血清IgG4和IgG4/IgG比值诊断Ⅰ型自身免疫性胰腺炎的最佳临界值及性能评价

目的探讨血清免疫球蛋白(Ig)G4水平和IgG4/IgG比值诊断Ⅰ型自身免疫性胰腺炎(AIP)的最佳临界值及性能。方法采用免疫散射比浊法检测47例Ⅰ型AIP患者、109例胰腺胆管恶性肿瘤患者(疾病对照组)及99名正常对照者的血清IgG亚类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清IgG4水平和IgG4/IgG比值鉴别诊断Ⅰ型AIP的效能,计算曲线下面积(AUC)并确定最佳临界值。结果Ⅰ型AIP组血清IgG2、IgG4、IgG水平和IgG4/IgG比值均高于正常对照组(P<0.001);疾病对照组血清IgG1、IgG3、IgG4水平和IgG4/IgG比值均低于正常对照组(P<0.05)。Ⅰ型AIP组中血清IgG4水平升高者占95.7%,明显高于疾病对照组(3.7%)和正常对照组(2.0%)(P<0.001);疾病对照组和正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析显示,血清IgG4鉴别诊断Ⅰ型AIP的AUC为0.992,最佳临界值为1740 mg/L,敏感性、特异性和准确性分别为97.9%、96.2%和96.5%;IgG4/IgG比值鉴别诊断Ⅰ型AIP的AUC为0.988,最佳临界值为0.103,敏感性、特异性和准确性分别为97.9%、93.8%、94.5%。血清IgG4与IgG4/IgG比值鉴别诊断Ⅰ型AIP的AUC差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清IgG4水平及IgG4/IgG比值对于诊断Ⅰ型AIP均有重要价值。

等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型

目的了解人群CYP2C19基因型的分布,评价等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型。方法等位基因特异荧光PCR法和金标准Sanger DNA直接测序法检测356名供者外周血CYP2C19基因型,实验采用同步盲法。结果 CYP2C19*1/*1型、CYP2C19*1/*2型、CYP2C19*2/*3型、CYP2C19*3/*3型、CYP2C19*2/*2型及CYP2C19*1/*3型的频率分布:使用PCR荧光法检测时分别为46.6%(166/356)、33.2%(118/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、10.7%(38/356)及6.7%(24/356);采用DNA测序法时分别为46.3%(165/356)、33.4%(119/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、11.0%(39/356)及6.5%(23/356)。两种方法检测CYP2C19基因型具有一致性(P=0.392),且一致性较好(Kappa=0.987);两种方法基因型检测结果一致率为99.2%。结论为保障医疗安全,临床需开展CYP2C19基因型检测;等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型简便可靠。

正常人群血清甲胎蛋白和癌胚抗原参考范围的建立

目的建立正常人群血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的参考范围。方法采用电化学发光免疫分析技术对3222例健康体检人员(其中男880人、女2342人,年龄从20到93岁)的血清AFP和CEA进行检测,以百分位数法(≤P95)计算血清AFP及CEA的参考范围。结果血清AFP和CEA的检测结果均呈正偏态分布,参考范围分别为≤6.12ng/ml及≤3.94ng/ml。CEA测定男女组参考范围分别为≤4.65ng/ml和≤3.37ng/ml,男性组显著高于女性组(P<0.001)。血清AFP及CEA浓度均随着年龄增加而显著升高。结论 AFP应按年龄分组建立参考范围,CEA则应按年龄和性别分组建立参考范围。

结核分枝杆菌H37Ra免疫小鼠后细菌在体内定植的研究

目的:了解H37Ra(人型结核分枝杆菌标准无毒株)免疫小鼠后在体内生长情况。方法:将H37Ra和BCG分别皮内接种C57BL/6小鼠,免疫后15天、30天及60天,取稀释小鼠脾脏和肺脏匀浆接种罗氏培养基,培养18天后计菌落数(CFU)。结果:免疫后15天、30天及60天,H37Ra在小鼠脾脏、肺脏定植的平均Log10CFU为1.95、1.57、2.54和1.37、1.08及0.94;BCG在小鼠脾脏、肺脏定植的平均Log10CFU则为1.72、1.39、1.06和1.16、0.96及0.50。免疫后15天及30天,脾脏及肺脏定植的H37Ra和BCG无显著性差异(P>0.05);免疫后60天,脾脏及肺脏定植的H37Ra显著多于BCG(P<0.05)。H37Ra和BCG在脾脏定植的细菌数显著多于肺脏(P<0.05)。结论:H37Ra在C57BL/6小鼠体内至少可以存活2个月。

