基于转录组学探讨心力衰竭和认知障碍的共同分子特征

目的 利用生物信息学技术探究心力衰竭(heart failure,HF)和认知障碍共同的生物学过程及基因特征,为后续分子机制研究提供思路。方法 从基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)下载HF数据集GSE116250和认知障碍数据集GSE122063,鉴定出共同差异表达基因后,进行基因本体论(gene ontology,GO)富集分析,再应用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选出中枢基因,在外部HF数据集GSE57338和认知障碍数据集GSE33000中验证中枢基因的表达,从JASPER和RegNetwork数据库中获得潜在的转录因子(transcription factor,TF)和微小RNA(micro RNA,miR)构建分子共调控网络。结果 共筛选出387个上调和388个下调差异基因(differential expressed genes,DEGs),主要富集在发育过程、细胞运动调节和主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ类蛋白复合物组装通路上。通过PPI网络鉴定出8个中枢基因(HLA-F、HLA-E、HLA-B、HLA-DRA、B2M、HLA-DQA1、HLADQB1、HSPA1A),主要通过内源性和外源性抗原加工和提呈通路激活免疫应答。在共调控网络中,FOXC1、GATA2、NFIC、NFYA、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)1、miR-10是调控中枢基因的关键TFs和miR,潜在的NF-κB1/HLA-E/miR-10调控轴被认为在HF与认知障碍发展中发挥着重要作用。结论 本研究结果表明免疫调节可能在HF患者发生认知障碍的过程中发挥重要作用,可为研究“心-脑轴交互作用”提供新见解,但仍需进一步的分子生物学验证及人群研究证据。

烹调油烟与女性肺癌关系的Meta分析

目的探讨烹调油烟与女性肺癌的关联程度。方法采用Meta分析的方法,对在国内外公开发表的8篇有关烹调油烟与非吸烟女性肺癌的流行病学研究文献进行综合定量再分析。根据资料一致性检验,采用固定效应模型计算总OR值。结果烹调油烟接触与非吸烟女性肺癌之间总的合并OR值为2.94,其95%CI为2.43～3.56,差异有显著意义(χ2=120.64,P<0.01)。结论烹调油烟与女性肺癌具有高度的联系,是女性肺癌的重要危险因素。

实时定量PCR 2^(-△△Ct)法检测非小细胞肺癌HER2基因的过表达

背景与目的正确评价HER2基因表达的状况对于肿瘤的施治具有重要的指导意义。以往的评价大多基于免疫组织化学法,但结果变异性大。本研究旨在探讨实时定量PCR 2^(-△△Ct)法检测非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)HER2基因表达的可行性。方法采用实时定量PCR 2^(-△△Ct)法同时检测212例肺癌组织和与其匹配的非肿瘤组织HER2基因的表达,评价过表达水平。结果肺癌组织中HER2基因的表达水平高于非肿瘤组织(T=67,P<0.05),HER2基因的过表达率为34.0%。结论实时定量PCR2^(-△△Ct)

肺癌EGFR基因突变检测方法的研究进展

表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因突变与肺癌病人对抗肿瘤药物-吉非替尼的敏感性有关。而肺癌的前期临床试验表明，在含铂类药物联合化疗失败后，吉非替尼仍有12％-18％的客观有效率，疾病控制率在50％左右，中位生存期约为7个月左右，受试者的症状改善且安全性良好，所以EGFR基因突变检测对于临床医生进行肺癌的个体化治疗具有重要的参考价值。关于EGFR基因突变检测的方法，文献报道主要来源于国外，但当前仍然没有一种完全适用于临床的方法。现就肺癌EGFR基因突变检测方法的研究作一综述。

PCR-SSCP检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的敏感性分析

目的探讨分析PCR-SSCP检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的敏感性。方法应用PCR-SSCP检测36例非小细胞肺癌标本的突变情况,阳性结果再进行DNA测序。结果通过PCR-SSCP分析,11例存在突变,突变率为30.6%(11/36);PCR-SSCP分析阳性的结果通过DNA测序全为序列异常。结论PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变具有较高的敏感性。

烹调油烟毒性的流行病学研究进展

烹调油烟是一种广泛存在于室内的空气污染物,随着餐饮业的发展,有污染日益严重的趋势。动物实验表明烹调油烟可产生遗传物质损伤和致癌。关于烹调油烟对人类健康的危害,学者们已进行了广泛的流行病学研究,结果显示烹调油烟可引起脂质过氧化,使肺功能和人体免疫功能发生改变,引起染色体损伤,使患肺癌的危险性增加。该文综述了烹调油烟毒性的流行病学研究现状。

