和IgG1/IgG2a比值也明显呈Th2优势应答,分别为2.20±0.68和5.59±0.31。感染6、8周转基因小鼠肝虫卵肉芽肿反应比对照组更为显著。转基因小鼠肝虫卵肉芽肿体积显著大于同期对照组的肉芽肿,增大率分别为24.48%和26.37%(P<0.01)。结论ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后表现出Th2优势应答的免疫学特征,表明ICOS在血吸虫病免疫病理中具有重要作用。

细胞信号转导抑制剂介导Th1/Th2免疫偏移对血吸虫虫卵肉芽肿的影响

目的 观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(P13-K)特异性抑制剂(分别为tyrphostin-25、D-sphingosine和wortmannin)对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变的影响,并探讨其作用机制。 方法 于小鼠感染日本血吸虫后第35天起,经尾静脉分别注射3种信号转导分子抑制剂,连续5 d。在小鼠感染后6和8wk,观察小鼠肝肉芽肿病变,并用ELISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠血清IFN-γ、IL-4和一氧化氮(NO)水平。结果 感染小鼠应用TPK和PKC抑制剂后均可显著抑制肝肉芽肿病变,PKC抑制剂可使肉芽肿减少率达56.2％～63.4％(P<0.01)。PKC抑制剂主要抑制Th2细胞因子IL-4的表达,其抑制率为34.1％和65.6％(P<0.01),而对NO水平的检测结果进一步证明了PKC抑制剂对IL-4表达的抑制作用。 结论 在日本血吸虫感染早期应用PKC抑制剂干预T淋巴细胞信号转导可显著抑制小鼠肝肉芽肿病变,其机制可能是由于抑制了Th2优势应答并介导Th2向Th1免疫反应偏移。

共刺激分子B7和CD40对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控作用

为观察干预B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L共刺激信号对Th1 Th2细胞因子表达水平和Th1 Th2免疫偏移的调控作用 ,分别取小鼠感染日本血吸虫后 6、8、1 0和 1 2周的脾淋巴细胞经抗CD80 (B7 1 )mAb、抗CD86 (B7 2 )mAb、抗CD4 0mAb和抗CD4 0LmAb处理后培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN γ和IL 4的表达水平的动态变化并分析干预 2种不同的共刺激信号对Th1 Th2免疫偏移的影响。结果显示抗CD80mAb和抗CD86mAb均能显著抑制IL 4的表达水平 ,尤其是抗CD86mAb对IL 4抑制作用尤为明显。抗CD4 0mAb和抗CD4 0LmAb也能影响Th2细胞因子的表达。其中以阻断CD4 0分子的作用更为显著。结果提示B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L共刺激信号可以调节Th1 Th2细胞因子的表达水平和调控Th1 Th2免疫偏移。干预B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L介导的共刺激信号调控Th1

日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响

目的 观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法 用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 0～ 12w ,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL - 2、IFN -γ和Th2细胞因子IL - 4表达水平。结果 单性感染小鼠 6～ 12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL - 2和IFN -γ ,但无明显动态变化 ,而IL - 4未能测出 ;双性感染小鼠IL - 2和IFN -γ在感染后 4～ 6w开始上升 ,8w达高峰 ,随后下降 ,IL - 4则在感染后 8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高 ,单性感染 8w双性再感染 4w时 ,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL - 2、IFN -γ和IL - 4表达水平即迅速升高且在双性再感染 8～ 12w逐渐增强。结论 日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同 ,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导 ,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原 (SEA)所诱导 。

NO介导Th1/Th2免疫偏移与日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变的作用

目的 观察日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变与一氧化氮 (NO)、Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨NO介导Th1/Th2免疫偏移在血吸虫卵肉芽肿病变中的作用。方法 采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变。用硝酸还原酶法和ELISA夹心法分别检测日本血吸虫感染小鼠 0～ 12周血清及脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO、IFNγ和IL - 4表达水平 ,并进行相关分析。结果 感染小鼠 0～ 12周血清和脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO表达水平与小鼠肝肉芽肿病变动态相一致 ,并呈显著正相关 ,与IFNγ表达水平呈显著正相关 ,而与IL - 4在小鼠感染慢性期 (12周 )呈显著负相关。结论 NO在日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变过程中可能是一种与Th1/Th2细胞因子具有同样重要作用的调节因子 ,并可能是通过调节Th1/Th2细胞因子而发挥作用的 。

