肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制

芒果风味独特、营养丰富,被誉为“热带果王”,但芒果在采后后熟过程中极易腐烂变质,其中由炭疽病引起的腐烂损失最为严重。因此,如何防治芒果采后炭疽病,成为制约芒果产业健康发展的瓶颈问题。以台农1号芒果为试材,研究绿色环保的肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制。研究结果表明:0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处理对芒果炭疽病的防治效果最好,0.03%肉桂精油处理可完全抑制离体芒果炭疽菌的生长和产孢,0.01%、0.02%肉桂精油处理对芒果炭疽菌菌丝有明显的破坏作用;复合处理显著抑制了芒果炭疽病病斑的扩大,提高了抗病相关物质木质素、总酚(TP)和过氧化氢(H2O2)的含量,提高了抗病相关酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)、几丁质酶(CHI)的活性。由此可见,肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果炭疽病有较好的防治效果,一方面是由于复合处理抑制或破坏了芒果炭疽菌菌丝的生长和产孢,另一方面是复合处理诱导芒果果实提高了抗病性。因此,适宜浓度的肉桂精油复合壳聚糖乳液处理为防治芒果采后炭疽病提供了一种绿色新途径,研究结果可为我国芒果采后贮运保鲜产业的发展提供理论依据和应用参考。

杧果果皮蜡质结构对果实抗炭疽病的影响

为了探明杧果果实果皮蜡质结构抗炭疽病菌的作用,对“热农1号”等20个杧果品种进行脱蜡及不脱蜡处理后,采用胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides孢子悬浮液无伤接种,测定比较不同处理发病情况,并利用扫描电子显微镜观察果实表皮蜡质结构变化。结果表明,蓝丁胶粘连脱蜡可破坏杧果表皮蜡质结构,使其片层状蜡层减少,蜡质裂痕增多。热农1号、金香杧、板蒂、澳杧、汤米06、金煌、玉文、椰香、金星、红象牙等10个杧果品种脱蜡处理的病斑直径较不脱蜡处理显著增加。说明脱蜡处理可导致杧果品种发病速度加快、抗病性降低,证实蜡质结构在部分杧果品种果实抗炭疽病菌侵染过程中发挥了物理屏障作用。

杧果MiNPR1抗病基因克隆及生物信息学分析

NPR1是水杨酸(SA)介导的植物抗病通路中的转录共激活因子。本试验采用RT-PCR技术从杧果Mangifera indica叶片中分离得到MiNPR1-1和MiNPR1-2。序列分析显示,MiNPR1-1基因编码氨基酸471个,MiNPR1-2基因编码氨基酸445个。2种MiNPR1蛋白皆含BTB/POZ结构域和锚蛋白重复序列,非跨膜蛋白且无信号肽,为不稳定酸性亲水蛋白。蛋白结构预测表明,MiNPR1蛋白由α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-折叠构成,三级结构与二级结构相符。分析进化关系发现,MiNPR1-1蛋白为单独分支起源,MiNPR1-2与阿月浑子Pistacia vera的XP_031280798.1聚类为一簇。本研究克隆了杧果NPR1基因,预测其编码蛋白特征,为后续研究该基因在杧果上的功能及培育杧果优良抗病品种提供参考。

菠萝黑心病发生过程中AcAPXs的表达分析及克隆

菠萝黑心病(internal browning,IB)严重制约菠萝产业发展,该病害的发生主要是过量活性氧(reactive oxygen species,ROS)引起膜损伤,打破质体多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)与液泡内酚类底物原有的区室化划分,使其接触氧化后聚合成醌类物质。抗氧化清除系统能够清除过量ROS,维持机体内ROS的动态平衡。本课题组前期用抗氧化剂抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)处理采后‘巴厘’菠萝,能有效延缓黑心病的恶化,然而其作用机理尚不明确。抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX,EC1.1.11.1)是I类血红素过氧化物酶,以抗坏血酸作为特定的电子供体,催化过氧化氢转化为水,参与植物的多种发育生理过程和胁迫反应。本研究筛选出6个AcAPX基因,对其黑心病发生过程以及AsA处理后的转录水平进行分析,发现AcAPX1基因在贮藏后期极显著响应AsA处理,9 d和12 d时显著上调表达;相关性分析发现,AsA处理后的菠萝黑心病指数与AcAPX1基因表达水平呈显著正相关。结果表明:AcAPX1显著响应AsA处理,可能在AsA延缓菠萝黑心病中发挥重要作用。为了进一步探究其作用机制,从菠萝果肉中克隆到AcAPX1基因,通过生物信息学分析方法对其理化性质、蛋白结构域等进行分析。结果表明:其开放阅读框长度为753 bp,编码250个氨基酸,蛋白分子量预测为27.41087 kDa,理论等电点为5.52,无跨膜螺旋区,属于稳定亲水性蛋白;氨基酸序列比对分析表明,菠萝AcAPX1与番木瓜、香蕉、椰子、油棕的序列相似性达85%以上,对AcAPX1基因进行功能结构域分析表明其具有血红素结合位点、K^(+)结合位点及底物结合位点(超家族:cl00196),属于植物过氧化物酶超家族的成员。AcAPX1基因的克隆对于研究其在菠萝中抗氧化能力中的分子机制及黑心病的防治具有重要意义。研究结果为进一步探究菠萝AcAPX1基因参与AsA清除ROS,延缓黑心病恶化的分子机制奠定基础。