槟榔碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察槟榔碱对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度(0、10、30、50、100、300、500μmol/L)槟榔碱对MCF-7细胞增殖的影响,Hoechst 33342染色和流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Bax,Bcl-2和P53蛋白表达。结果:低浓度(0、10、30、50μmol/L)槟榔碱不影响细胞的增殖和凋亡;而高浓度(100、300、500μmol/L)槟榔碱呈浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖、诱导MCF-7细胞凋亡、提高P53和Bax蛋白表达、降低Bcl-2蛋白表达。结论:高浓度槟榔碱抑制MCF-7细胞增殖、诱导凋亡,其机制可能与提高P53和Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达有关。

氮芥所致DNA损伤分子标志物探讨

目的 利用烷化剂的毒理机制 ,评价生长抑制和DNA损伤 (GrowtharrestandDNAdamage,Gadd)基因的表达作为DNA损伤的分子标志物的可行性。方法 通过烷化剂类药物氮芥诱导人肝瘤HepG2细胞 ,运用RT -PCR的方法检测Gadd基因的表达水平 ,同时佐以MTT试验、单细胞凝胶电泳试验来分析氮芥对细胞的毒性作用和DNA损伤程度。结果 氮芥能诱导Gadd基因不同程度的表达 ,但随着浓度和时间的增加有由表达增强逐渐转为抑制的趋势 ;氮芥对人肝瘤HepG2细胞能产生明显的DNA损伤作用 ,有浓度依赖关系 (rs=0 5 91 ,P <0 0 1 ) ;氮芥对细胞有毒性作用 ,不同浓度的氮芥 (0 5～ 4 0 μg/L)使细胞存活率从 97%下降到 5 2 %。结论 Gadd基因的表达可以作为判断DNA损伤的比较敏感的分子标志物。

长链非编码RNA LOC100294362对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA LOC100294362在乳腺癌组织及细胞系中的表达情况,观察LOC100294362对乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的影响,并探索其可能的作用机制。方法采用定量反转录PCR(q RT-PCR)方法检测乳腺癌组织及细胞系中LOC100294362的表达水平;MCF7细胞转染过表达或干扰LOC100294362后,采用MTT法和Transwell小室法检测上调或沉默LOC100294362对MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响,Western blot法检测p53蛋白表达。结果与正常组织及细胞相比,LOC100294362在乳腺癌组织和细胞中显著高表达;过表达LOC100294362导致MCF-7细胞增殖和侵袭能力增加,p53蛋白表达降低;沉默LOC100294362导致MCF-7细胞增殖和侵袭能力受到抑制,p53蛋白表达升高。结论 LOC100294362可能通过抑制p53蛋白的表达从而促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭。

PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变

目的分析PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变的敏感性。方法应用PCR-SSCP检测36例肺癌标本的突变情况并与其它文献进行比较。结果在36例肺癌标本中,有11例存在突变,突变率为30.6%(11/36),其中男性2例,女性9例。结论PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变具有较高的敏感性,与其它文献报道一致。

PCR-SSCP检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的筛检试验评价

目的:评价PCR-SSCP筛检非小细胞肺癌(NSCLC)ECFR基因突变的临床应用潜力。方法:分别采用DNA测序法和PCR-SSCP分析对一定数量的NSCLC标本进行EGFR基因突变检测,以DNA测序结果为金标准,计算PCR-SSCP法的灵敏度、假阴性率、特异度、假阳性率、约登指数、粗符合率、预测值和似然比等指标;同时随机抽取20%的样本,重新进行PCR-SSCP分析,计算两次结果的Kappa指数值。结果:PCR-SSCP分析的灵敏度为97.2%,假阴性率为2.8%,特异度为94.3%,假阳性率为5.7%,约登指数为0.915,粗符合率为94.8%,阳性预测值为77.8%,阴性预测值为99.4%,阳性似然比为17.1,阴性似然比为0.5,前后两次PCR-SSCP分析的Kappa指数值为0.81(P<0.05)。结论:PCR-SSCP检测NSCLC EGFR基因突变具有较高的真实性、可靠性和实用性。

高通量筛选DNA加合物位点方法的探讨

目的探讨建立一种高通量的筛选DNA加合物结合位点的方法。方法以烷化剂氮芥处理人肝瘤HepG2细胞形成DNA加合物模型,利用基因表达系列分析技术(serrialanalysisofgeneexpression,SAGE)对连接介导聚合酶链式反应(ligationmediatedPCR,LMPCP)进行改良,以改良后的方法进行检测。结果PCR扩增产物大小约为75bp,与理论设计相符合。结论该方法的设计合理、可行。

生长抑制和DNA损伤基因表达对氮芥所致DNA损伤的监视作用

目的探讨生长抑制和DNA损伤(growtharrestandDNAdamage,Gadd)基因表达对DNA损伤的监视作用。方法以1、5ng/μl的烷化剂氮芥处理人肝癌HepG2细胞3、24、48h后提取细胞总RNA,运用逆转录(RT)-PCR方法检测Gadd基因的表达水平。结果分别用1ng/μl氮芥处理肝癌细胞3、24、48h和分别用1、5ng/μl氮芥处理肝癌细胞24h,Gadd基因的表达都呈现由增强(P<0.05)转为抑制的趋势,但两者均高于阴性对照水平(P>0.05)。结论Gadd基因表达能够监视氮芥所致的DNA损伤。