结核菌H37Ra和BCG感染巨噬细胞的实验研究

目的:探讨H37Ra和BCG诱导巨噬细胞产生一氧化氮(NO)的能力,细菌在巨噬细胞内生存和破坏巨噬细胞的能力。方法:H37Ra和BCG分别感染BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、RAW264.7细胞株及THP-1细胞株,24 h后取培养上清液,Griess法检测NO的释放量;分别于感染后的0、4 d及7 d用1%Triton X-100裂解巨噬细胞后接种罗氏培养基,培养18 d后计数菌落形成单位(CFU);同时于每个时间点,用MTT法检测巨噬细胞存活率的变化。结果:H37Ra和BCG均可诱导BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、RAW264.7细胞株及THP-1细胞株产生多量的NO,两组均显著高于对照组(P<0.05);H37Ra感染组稍高于BCG感染组,但差异无统计学意义(P>0.05);H37Ra和BCG均可在巨噬细胞内生存繁殖,H37Ra或BCG的感染均降低巨噬细胞的存活率,随着感染时间的延长细菌破坏巨噬细胞的效果越来越显著。结论:H37Ra和BCG均可增强巨噬细胞的抗微生物活性,它们对巨噬细胞均具有一定的毒力;H37Ra的毒力低于BCG。

结核活疫苗的研究进展

近年研究较多的结核活疫苗主要有重组卡介苗、减毒牛分枝杆菌和减毒结核分枝杆菌,另外对田鼠分枝杆菌和猿分枝杆菌也有所研究.大多数结核活疫苗在动物模型中的免疫效果低于或相当于卡介苗,只有极少数的免疫效果优于卡介苗.

r干扰素抗结核免疫作用的研究进展

r干扰素是重要的Th1型细胞因子，它可通过促进T细胞的增殖和分化，激活巨噬细胞，参与结核病的肉芽肿免疫反应等多方面发挥抗结核免疫作用。这些使得r干扰素在抗结核免疫治疗方面的研究受到重视，并取得一定的成功。

北京地区孕妇TORCH感染的检测

目的通过北京地区孕妇TORCH感染的筛查，分析其与妊娠年龄的关系．方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA），对高龄（35～50岁）与适龄（20～34岁）的妊娠妇女分别进行弓形虫（TOX）、风疹病毒（RV），巨细胞病毒（CMV）和单纯疱疹病毒（HSVI＋I）IgM抗体检测。结果孕妇TOX，RV，CMV和HSVI＋I的阳性率分别为0．17％（19／11275），O．38％（48／12596），0．41％（56／13717）和0．36％（39／10974），其中高龄孕妇组TORCH—IgM抗体的阳性率（0．65％，0．73％，0．77％和0．73％）均显著高于适龄孕妇组（O．06％，0．30％，0．32％和0．27％）（X^2检验，P〈0．05）．结论高龄是孕妇发生TORCH感染的一个独立高危因素，应加强高龄孕妇的产前筛查，提高出生人口的质量．

结核菌H37Ra免疫小鼠后机体抗结核细胞免疫功能的研究

目的探讨小鼠皮内接种H37Ra后,细菌在体内的定植及机体能否产生针对结核菌的免疫力。方法用H37Ra皮内免疫小鼠后15、30、60 d,检测结核菌在小鼠体内脏器的定植;免疫后第30、60天,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后的增殖转化刺激指数、ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后IL-2、sIL-2R的表达量。结果小鼠脾、肺脏中有结核菌定植,并至少存活60 d;脾淋巴细胞30、60 d的刺激指数分别为(2.81±0.63)、(2.16±0.52),与BCG皮内接种组无显著性差异,与未免疫组有显著性差异(P<0.05);脾淋巴细胞IL-2、sIL-2R表达量分别为(126.88±8.11)、(91.26±7.29)pg/m l和(138.58±7.67)、(127.09±5.47)pg/m l,与BCG皮内接种组、未免疫组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论H37Ra免疫小鼠后能诱导机体产生特异性的抗结核免疫力,且免疫效果略优于BCG。

