银杏叶提取物对MPP+诱导的中脑多巴胺能神经细胞损伤的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物(EGB761)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用.方法:采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法,分离培养中脑神经细胞,随后进行EGB761及MPP+处理,最后通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)微量比色法,酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学,研究EGB761对MPP+损伤后的中脑原代培养细胞及DA能神经细胞活性的影响,同时进行iNOS免疫细胞化学法,了解iNOS的表达情况.结果:在MPP+诱导的中脑原代细胞凋亡中,MPP+组TH阳性细胞数及细胞存活率均显著低于各EGB761组及阳性对照组(P<0.01).而iNOS的表达则显著多于各EGB761组(P<0.01).结论:EGB761对MPP+诱导的胚胎大鼠中脑原代培养细胞损伤具有保护作用,且此作用有随剂量的增大而增加的趋势.

银杏叶提取物对大鼠中脑原代细胞的作用

目的:观察银杏叶提取物(EGB761)对中脑原代培养细胞的作用.方法:采用大鼠胚胎中脑原代细胞培养法,培养了中脑神经细胞,再将细胞分为对照组、阳性对照组(神经生长因子,NGF组)、实验组(EGB761组),给予EGB761和NGF进行配组干预,然后观察细胞生长状况,同时运用MTT(四唑盐)比色法检测神经细胞活性;用抗酪氨酸羟化酶(TH)对多巴胺(DA)能免疫细胞化学染色,比较各组阳性神经元数目及突起的变化情况.结果:实验组细胞生长旺盛,轴突延长明显.MTT法测得细胞A值,实验组0.677及免疫细胞化学TH阳性细胞数(实验组61.90)与空白对照组(A值0.596,TH阳性细胞数50.88)相比差异显著(P<0.05),但与阳性对照组比较二者均无统计学意义(P>0.05).结论:EGB761对中脑原代培养细胞有一定的保护作用.

银杏叶提取物防治帕金森病的研究进展

帕金森病(Parkinson's disease;PD)是中老年人神经系统常见的一种慢性退行性病变,以进行性运动迟缓、肌肉僵直、震颤及运动障碍为主要临床症状.其发病机制目前认为主要与黑质-纹状体系统多巴胺(DA)和乙酰胆碱(Ach)功能平衡失调有关.银杏叶(Ginkgo biloba)也称白果叶,作为药用已有几千年历史.银杏叶提取物(Extract of ginkgo biloba;EGB)具有清除氧自由基、拮抗血小板活化因子(PAF)、扩血管、降血脂等作用.90年代初,德国正式批准EGB为脑功能障碍的治疗药物[1].本文就EGB防治PD及其作用的药用机制综述如下.

银杏叶提取物对胚胎大鼠中脑原代细胞及多巴胺能神经元活性的影响

背景:银杏叶提取物具有清除自由基和过氧化脂质,对抗兴奋性神经递质释放等多种药理活性。目的:观察银杏叶提取物EGB761对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinum,MPP+)及左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)干预后的中脑原代细胞及多巴胺能神经元是否具有保护作用。方法:分离培养SD胚胎大鼠中脑神经细胞,分组培养:空白对照组、MPP+组、L-Arg组、MPP++L-Arg组、MPP++EGB761组、MPP++EGB761+L-Arg组。结果与结论:①细胞A值:MPP+组、MPP++L-Arg组显著低于空白对照组、L-Arg组、MPP++EGB761组及MPP++EGB761+L-Arg组(P<0.05),MPP++L-Arg组低于MPP+组(P<0.05),MPP++EGB761+L-Arg组低于MPP++EGB761组(P<0.05)。②酪氨酸羟化酶阳性细胞数:MPP+组、MPP++L-Arg组显著低于空白对照组、L-Arg组、MPP++EGB761组及MPP++EGB761+L-Arg组(P<0.05),MPP++L-Arg组低于MPP+组(P<0.05),MPP++EGB761+L-Arg组低于MPP++EGB761组(P<0.05)。③细胞一氧化氮水平:MPP+组、MPP++L-Arg组显著高于空白对照组、L-Arg组、MPP++EGB761组及MPP++EGB761+L-Arg组(P<0.05),MPP++L-Arg组高于MPP+组(P<0.05),MPP++EGB761+L-Arg组高于MPP++EGB761组(P<0.05)。说明L-Arg可加重MPP+对多巴胺能神经元的损伤作用,EGB761对损伤后的胚胎大鼠中脑原代培养细胞有保护作用,此作用可能是通过抑制诱导型一氧化氮合酶活性降低一氧化氮产生完成的。