肉桂精油复合壳聚糖处理对采后杧果的保鲜效果

为了研究肉桂精油复合壳聚糖处理对采后杧果的保鲜效果及抗氧化能力的影响,以“台农1号”杧果果实为试材,经不同浓度肉桂精油复合壳聚糖喷雾处理后,20℃贮藏,定期调查测定果实炭疽病病情指数,果实可溶性糖、可滴定酸含量,果皮颜色b^(*)值和失重率等品质指标,及果肉抗氧化物含量及相关酶活性,并测定肉桂精油对平板上培养的杧果炭疽菌菌丝的作用。结果表明,肉桂精油对平板上杧果炭疽菌适宜抑菌浓度为0.03%。0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处理的保鲜效果最佳,贮藏15 d后果实炭疽病病情指数比对照(清水)降低23.73%,该处理明显提高了果实可溶性糖、可滴定酸含量,延缓果皮颜色b^(*)值和失重率的上升,提高果实抗氧化物——抗坏血酸、还原型谷胱甘肽和类黄酮含量,增强果实抗氧化酶——超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性。说明肉桂精油复合壳聚糖处理对采后杧果有较好的保鲜效果,这与其抑菌作用和提高杧果抗氧化能力密切相关。适宜浓度肉桂精油复合壳聚糖处理有望作为绿色环保方法应用于杧果采后贮藏保鲜。

不同土壤水分含量对杧果盆栽幼苗光合作用、蒸腾和气孔导度的影响

对不同土壤水分含量条件下杧果盆栽幼苗净光合速率、蒸腾速率和气孔导度以及其日变化规律的研究表明:土壤水分含量过高(土壤含水量为33.3%)或明显不足(土壤含水量为17.3%),杧果盆栽幼苗的净光合速率和气孔导度显著降低,但对净光合速率、蒸腾速率和气孔导度的日变化规律影响不大,杧果盆栽幼苗适宜进行光合作用的土壤含水量有一个区间,根据试验可以大致判断为20.2%～25.4%。土壤水分含量过高、正常(土壤含水量为25.4%和22.5%)或轻度不足(土壤含水量为20.2%)对杧果盆栽幼苗蒸腾速率的影响不大,但土壤水分含量明显不足会显著降低其蒸腾速率,土壤含水量与相应的气孔导度表现为较强的相关性。

栀子抗炎、治疗软组织损伤有效部位的筛选研究

报告提取分离栀子中抗炎、治疗软组织损伤的有效成分和有效部位。实验结果表明,G_1、G_(?)、G_6和化学成分A(京尼平甙)具有一定的抗炎和治疗软组织损伤的作用。

11个芒果品种SSR指纹图谱的构建与品种鉴别

以11个有一定代表性的芒果品种为试材,从16对SSR引物中筛选14对多态性引物构建11个品种的指纹图谱。结果共检测出61个片段,其中多态性片段56个,每对引物可以检测到2～10个数目不等的片段,平均为4.4个,片段大小介于100～540bp之间。11个芒果品种的SSR指纹图谱互不相同,可以作为各品种的特定图谱,单一多态性引物能将11个芒果品种区分为2～5个类型,平均为3.3个类型。14对多态性引物中不同的4对核心引物指纹图谱可以将11个品种区分开。

甲硝唑凝胶对兔疥螨和人体蠕形螨的实验治疗和体外杀虫作用

目的：观察甲硝唑凝胶对兔疥螨和人体蠕形螨的治疗作用和体外杀虫作用。方法：采用家兔感染疥螨和离体试验评价甲硝唑凝胶的杀虫作用。结果：甲硝唑凝胶能杀灭兔体的疥螨，对兔疥螨感染后溃烂、皮疹具有明显的疗效。对离体疥螨和人体蠕形螨也具有显著的杀灭作用，４８ｈ内能全部杀灭虫体。

