基于氧化应激介导NF-κB通路研究ALDH2基因表达对氯胺酮相关性膀胱炎的影响

目的:研究乙醛脱氢酶(ALDH2)基因表达对氧化应激介导的NF-κB通路在氯胺酮相关性膀胱炎(KIC)中的影响。方法:将SV-HUC-1细胞分为不同浓度氯胺酮组(0 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L),诱导48 h后检测ALDH2蛋白表达量;然后将SV-HUC-1细胞构建分为对照组(si-NC组、OE-NC组)、ALDH2沉默组(si-ALDH2组)、ALDH2过表达组(OE-ALDH2组);分别用完全培养基和氯胺酮(1 mmol/L)诱导刺激细胞48 h,检测每组细胞内炎症因子和炎症蛋白水平。结果:蛋白质免疫印迹法(western blotting)显示经氯胺酮(0.5 mmol/L、1 mmol/L)处理后的ALDH2蛋白相对表达量显著高于0 mmol/L组(P<0.05);进一步在氯胺酮(1 mmol/L)诱导后的组中比较发现,si-ALDH2组炎症细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)的表达较si-NC组显著增加(P<0.05);OE-ALDH2组IL-1β及IL-6的表达较OE-NC组显著减少(P<0.05);si-ALDH2组中炎症蛋白核因子-κB(NF-κB)、环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达量均较si-NC组升高(P<0.05);OE-ALDH2组中炎症蛋白NF-κB、COX-2、iNOS的表达量均较OE-NC组降低(P<0.05)。而在对照组(0 mmol/L)中,siALDH2组与si-NC组,OE-ALDH2组与OE-NC组比较,炎症因子和炎症蛋白水平比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:ALDH2基因可在KIC的发生中发挥一定的抗炎保护作用。

aldh2基因表达对氯胺酮诱导的小鼠膀胱炎症及纤维化的影响

目的:探究乙醛脱氢酶2(aldh2)基因表达对氯胺酮诱导的小鼠膀胱炎症及纤维化的影响。方法:首先将8周龄ICR雄性野生型(WT)小鼠共20只随机分为氯胺酮(50 mg/kg)组和生理盐水组,分别诱导4周和8周。取出各组小鼠膀胱,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测各组WT小鼠aldh2 mRNA的表达情况。随后再选取ICR雄性aldh2基因敲除型(KO)与WT型小鼠各20只,分别随机分为生理盐水对照组和氯胺酮诱导组(50 mg/kg)。在第4周和8周时,取出膀胱组织用于检测其炎症和纤维化水平。结果:qPCR显示经氯胺酮处理后的WT小鼠膀胱aldh2 mRNA的相对表达量(1.84±0.24)显著高于生理盐水组(1.02±0.15)(P<0.01)。进一步在氯胺酮诱导组的比较中发现,KO小鼠较WT小鼠体重增加缓慢(P<0.01),并且KO炎症细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)及6(IL-6)的表达显著增加(P<0.05);病理组织提示KO小鼠膀胱黏膜屏障消失、炎症细胞浸润、黏膜下层和肌层纤维化增加;蛋白质印迹(Western blot)结果也提示KO小鼠胶原蛋白COL-I的表达量(1.16±0.10)较WT小鼠(0.73±0.07)明显增加(P<0.01);而在生理盐水组中,KO与WT小鼠的炎症和纤维化水平比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:aldh2基因可在氯胺酮相关性膀胱炎(KIC)的发生发展中发挥一定的抗炎抗纤维化的保护作用。