原儿茶酸防护百草枯致胎鼠中脑细胞损伤实验研究

目的观察原儿茶酸(PCA)对百草枯(PQ)所致胎鼠中脑神经细胞损伤的保护作用。方法取胚胎大鼠进行中脑神经细胞分离培养,随机分为空白对照组、阳性对照组、PQ组及PCA高、低浓度组(100μmol/L和50μmol/L),分别给予神经生长因子(NGF)、PQ和PCA进行配组干预,接种第6天除空白对照组,另四组均加入PQ终浓度为800μmol/L。接种第7天观察细胞生长状况。四唑盐(MTT)比色法检测神经细胞活性,抗酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光染色法测定多巴胺(DA)能神经元数量;TH免疫荧光染色比较各组阳性神经元数目及细胞核、轴突的变化情况。结果与空白对照组、阳性对照组、PCA组比较,PQ组细胞核固缩、破裂,细胞凋亡率升高;PCA高、低浓度预处理后,细胞存活率增加(P<0.05),细胞轴突损伤减少,细胞凋亡率降低,且具有量-效关系。结论 PCA对PQ诱导的中脑神经细胞凋亡具有抑制作用,该作用有浓度依赖性,提示PCA对胎鼠中脑神经细胞及DA能神经元有一定的保护作用。

帕金森病的研究现状与进展

帕金森病病因及发展机制等问题迄今为止尚存一些需要探讨的问题。笔者就本病的病因、发病机制、临床诊断及治疗等研究 ,及目前国内外概况与进展 。

复方丹参滴丸对家兔血脂水平和颈动脉粥样硬化斑块的影响

目的:探讨复方丹参滴丸对喂饲高脂饲料后家兔血脂水平和颈动脉硬化斑块的影响。 方法:48只家兔随机分为5组:正常对照组、动脉粥样硬化模型组、辛伐他汀组、复方丹参滴丸大、小剂量组。正常对照组喂饲基础饲料,其余4组均于每日喂饲40g高脂饲料,不足部分给予基础饲料,治疗组同时给药,辛伐他汀剂量为4mg/kg,小剂量复方丹参为0.013g/(kg·d),大剂量为0.117g/(kg·d);分别于实验前、实验12周末,经耳缘静脉抽 血,测定血脂含量。取血后空气栓塞处死家兔,迅速剥离颈动脉,进行病理学检查。 结果:复方丹参滴丸能显著降低实验家兔血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL),升高血清高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)。并能减低血管内膜厚度(intima thickness,IT)及内中膜的厚度(intima-medium thickness,IMT)及其比率。与模型组相比辛伐他汀组及复方丹参小、大剂量组对内中膜厚度的抑制率分别为32％,24％,41％。 结论:复方丹参滴丸能减低实验性家兔血脂水平,抑制颈动脉粥样硬化的形成。

银杏叶提取物对百草枯致PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨百草枯(PQ)对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物(EGB761)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法MTT比色试验检测细胞活性;乳酸脱氢酶(LDH)测定细胞损伤程度;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;caspase-3免疫细胞化学染色观察细胞凋亡.结果40mg/L EGB761对300μmol/LPQ作用于PC12细胞24h,具有一定的保护作用;EGB761可明显抑制PQ诱导的PC12细胞LDH的释放(0.25±0.01)(与PQ组比较,P<0.05);EGB761可降低PC12细胞的凋亡百分率,PQ组凋亡百分率为66.7%,使用EGB761保护后凋亡百分率降为17.1%;并可减少PQ诱导的PC12细胞caspase-3过度表达.结论EGB761可减轻PQ诱导的PC12细胞损伤和凋亡,该作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关.