免疫增强剂“425”对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变作用的研究

应用免疫增强剂当归根提取液,其化学成分主要含有阿魏酸,VitB_(12)和聚乙炔类化合物(代号为“425”),ip 25mg/d·14,至小鼠感染日本血吸虫后14—34d,肝组织内特异性抗体(IgG)为362.67±162.21—480.00±289.45,显著高于对照组的66.67±39.68—245.33±101.50(P<0.01或0.05)。虫卵肉芽肿病变则明显减弱,小鼠虫卵肉芽肿反应增长比为5.24±1.04—3.95±0.77,对照组为6.69±1.19—5.29±0.94。而且还使肝组织内虫卵抗原水平降低。结果表明,免疫增强剂“425”可诱发宿主产生免疫调节作用,控制虫卵肉芽肿病变。

非游离循环抗原组分对血吸虫感染宿主虫卵肉芽肿保护性免疫调节机制的研究

首次采用特殊方法从感染兔红细胞上分离、纯化两种血吸虫组分抗原SjR47和SjR12，实验结果证明，前者属卵源性抗原，后者为虫源性抗原．两次实验结果均表明，两种组分抗原能诱导出明显的抗病免疫力，实验1获得54．95％－72．36％的肝内减卵率，实验2获得52．57％－57.27％的肝内减卵率和50.73％－74．70％的成熟卵减少率，并均可使肝内肉芽肿病变明显减小，尤以SjR47效果显著．两种抗原诱导的抗肝内肉芽肿保护性免疫调节机制的研究结果表明，两者均能诱导小鼠产生高水平的IgG，测定IgG及其亚类动态显示，在感染后0－12wk时，免疫小鼠血清IgG和IgG_1水平均显著高于佐剂和感染对照组者（P＜0.01），特别是能反映保护性免疫力指标的IgG_1升高非常明显：SjR47免疫鼠的脾T淋巴细胞亚群表型动态研究显示，SjR47免疫鼠的CD4~＋和CD8~＋T细胞在感染4wk时均升高，随后下降．CD4~＋／CD8~＋比值也随时间延长而下降，呈现免疫下调，其变化趋势同肉芽肿病变减小相一致；SjR47免疫鼠的细胞因子水平动态观察结果表明，SjR47免疫鼠后可使TNF－α在小鼠体内的活性水平较平显著上升（成虫期前），减弱了TNF－α对虫卵肉芽肿形成的介导作用以及对雌虫排卵的促进作用，导致肝内肉芽肿病变减小和虫卵减少。本研究结果表明。

细胞信号转导抑制剂对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控

目的 观察酪氨酸蛋白激酶 (TPK)、蛋白激酶 C(PKC)和磷酯酰肌醇 - 3-激酶 (PI- 3K)特异性抑制剂(Tyrphostin- 2 5、D- sphingosine和 Wortmannin)分别特异性抑制 TPK、PKC和 PI- 3K后 ,对小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞经虫卵可溶性抗原 (SEA)诱生 IFN- γ和 IL- 4的表达水平及对 Th1/Th2免疫偏移的影响。 方法 分别于小鼠感染日本血吸虫后 0、4、8和 12周 ,用单克隆抗体分离脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养 ,并进行细胞信号转导抑制试验 ,用 EL ISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养上清 IFN-γ、IL - 4和一氧化氮 (NO)表达水平。 结果 Tyrphostin- 2 5对 IFN-γ和 IL - 4水平的抑制作用均非常显著 (P<0 .0 1) ,D- sphingosine主要影响 IL - 4的表达 (P<0 .0 1) ,而 Wortmannin则主要影响 IFN-γ的表达 (P<0 .0 1) ,对反映 Th1/Th2免疫平衡的 Th2分化指数分析表明 ,D-sphingosine可使 Th2免疫应答优势减弱 ,而 Wortmannin则可使 Th2免疫应答优势增强。对脾 CD4 + T淋巴细胞培养上清 NO水平检测结果显示 ,NO水平动态与 IFN-γ相一致 ,NO水平主要受 TPK抑制剂 Tyrphostin- 2 5和 PI- 3K抑制剂Wortmaninn的影响 ,结合该两种信号分子抑制剂对 Th1/Th2细胞因子表达水平的作用结果分析 ,