智能终端泛在化情形下的教学模式

当前我国基础教育信息化已进入关键发展期，发展重心需要从建设向深层次应用转移。教育信息化必须以学校为切入点，深入到课堂教学中，探索适用于智能终端泛在化情形下的教学模式，将技术、教学法与学科整合。在基于理论总结和大量教学实践的基础之上，本文提出六种教学模式，以期为一线教育工作者在实际教学工作中提供参考。

应用非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测人巨细胞病毒UL97基因H520Q突变

目的建立非标记探针高分辨率熔解曲线分析技术(HRMA)检测人巨细胞病毒(HCMV)UL97基因H520Q突变。方法构建HCMV UL97野生型以及H520Q突变质粒,非标记探针HRMA分型技术检测H520Q突变。结果直接从PCR产物得到的熔解曲线峰形无法区分野生型及H520Q突变型,应用非标记探针HRMA技术可以明显增加实验的敏感性及准确性,可成功区分从野生型到含有不同量的H520Q突变的基因型。结论非标记探针HRMA技术是一个敏感、经济的检测H520Q突变的基因分型方法。

皖南地区乙型肝炎病毒基因型和亚型的分布特征

目的:研究皖南地区人群乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)基因型和亚型流行及分布情况。方法:采用HBV基因型和亚型特异性引物PCR法,对皖南地区319例HBV DNA阳性患者进行基因型和亚型的检测。结果:皖南地区319例HBV感染者中,可检出基因型285例,检出率为89%,其中B型162例(57%),全部为Ba亚型;C型49例(17%),其中C1亚型38例,C2亚型9例,未分型2例;B+C混合型74例(26%)。B型感染者与C型感染者血清HBVDNA水平差异无统计学意义(P>0.05),但均高于B和C基因型混合感染患者(P<0.01)。结论:皖南地区人群HBV感染的基因型主要为B型、B+C混合型及C型;亚型则以Ba和C1亚型为主。

平板电脑教育教学实践成功应用的学校案例剖析——丰师附小数字课堂与数字文化实践之思考

随着教育信息化建设的不断发展,信息技术对教育教学影响的广度和深度正日益加深,但纵观国内发展,理论研究与观摩示范性偏多,而落地实践常态化应用偏少。丰师附小是教育信息化应用实践进程中的一个典型,在以平板电脑这一可移动、可便携智能终端的支持下,丰师附小实现了信息技术面向主课堂、服务主课程的探索,走出了一条信息技术融合教育教学实践的路子,形成了独特的"丰师现象"。该文主要分析了"丰师现象"成功的关键要素,可以归结为校长信息化领导力、教师专业化发展、以课题研究为引领的教研方式以及对技术在教育中作用的理性认识等几个方面。该文通过"丰师现象"看技术与教育整合在该校的实践走向,可归结为新型的教与学方式,数字课堂与数字文化的构建等几个方面。

智能终端支持的信息技术与课程深度整合趋势研究

我国中小学的信息技术与课程深度整合正在向与具体学科相结合,向主课堂、主课程方向迈进,这需要新的技术环境做支撑,日益广泛涌现的智能终端及其整合一体化的网络化服务环境是必然的选择。当前,由于其前所未有的良好互动性、便携性、丰富的应用程序和网络化服务,平板电脑无疑是最好的适宜教育教学应用的智能终端形态之一。该文从信息技术与课程整合发展的视角,融合代表性的平板电脑形态iPad及其关联服务的支撑能力,阐述平板电脑驱动的信息技术与课程深度整合的发展趋势,并基于作者团队的研究与实践所提出的代表性模式阐述这一趋势的深刻内涵。

开启未来教育之门——数字化教学实践与反思

随着社会的进步和技术的发展，越来越多的中小学开始尝试各种类型的数字课堂解决方案。这既是课程改革的必然趋势，也是帮助下一代应对时代挑战的必然选择。作为研发数字化教学解决方案的科研机构，我们在开展大量前期研究的基础上，得出了建立平板电脑数字化学习环境的五大必要条件（以苹果iPad产品为例）。iTeaCh课堂互动教学平台。iTeach课堂互动教学平台是师生开展课堂教学活动的有效支撑。通过该平台，教师可以随时获取分布在后台系统的各类教学资源，包括课件资源、题库资源、学生历史评价信息等，并用手中的iPad将教学信息即时发送给学生。