复方丹参滴丸对动脉粥样硬化家兔颈动脉血管壁血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的观察复方丹参滴丸对家兔实验性颈动脉硬化(atherosclerosis,AS)斑块的形成及颈动脉壁血管细胞黏附分子-1(vasculercelladhesionmolecule-1,VCAM-1)表达的影响。方法选取体质量1.8～2.3kg的新西兰大耳白家兔,48只随机分为6组正常对照组、AS模型组、辛伐他汀组、复方丹参滴丸大、中、小剂量组。正常对照组喂饲基础饲料,其余5组均于每日喂饲40g高脂饲料(最后1个月减量为20g),不足者给予基础饲料。辛伐他汀组给予4mg/(kg·d),复方丹参滴丸小、中、大剂量组给予复方丹参浸膏0.0130.039,0.117g/(kg·d)。饲喂3个月后处死动物,从颈总动脉分叉处连续横断切片,苏木素-伊红组织化学染色,计算机图像扫描,定量分析颈AS斑块的大小及斑块占管腔的面积;采用免疫组化及Western杂交方法测定颈动脉壁VCAM-1的表达。结果复方丹参滴丸可明显消退颈AS斑块,大、中、小剂量组VCAM-1的阳性表达率分别为(38.5±2.6)%,(43.4±4.3)%,(49.0±3.0)%,均显著低于模型组(74.1±2.8)%,差异有非常显著性意义(F=328.880,P<0.01)。结论复方丹参滴丸能下调颈动脉壁VCAM-1的表达,这可能是其消退颈AS斑块的机制之一。

老年院内感染败血症危险因素与病原菌特点

目的探讨老年院内感染败血症危险因素与病原菌特点。方法对我院1998~2007年68例老年院内感染败血症进行回顾性分析。结果68例老年院内感染败血症中,危险因素包括基础疾病、侵袭性诊疗操作、激素应用及大剂量化疗、住院天数、抗生素使用情况等。68例分离出105株病原菌,革兰阴性杆菌79株（75.24%）;革兰阳性球菌19株（18.10%）;真菌7株（占6.66%）。细菌对绝大多数常用抗生素有严重耐药,且产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌有多重耐药性。大肠埃希菌、肺炎克雷白菌产酶率较高,分别是89.2%、76.9%。结论老年院内感染败血症危险因素多,病死率高。革兰阴性杆菌仍是老年院内感染败血症的主要病原菌,易出现多重耐药,防治老年院内感染败血症的关键是在治疗原发疾病的基础上,加强医院内感染的控制以防止交叉感染,加强抗菌素的合理应用以减少耐药株的产生。

银杏叶提取物对损伤后中脑多巴胺能神经细胞活性的影响

目的探讨银杏叶提取物(EGB761)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)及脂多糖(LPS)损伤后的中脑多巴胺能神经细胞是否具有保护作用。方法采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法,分离培养中脑神经细胞,培养细胞随机分为空白对照组、MPP+组、MPP++EGB761组、MPP++LPS组、MPP++EGB761+LPS组;给予MPP+、EGB761和LPS进行配组干预,然后观察细胞生长状况;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)微量比色法检测细胞活性;酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光法(FITC),比较各组阳性神经元的变化,了解多巴胺能神经元的表达情况;同时硝酸还原法检测培养细胞中一氧化氮(NO)的表达情况。结果空白对照组、MPP++EGB761组:细胞生长旺盛,轴突延长明显;MPP++EGB761+LPS组:细胞生长受抑制,轴突较短MPP+组、MPP++LPS组细胞数量少,仅少数细胞稍有突起,大多数细胞无轴突。MTT法测得细胞吸光度值(A值)、免疫荧光TH阳性细胞表达及培养细胞NO的表达:空白对照组、MPP++EGB761组NO含量与MPP++EGB761+LPS组、MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MPP++EGB761+LPS组NO含量与MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05),MPP+组与MPP++LPS组比较差异亦有统计学意义(P<0.05,见表1)。结论LPS可加重MPP+对多巴胺能神经元的损伤作用,小胶质的活化及其释放的NO有可能参与该细胞凋亡过程。EGB761对损伤后的胚胎大鼠中脑原代培养细胞具有保护作用,此作用可能通过抑制小胶质的活化完成。

