维拉帕米对铜绿假单胞菌群体感应抑制作用的体外研究

考察维拉帕米对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)群体感应(Quorum sensing,QS)的抑制作用。测定维拉帕米最小抑菌浓度(Minimal inhibit concentration,MIC);构建培养环境,考察维拉帕米对PA生长的影响,绘制生长曲线;毒力因子表达实验中,分别考察维拉帕米对PA弹性蛋白酶表达、蛋白水解酶表达和绿脓毒素表达的影响。结果表明,维拉帕米MIC_(50)为128μg/mL,MIC_(90)为512μg/mL,最低抑菌质量浓度范围为128~512μg/mL时,具有较好抑菌活性;生长曲线表明,维拉帕米质量浓度为16μg/mL时,开始抑制PA的生长,随着浓度的增加,抑制作用逐渐增大;当维拉帕米质量浓度为512、256、128、64、32、16μg/mL时,明显抑制弹性蛋白酶表达(P<0.01),质量浓度为8μg/mL时,对弹性蛋白酶有一定抑制作用(P<0.05),维拉帕米质量浓度为512、256、128、64、32μg/mL时,明显抑制蛋白水解酶的活性和绿脓毒素的表达(P<0.01),当质量浓度为16μg/mL时,对蛋白水解酶活性和绿脓毒素的表达有一定抑制作用(P<0.05);维拉帕米对QS的抑制有浓度依赖。维拉帕米对PA的QS有明显抑制作用,体外可明显抑制PA生长,可作为抗菌增效的潜在开发药物。

钙离子拮抗药调控群体感应系统对铜绿假单胞菌毒力因子表达的影响

目的:考察钙离子拮抗药(CCB)硝苯地平、维拉帕米、地尔硫[艹卓]调控铜绿假单胞菌(PA)群体感应系统对毒力因子表达的影响。方法:倍比稀释法测定CCB对PA的最小抑菌浓度(MIC)和生长抑制;测定CCB对PA绿脓毒素、弹性蛋白酶、蛋白水解酶表达的影响。结果:硝苯地平、维拉帕米、地尔硫[艹卓]对PA均有抑制作用,硝苯地平的MIC_(50)为64μg·ml^(-1),MIC90为256μg·ml^(-1),MICr_(ange)为64~256μg·ml^(-1);维拉帕米的MIC_(50)为128μg·ml^(-1),MIC90为512μg·ml^(-1),MICr_(ange)为128~512μg·ml^(-1);地尔硫[艹卓]的MIC_(50)为256μg·ml^(-1),MIC90>512μg·ml^(-1),MICr_(ange)≥256μg·ml^(-1)。生长抑制实验中,与对照组相比,硝苯地平、维拉帕米、地尔硫[艹卓]浓度≥16μg·ml^(-1)可显著抑制PA的生长(P<0.05或P<0.01),随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强,其中硝苯地平的抑制作用最强。毒力因子表达实验中,与对照组相比,硝苯地平、维拉帕米、地尔硫[艹卓]浓度≥16μg·ml^(-1)可显著影响绿脓毒素、弹性蛋白酶、蛋白水解酶的表达(P<0.05或P<0.01),且随着浓度的增加,影响作用增强,其中硝苯地平的影响作用最强。结论:CCB可抑制PA生长,调控PA的群体感应系统从而影响毒力因子的表达,可作为抗菌增效的潜在药物。