异甘草素通过调节自噬作用减轻动脉粥样硬化大鼠斑块形成

目的 探讨异甘草素(ISL)通过调节自噬作用减轻动脉粥样硬化(AS)大鼠斑块形成。方法 维生素D3联合高脂饮食法建立AS模型,按随机数字法分为模型组、ISL组、ISL+自噬抑制剂组、自噬激活剂组各10只。ISL组灌胃50 mg/kg ISL,ISL+自噬抑制剂组在ISL基础上腹腔注射100 mg/kg自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(MA),自噬激活剂组腹腔注射1 mg/kg自噬激活剂西罗莫司。正常组喂基础饲料相同天数。连续4 w。超声仪检测各组动脉管腔动脉后壁内膜-中层厚度(IMT)、斑块面积(S)情况;全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;苏木素-伊红(HE)染色检测颈动脉病理情况;透射电镜观察颈动脉超微结构;Western印迹检测颈动脉中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白(Beclin1)蛋白情况。结果 模型组出现动脉管壁明显增厚现象,管腔中可见明显的粥样或纤维斑块,内膜中可见白色条纹或黄白色斑块,斑块中自噬体、脂滴有所增多;ISL组和自噬激活剂组动脉壁弹性明显恢复,管腔内脂斑沉淀明显减少,斑块内可见明显的自噬体,可见大量自噬溶酶体;ISL+自噬抑制剂组出现明显的粥样或纤维斑块,自噬小体数量减少、出现大量脂滴。与正常组相比,模型组颈动脉IMT、斑块S水平,血清中TC、TG、LDL-C含量,颈动脉中LC3Ⅱ蛋白水平均明显升高(均P<0.05);与模型组相比,ISL组、自噬激活剂组颈动脉IMT、斑块S水平,血清中TC、TG、LDL-C含量均明显降低(均P<0.05),颈动脉中LC3Ⅱ、Beclin1蛋白水平均明显升高(均P<0.05);与ISL组相比,ISL+自噬抑制剂组颈动脉IMT、斑块S水平,血清中TC、TG、LDL-C含量均明显升高(均P<0.05),颈动脉中LC3Ⅱ、Beclin1蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。结论 ISL能够激活自噬从而减轻AS大鼠斑块形成过程。

血管生成抑制剂ZM 306416对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠的保护作用

目的探讨血管生成抑制剂ZM 306316调节内脏脂肪的功能,分析其对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(non-alcohol fatty liver disease,NAFLD)小鼠的保护作用及可能机制。方法将32只C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为3组:高脂饮食组(含130 kcal l%的脂肪饲料,11只,HFD组)、低脂饮食组(含45 kcal l%的脂肪饲料,11只、LFD组)和高脂饮食-ZM组(添加0.8%ZM 306416,10只,HFD-ZM组),饲养15周,定时检测小鼠体质量。处死小鼠后,检测小鼠血清生物化学指标,包括丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)和游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)水平。采用免疫组织化学分析附睾脂肪组织中血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)阳性细胞数;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组织中相关基因的表达。结果与HFD组相比,HFD-ZM组小鼠体质量[(37.53±3.64)g vs(45.17±3.22)g]、VAT质量[(2.25±0.85)g vs(3.34±0.54)g]、内脏脂肪细胞大小[(7854.9±60.4)mm2 vs(10800.6±52.7)mm2]、vWF阳性细胞[(47.32±6.2)个vs(31.2±5.4)个]、血管密度[(320.47±10.66)%vs(184.26±14.94)%]及附睾组织中血管生成因子VEGF-A mRNA相对表达量(0.54±0.16 vs 0.24±0.12)均显著降低(P均<0.05),而抗血管生成因子TSP-1的mRNA相对表达量(0.32±0.07 vs 0.42±0.14)显著升高(P<0.05);HFD-ZM组小鼠ALT[(122.47±4.11)U/L vs(95.28±2.21)U/L]、AST[(172.17±5.20)U/L vs(124.39±2.54)U/L]、TG[(4.91±1.13)mmol/L vs(3.56±1.07)mmol/L]、FFA[(1640.55±22.51)μEq/L vs(1131.62±18.33)uEq/L]和TC[(8.10±2.11)mmol/L vs(6.11±2.19)mmol/L]水平均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05),小鼠肝小叶及门管区可见少量胶原纤维增生,主要位于小叶中央静脉周围,α-SMA阳性细胞数目显著减少。与HFD组相比,HFD-ZM组脂肪酸氧化基因mRNA相对表达量(CPT-1:1.64±0.17 vs 0.97±0.24;MCAD:1.23±0.18 vs 0.91±0.16)显著升高(P均<0.05)、脂肪形成相关基因mRNA相对表达量(PPARγ:0.63±0.24 vs 1.03±0.27)显著降低(P<0.05)、胆固醇生成相关基因mRNA相对表达量(FXR:0.76±0.03 vs 0.65±0.10;HMGCR:1.04±0.14 vs 0.89±0.17)显著升高(P均<0.05),炎症相关基因(TNF-α:0.57±0.13 vs 1.01±0.23;CD68:1.02±0.19 vs 1.62±0.09;MCP-1:0.59±0.11 vs 1.01±0.09;MARCO:0.54±0.13 vs 1.02±0.12;ICAM-1:0.94±0.20 vs 1.56±0.13;VCAM-1:1.12±0.23 vs 1.89±0.16)和肝纤维化相关基因(TGFβ:0.64±0.16 vs 1.02±0.19;α-SMA:0.66±0.11 vs 1.03±0.06)mRNA相对表达量显著降低(P均<0.05),抗氧化基因(SOD2:0.83±0.12 vs 0.71±0.13)和凋亡基因(Bcl-2:0.78±0.12 vs 0.58±0.03)mRNA相对表达量显著升高(P均<0.05)。结论血管生成抑制剂ZM 306416可通过调控小鼠内脏脂肪生成、调节肝脏脂肪变性来改善内脏脂肪组织功能和脂质代谢,抑制由高脂饮食诱导的小鼠NAFLD。