银杏叶提取物对损伤后中脑多巴胺能神经细胞活性的影响

目的探讨银杏叶提取物(EGB761)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)及脂多糖(LPS)损伤后的中脑多巴胺能神经细胞是否具有保护作用。方法采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法,分离培养中脑神经细胞,培养细胞随机分为空白对照组、MPP+组、MPP++EGB761组、MPP++LPS组、MPP++EGB761+LPS组;给予MPP+、EGB761和LPS进行配组干预,然后观察细胞生长状况;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)微量比色法检测细胞活性;酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光法(FITC),比较各组阳性神经元的变化,了解多巴胺能神经元的表达情况;同时硝酸还原法检测培养细胞中一氧化氮(NO)的表达情况。结果空白对照组、MPP++EGB761组:细胞生长旺盛,轴突延长明显;MPP++EGB761+LPS组:细胞生长受抑制,轴突较短MPP+组、MPP++LPS组细胞数量少,仅少数细胞稍有突起,大多数细胞无轴突。MTT法测得细胞吸光度值(A值)、免疫荧光TH阳性细胞表达及培养细胞NO的表达:空白对照组、MPP++EGB761组NO含量与MPP++EGB761+LPS组、MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MPP++EGB761+LPS组NO含量与MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05),MPP+组与MPP++LPS组比较差异亦有统计学意义(P<0.05,见表1)。结论 LPS可加重MPP+对多巴胺能神经元的损伤作用,小胶质的活化及其释放的NO有可能参与该细胞凋亡过程。EGB761对损伤后的胚胎大鼠中脑原代培养细胞具有保护作用,此作用可能通过抑制小胶质的活化完成。

潘智敏“五积理论”治疗代谢综合征经验

潘智敏教授在承继古典"五积"学说的基础上,提出"瘀、痰、食、脂、气"致病的新五积理论,并据此研制出"五积方",在指导代谢综合征的治疗上取得良好疗效。

表没食子儿茶素没食子酸酯对原代培养大鼠中脑细胞的作用

目的观察表没食子儿茶素没食子酸脂(Epigallocatechin Gallate,EGCG)对中脑原代培养细胞的作用。方法采用大鼠胚胎中脑原代细胞培养法,培养中脑神经细胞,再将细胞分为空白对照组、阳性对照组、实验组,给予EGCG和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)进行配组干预,然后观察细胞生长状况,同时运用四唑盐(MTT)比色法检测神经细胞活性;用抗酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)对多巴胺能神经元(dopaminergic neurons,DA)行免疫荧光染色,比较各组阳性神经元数目及突起的变化情况。结果实验组(EGCG组)培养细胞生长旺盛,轴突延长,相互交错。MTT法测得细胞吸光度值(A值)及免疫细胞化学TH阳性细胞数实验组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组与阳性对照组(NGF组)比较二者差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 EGCG对中脑原代培养细胞及DA神经元有一定的保护作用。

甲状腺肿瘤微波消融33例临床分析

[目的]探讨超声引导下经皮穿刺微波消融治疗甲状腺结节的临床疗效及安全性。[方法]对33例甲状腺良恶性结节在局部麻醉下经超声引导行穿刺活检后予微波消融治疗,评价消融区的坏死和萎缩程度、消融后甲状腺及甲状旁腺功能、平均住院日以及消融相关的副作用及并发症。[结果]微波消融后超声造影显示消融结节全部丧失血供,术后6个月消融区发生不同程度的萎缩,其中9例结节完全消失,15例结节体积缩小〉50%,4例结节体积缩小25%~50%,5例结节体积缩小〈25%;33例甲状腺结节微波消融术中无严重并发症发生,3例出现恶心、干呕及喑哑,1个月后恢复;5例血FT4略上升,6例TSH略低,术后3个月内均恢复;甲状旁腺功能均未受影响;所有病例均未发生颈部皮肤烫伤、感染,无气管、食管、神经、血管及颈部肌肉损伤和运动障碍。[结论]超声引导下甲状腺结节微波消融治疗安全性高、创伤小、并发症少、恢复快、疗效确切,是一种值得推广的临床治疗方法。