日本血吸虫感染动物肝组织内虫卵肉芽肿病变控制方法的研究

应用免疫增强剂“425”和α-干扰素经腹腔注射已经感染日本血吸虫小鼠,用药后14～29天,注射“425”小鼠,肝组织内特异性抗体(IgG)水平显著高于对照组(P<0.01或0.05),肝虫卵内芽肿反应增长比也显著地小于对照组(P<0.01);注射a-干扰素小鼠,肝虫卵肉芽肿反应增长比也显著地小于对照组(P<0.01),但小鼠肝组织内特异性抗体(IgG)水平与对照组之间无显著性差异(P>0.05)说明免疫增强剂“425"和α-干扰素可能通过体液免疫和细胞免疫不同途径的抑制或作用,使虫卵肉芽肿病变减弱。

日本血吸虫感染动物肝组织内虫卵肉芽肿病变控制方法的进一步研究

应用免疫增强剂“４２５”及其主要成分阿魏酸经腹腔分别注射感染日本血吸虫小鼠后１４～２９ｄ，两者均使小鼠肝组织内抗原水平显著地低于对照组（Ｐ均＜０．０５），前者还可使肝组织内特异性抗体（ＩｇＧ）水平显著地高于对照组（Ｐ＜０．０１）；注射α－干扰素对肝组织内抗原及抗体水平均无明显影响；但注射三种不同药物后小鼠肝组织内虫卵肉芽肿反应增长比均显著地小于对照组（Ｐ均＜０．０１）。结果进一步证实了以往的报道，通过体液免疫和细胞免疫不同途径的抑制或调节作用，可使虫卵肉芽肿病变减弱，并提示免疫增强剂“４２５”可能含有同时刺激宿主体液免疫和细胞免疫的成分，阿魏酸还可能有直接影响毛蚴分泌ＳＥＡ的作用。

日本血吸虫SjR47组分抗原对免疫小鼠TNF-α和IL-8影响的研究

为研究日本血吸虫ＳｊＲ４７ 组分抗原诱导的抗虫卵肉芽肿保护性免疫机制，探讨细胞因子ＴＮＦα及ＩＬ８与ＳｊＲ４７ 诱导的保护性免疫力之间的关系，本研究用纯化的ＳｊＲ４７ 组分抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠，攻击感染后０～１２ｗｋ 测定血清ＴＮＦα和ＩＬ８ 水平的动态变化。实验结果表明，ＳｊＲ４７ 可显著影响宿主ＴＮＦα水平的表达，推测ＳｊＲ４７ 诱导的抗虫卵肉芽肿保护性免疫机制可能与宿主体内ＴＮＦα水平的变化有关。

SjR47组分抗原诱导抗日本血吸虫卵肉芽肿病变免疫效应的进一步研究

进一步确定SjR47和SjR12组分抗原的分子基础和性质及其SjR47免疫小鼠后的抗病变免疫效应。方法用SDS—PAGE电泳和酶联免疫印迹试验（ELIB）鉴定SjR47和SjR12两种组分抗原的分子基础和特性；用凝胶大柱制备电泳大量纯化、收集SjR47组分抗原并免疫BALB／c小鼠，攻击感染后6～8wk，取肝组织计算虫卵数并观察肉芽肿病变大小。结果进一步证明从日本血吸虫感染兔红细胞上分离、纯化的47kDa和12kDa组分抗原，前者主要属卵源性抗原，后者主要为虫源性抗原。用纯种小鼠进行抗病免疫实验结果表明，在感染后6～8Wk时，SjR47免疫小鼠肝内总减卵率和成熟卵减少率分别为52。57％～57.25％和50.73％～74．70％；肝内虫卵肉芽肿病变平均体积（101.57士11．51～87．95士19．55，1X105um3）显著小于佐剂对照组（143．54+10．77～110．96+15．34）及感染对照组（173．31+37．24～124．40+54．82）（P均<0．01）。结论进一步证明从日本血吸虫感染兔红细胞上可分离出SjR47（卵源性）和SjR12（虫源性）两种组分抗原，SjR47能诱导感染宿主产生明显的抗血吸虫卵肉芽肿病变保护性免疫力。

二十一世纪医学人才素质教育模式探讨

要培养二十一世纪需要的高素质医学人才,关键是实施素质教育,更新教育理念,发挥综合性大学优势,加强医科与文、理、工科的结合,建立新的教学体系,加强人文教育,促进文、理科教育与医科教育的结合,形成新的医学人才培养模式。