血清miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP在脓毒症心肌病患者诊断及预后评估中的价值

目的探究血清miR-21-3p、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脑利钠肽(BNP)在脓毒症心肌病(SIC)患者诊断及预后评估中的价值。方法选取2017年8月至2019年12月在青海省人民医院就诊的SIC患者104例作为观察组,同期选取50名健康体检者作为对照组。比较两组血清miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP水平,并采用ROC曲线探究各指标对SIC诊断价值。根据28 d内死亡情况将观察组分为存活组66例及死亡组38例,记录患者白细胞计数(WBC)水平、序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ),探究影响SIC预后的危险因素。结果观察组血清miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-21-3p与IL-10、TNF-α、BNP均呈正相关(r=0.747、0.527、0.765,P<0.05)。在诊断SIC时,BNP的曲线下面积(AUC)为0.932,高于miR-21-3p、IL-10、TNF-α的0.896、0.919、0.866,差异有统计学意义(P<0.05)。存活组的血清miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP、SOFA、APACHEⅡ评分均低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05),两组的年龄、性别、WBC差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析显示,miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP、SOFA是影响SIC患者预后的危险因素。结论血清miR-21-3p、IL-10、TNF-α、BNP与SIC发生、发展相关,可作为SIC早期诊断及预后的标志物。

老年肥厚型心肌病患者并发肺高血压的影响因素及其预测模型的预测价值研究

背景老年肥厚型心肌病(HCM)并肺高血压患者的病死率高,预后差,而目前有关老年HCM患者并发肺高血压的影响因素报道较少。目的分析老年HCM患者并发肺高血压的影响因素及其预测模型的预测价值。方法选取2016年6月-2018年12月于青海省人民医院收治的老年HCM患者80例,根据是否并发肺高血压分为观察组(HCM并肺高血压患者,n=22)和对照组(单纯性HCM患者,n=58)。比较两组患者一般资料{包括性别、年龄、体质指数、病程、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、基础疾病〔包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)、高血压、糖尿病〕}、心功能指标〔包括左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)、左心室收缩末期内径(LVEDS)、左心室射血分数(LVEF)、纽约心脏病协会(NYHA)分级〕、实验室检查指标〔包括总胆固醇(TC)、白蛋白(Alb)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、胱抑素C(Cyc-C)〕。老年HCM患者并发肺高血压的影响因素分析采用多因素Logistic回归分析;绘制受试者特征工作曲线(ROC曲线)以分析预测模型对老年HCM并发肺高血压的预测价值。结果两组患者性别、体质指数、病程、SBP、DBP、基础疾病、LVEDS、TC比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者年龄、hs-CRP、NT-proBNP、Cyc-C高于对照组,LVEDD、LAD长于对照组,LVEF、Alb低于对照组,NYHA分级劣于对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,LVEDD〔OR=1.773,95%CI(1.205,2.609)〕、LVEF〔OR=0.716,95%CI(0.585,0.876)〕、NYHA分级〔OR=1.907,95%CI(1.354,2.686)〕、NT-proBNP〔OR=3.117,95%CI(1.329,7.311)〕是老年HCM患者并发肺高血压的影响因素(P<0.05)。根据多因素Logistic回归分析结果建立预测模型:P=1/〔1+e(7.041-0.573X2+0.334X4-0.646X5-1.137X9)〕,e为自然对数,X2为LVEDD,X4为LVEF,X5为NYHA分级,X9为NT-proBNP。预测模型预测老年HCM患者并发肺高血压的ROC曲线下面积(AUC)为0.755〔95%CI(0.645,0.866)〕,灵敏度为0.727,特异度为0.603。结论LVEDD、LVEF、NYHA分级、NT-proBNP是老年HCM患者并发肺高血压的影响因素,且预测模型对患者具有一定预测价值。