八氯二丙醚对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨八氯二丙醚的免疫毒性。方法 采用经口灌胃染毒法 ,分别测定了给药 1w和 2w后小鼠的体重、脾脏、胸腺的重量 ,小鼠外周血T淋巴细胞α -醋酸萘酯酶ANAE阳性率。结果 给药 2w ,高浓度 (6 0 0mg kg)组小鼠脾脏系数明显减轻 (P <0 .0 5 ) ,其它浓度组相对于阴性对照组表现为脾脏系数有减轻趋势 (P >0 .0 5 ) ;给药 1w ,高浓度 (6 0 0mg kg)组小鼠T淋巴细胞ANAE阳性率增高 (P <0 .0 5 ) ,其它浓度组相对于阴性对照组有增高趋势 (P >0 .0 5 ) ;给药 2w ,各浓度组小鼠T淋巴细胞ANAE阳性率降低 (P <0 .0 5 )。结论 脾脏是八氯二丙醚的主要作用免疫器官 ,且在一定剂量范围内八氯二丙醚对脾脏有免疫抑制作用 ;八氯二丙醚对T淋巴细胞有免疫抑制作用。

衡阳市大学生性观念、性行为的调查

目的了解衡阳地区大学生的性观念、性心理和性行为状况,使性教育工作更具针对性、时效性和科学性。方法采用自行编制的调查问卷对衡阳市南华大学的432名在校大学生进行无记名问卷调查。结果44.2%的男生和46.6%的女生在大学谈过恋爱,其中52.3%的人是因为“相互爱慕”而发生感情;43.0%的男生和79.3%的女生认为童贞“非常重要”,而二者为整个调查人数的57.6%;有58.1%的大学生对于婚前性行为抱着“双方愿意就行”的态度;1.6%的人认为婚前同居“应受处分”,而55.6%的人认为只要“双方愿意就行”;关于恋爱中的性行为,分别有23.1%和8.7%的学生为单纯的拥抱和接吻,较为亲密的“性爱抚”和“性关系”发生率分别为2.1%和3.6%;大学生发生同居的占9.5%。结论大学生的性观念趋于开放和多元化,但大部分大学生的性观念未出现偏离。

提高医学硕士研究生实践能力的有效途径探索

医学是一门实践性很强的学科,要求医学教育不仅要重视基础理论教育,更要重视实践能力的培养。研究生实践能力的缺乏,将严重影响到我国高层次创新人才的培养,阻碍整个国家科研创新能力的提高。本文以医科硕士研究生为研究对象,分析目前医学硕士研究生实践能力不足的原因和现状,提出一系列提高研究生实践能力的具体措施。

高果糖饲料诱导SD大鼠氧化应激及对其脂质代谢的影响

目的探讨高果糖饲料诱导SD大鼠氧化应激和对其脂质代谢的影响。方法实验大鼠分为2组熏分别用普通饲料和高果糖饲料喂养8周,检测大鼠空腹血糖(FBG)、血胰岛素(FSI)、血脂、总抗氧化力(T鄄AOC)、丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)等。结果高果糖饲料组胰岛素敏感指数(ISI)低于普通饲料组(P<0.01),甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL鄄C)升高(分别为P<0.01,P<0.05和P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL鄄C)降低(P<0.05),T鄄AOC、SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01)。结论高果糖饲料可诱导SD大鼠产生氧化应激,引起脂质代谢紊乱。

在新的公共卫生形势下流行病学课程教学改革刍议

流行病学是预防医学的主导学科，它的发展状况影响着整个预防医学的发展与水平。为了更好地适应当前和今后疾病防制形势的需要，本文对流行病学学科的定位与流行病学课程教学体系的科学设置进行了深入的剖析，并提出了可行的建议，力争能提高流行病学教学的时效性和实效性。

盐酸氮芥抑制人肝癌HepG2细胞生长的机制探讨

目的探讨盐酸氮芥抑制人肝癌HepG2细胞生长的可能机制。方法以盐酸氮芥处理人肝癌HepG2细胞,运用DNA片断化分析、流式细胞术检测肝癌HepG2细胞的凋亡和细胞周期的改变。结果 DNA片断化分析显示没有出现典型"梯形"条带,流式细胞术显示各浓度组细胞凋亡率之间差异无显著性(P>0.05),但有明显的细胞周期阻滞(S期和G2期)。结论盐酸氮芥对人肝癌HepG2细胞的生长抑制主要通过细胞周期的阻滞发挥作用。