中央区淋巴结清扫术治疗甲状腺微小癌的价值

目的探讨分析中央区淋巴结清扫术治疗甲状腺微小癌的价值。方法选择在本院进行治疗的甲状腺微小癌患者321例,选择时间为2012年1月-2018年4月,所有患者行中央区淋巴结清扫术治疗,分析患者的治疗效果。结果本组321例患者的并发症发生率为1.869%(6例),其中感染1例,出血2例,喉返神经短暂麻痹1例,一过性甲状旁腺功能低下2例。321例中,术后病理证实有180例出现淋巴结转移情况,占比56.1%。随访1-6年无复发。结论通过对甲状腺微小癌患者进行中央区淋巴结清扫术治疗,并发症发生率低,同时发现,中央区淋巴结转移率较高,具有一定的临床使用价值。也同时说明微小癌并不完全等于低危癌。

血清IgG4、IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值在米库利兹病诊断中的价值

目的评价血清IgG4、IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值鉴别诊断米库利兹病（MD）和原发性干燥综合征（pSS）的价值。方法回顾性研究2012年7月至2016年7月在北京大学人民医院进行IgG亚类检测的186例患者，包括42例米库利兹病患者和144例原发性干燥综合征患者。血清IgG亚类检测采用德国西门子公司BNⅡ仪器及其免疫散射比浊法试剂。部分患者同时使用间接免疫荧光法进行血清抗核抗体（ANA）的检测，使用免疫印迹法进行血清抗SSA抗体和抗SSB抗体的检测。定量资料采用中位数（四分位距）的方式表示，两组间的比较采用Mann-Whitney U检验。分类变量采用百分比表示，使用卡方检验。以pSS组为对照，分别以MD患者的血清IgG4、IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值绘制ROC曲线，确定最佳临界值及曲线下面积（AUC）。结果MD组的血清IgG4、IgG4/IgG比值、IgG4/IgG1比值的中位数分别为11 200 mg/L（17 330）、0.444（0.314）和1.318 （1.920），高于pSS组的相应中位数329 mg/L（490）、0.016（0.025）和0.023 （0.039），差异有统计学意义（Z分别为－9.368、－9.560和－9.571，P均〈0.001）。ROC曲线分析显示以pSS组为对照时，血清IgG4、IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值诊断MD的最佳临界值分别为1 870 mg/L、0.111和0.206，相应的AUC分别为0.976、0.985和0.986。AUC比较显示，血清IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值的AUC相比，差异无统计学意义（Z＝0.283，P＝0.777），均高于血清IgG4的AUC（Z分别为2.360和1.975，P分别为0.018和0.048）。MD组血清ANA、抗SSA抗体和抗SSB抗体的阳性率分别为10%、6.7%和0%，低于PSS组的85.8%、72.3%和38.3%（χ^2＝71.340、44.773、16.792，P均〈0.001）。结论对于鉴别诊断MD和pSS，检测血清IgG4、IgG4/IgG比值和IgG4/IgG1比值均具有重要的价值，血清IgG4/IgG比值或IgG4/IgG1比值的诊断性能优于IgG4。

人巨细胞病毒UL97基因耐更昔洛韦突变检测的研究

目的了解造血干细胞移植受者人巨细胞病毒（HCMV）UL97基因耐更昔洛韦（GCV）突变情况。方法前瞻性收集2008至2010年在北京大学人民医院血液病研究所行骨髓干细胞移植术后血浆HCMVDNA阳性时间至少持续2周的患者43例，其中男29例，女14例，平均年龄21岁。利用实时荧光定量PCR检测HCMVDNA的负荷，收集49份血浆标本检测UL97耐GCV突变。应用改进的聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析方法（PCR—RFLP）检测UL97M460V／I、H520Q、A591V、A594V、L595S／F及C603W共8种常见耐GCV突变；使用PCR直接测序法（PCR—DS）检测UL97耐GCV突变；建立扩增阻滞突变系统实时PCR方法（ARMSRT—PCR）检测UL97A594V耐药突变。结果PCR—RFLP分析方法未检测出8种已知的UL97耐GCV突变。PCR—DS方法未检测到已知的uL97耐GCV突变，新发现UL97R494P、T502A、N558D及G561S突变。成功建立UL97A594VARMSRT—PCR检测方法，结合核酸提取试剂的使用，其检测下限至少达7．5×10^2拷贝数／ml，检测筛选的临床标本发现2例患者为阳性，UL97A594V耐药突变率为4．7％（2／43）。结论构建的ARMSRT—PCR方法具有较高的敏感性，可用于临床监测UL97A594V耐药突变。