面向二十一世纪高级医学人才知识体系与培养模式探讨

随着 2 1世纪的到来 ,我国传统医学教育的知识体系和培养模式已越来越难以适应现代医学发展和新时期群众对医疗服务的需求。因此 ,必须加强医学生整体素质培养 ,主要是思想道德素质、医学科学素质、人文文化素质、心理素质和身体素质这几个方面的重点培养 ,构建医学生新的知识体系和培养模式 ,以适应医学人才发展的需要。

日本血吸虫组分蛋白SjR47的大量纯化、收集和鉴定

从日本血吸虫感染兔红细胞上分离的SjR47和SjR12两种组分蛋白能诱导宿生产生明显的抗病免疫效应。为大量纯化、收集该两种组分蛋白，我们采用了聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术，并对该法收集蛋白的纯度及其生物活性进行了鉴定。结果表明，该技术不仅可使蛋白收集量达到毫克级水平，而且蛋白纯度较高，还可保持较高的天然蛋白生物活性，经透析处理后蛋白生物活性更高，用以免疫家兔后可获得高效价的多克隆抗体，为今后进一步深入研究该两种蛋白分子的特性奠定了基础。实验结果进一步表明聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术是一种有效的蛋白纯化方法。

速生草植物纤维及其沥青胶浆的热性能研究

为探究速生草植物纤维及其沥青胶浆的热性能,采用物理性能试验、热失重试验和差示扫描量热试验测试并比较竹纤维、芦苇纤维及其沥青胶浆的物理性能和热性能,并与木质素纤维及其沥青胶浆进行对比。结果表明:植物纤维的加入可有效提高沥青的高温性能,但对沥青的低温性能有轻微的抑制作用;各路用植物纤维在不同温度范围内的质量损失规律一致;3种植物纤维中,木质素纤维的热稳定性最优,竹纤维次之,芦苇纤维最差;植物纤维可有效改善沥青胶浆的热熔融性,在提高沥青胶浆热稳定性的同时降低温度敏感性;竹纤维沥青胶浆具有最优的低温抗裂性和温度敏感性,速生草植物纤维的低温稳定性优于木质素纤维。

提高综合素质 培养跨世纪人才

医学科学是以人为研究和服务对象的，医学生的素质应是一种综合素质，需从自然科学、社会科学和思维科学等不同方面来加以把握。

日本血吸虫卵源性抗原诱导的抗肉芽肿病变保护性免疫调节机制的研究

日本血吸虫卵源性组分抗原ＳｊＲ４７可诱导小鼠产生明显的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力。本文对免疫小鼠脾Ｔ淋巴细胞亚群表型动态和抗体免疫应答进行了研究，结果显示ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞水平，在感染后早期（４ｗｋ）升高，随后下降，至感染后８ｗｋ时，ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞比值＜１．００，呈免疫抑制现象。ＳｊＲ４７免疫小鼠感染后０～１２ｗｋ时血清抗ＳｊＲ４７抗体（ＩｇＧ）水平显著高于抗ＳＥＡ抗体水平，也显著高于同时期的佐剂和感染对照组小鼠抗ＳｊＲ４７抗体水平（Ｐ＜０．０１），进一步测定小鼠血清特异性抗体ＩｇＧ及其亚类表明，ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＩｇＧ１水平升高非常显著。实验结果表明，ＳｊＲ４７免疫小鼠后诱导的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力与细胞免疫及体液免疫均密切相关，其中ＩｇＧ１抗体可能起着重要作用。

重组Sj26(rSj26)抗原免疫酶测定新方法诊断日本血吸虫病的研究

将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和重组Sj26(rSj26)抗原致敏的硝酸纤维素膜片(NCD)用于膜片免疫酶测定(D-IEA),分别检测同批日本血吸虫病人、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人和健康人血清104例的特异性抗体,同时用目测及光密度(OD)值测定两种方法判断反应结果。结果显示,分别采用上述两种抗原检测所获的阳性率或假阳性率间无显著性差异。此结果首次提示rSj26抗原的血清诊断效果与目前血吸虫病血清学方法常用抗原SEA相似。本文报告的免疫酶测定新方法,可同时采用两种方法判断结果,迄今尚未见到类似报道。试验结果均表明用D-IEA检测时显示高度的敏感性(92.1％—94.7％)和特异性(0.0％—2.9％),具有实用价值。