喷施蒸腾抑制剂对毛叶枣叶片光合参数的影响

研究不同蒸腾抑制剂对毛叶枣成熟叶片光合参数的影响。结果表明:喷施蒸腾抑制剂对毛叶枣叶片气孔导度的影响要显著大于对叶片蒸腾速率的影响,对叶片蒸腾速率降低的影响主要在毛叶枣叶片一天中蒸腾作用的高峰时间段,对叶片净光合速率基本没有影响;土壤墒情对毛叶枣叶片光合参数的影响要大于蒸腾抑制剂的影响。

杧果炭疽病抗性杂交群体的构建及SSR分子标记鉴定

以对炭疽病高抗的金煌品种为母本,高感的爱文品种为父本构建杧果炭疽病抗性杂交群体,共获得杂交果实219个,培育杂交实生种苗184株。按花朵统计结实率为2.18%。通过对184株杂交种苗进行SSR分子标记鉴定,结果表明,16对引物中15对能够有效扩增产物;12对具有丰富的多态性;8对在父母本之间具有多态性,184株杂交种苗可以确认是真实杂种,应用SSR分子标记技术可以对杧果杂种的真实性进行快速验证。

杧果新品种——‘热农2号’的选育

‘热农2号’是从美国红杧的实生后代选育而成,属实生变异类型。该品种性状表现稳定,成花易,两性花比率高,丰产稳产,较抗炭疽病,属中熟品种。果实椭圆形,平均单果质量228.3 g,果肉黄色,肉质细腻,纤维中等,可溶性固形物含量15.9%,可滴定酸含量0.36%,维生素C含量354 mg·kg-1,可食率65.4%,品质优良,是特色的优良品种。

海洋生物敷料伊特安的止血和促愈合作用

伊特安是采用海洋生物的甲壳提取物甲壳胺经发泡等工艺制成的生物性敷料。本实验采用家兔烫伤皮肤模型,切割静脉压迫止血方法以及皮下埋植观察其吸渗止血、促进愈合和生物相容性。实验结果表明,伊特安能促进愈合作用,缩短创面结痂时间,使创面皮肤组织迅速愈合和较好的吸渗止血作用,且明显优于明胶海绵的吸渗止血作用。伊特安皮下埋植2w能与皮下组织融合,4w后皮肤组织恢复接近于正常皮肤组织,表明该品具有较好的生物相容性。

服他必妥滴眼液的药理学评价(Ⅱ)──对实验性眼炎的治疗作用

采用兔眼前房穿刺模型和辣椒酊刺激性眼炎模型观察服他必妥滴眼液的抗炎作用。结果表明，该品对眼部炎症有较好的治疗作用，与0．025％地塞米松滴眼液相似，并能有效地抑制前房穿刺引起的兔眼房水蛋白质浓度升高。

芒果人工杂交授粉试验初报

芒果人工杂交授粉试验,结果表明,结实率按照花序统计最高达32.3%,按照花朵统计最高达2.18%。

芒果细菌性角斑病菌内切葡聚糖酶基因的克隆与表达分析

由柑橘黄单胞菌芒果致病变种(Xanthomonas citri pv.mangiferaeindicae,Xcm)引起的芒果细菌性角斑病是芒果上的一种重要的细菌性病害。利用同源基因克隆技术克隆了Xcm上内切葡聚糖酶(endoglucanase)基因CEL的全长,经测序后运用多种生物信息学软件对其序列进行分析。结果表明:CEL基因的完整阅读框包含1134 bp,编码377个氨基酸;预测分子量为40.72 kDa;等电点为9.01;不稳定指数39.93,为稳定蛋白;亲水性为–0.081,有信号肽;总磷酸化位点有51个,无跨膜螺旋;在二级结构预测中,α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸结构分别为35.28%、6.10%、16.45%和42.18%。经保守结构域预测,具有Cellulase保守结构域。系统进化树结果显示,该基因的氨基酸序列与X.citri pv.punicae str.LMG 859(CCF67690.1)的亲缘关系最近。以gyrB、GAPHD和rpoD作为内参基因,经qRT-PCR分析CEL在Xcm侵染芒果叶片12h后表达量持续上升,明显高于对照,在72h处为最大表达量,由此推断该基因在病菌侵染时发挥重要作用。

杧果新品种—‘热农2号’

1选育过程‘热农2号’杧果是中国热带农业科学院南亚热带作物研究所于1997年从美国红忙果实生后代群体中选育的优良株系，经多年初级系比观察，发现该品系长势壮旺，成花容易，花期相对较晚，坐果率高。食用风味品质优于当家品种‘紫花杧’，抗炭疽病能力强于大多数红杧品种，且性状稳定，表现一致。

避雨栽培对杧果果实品质和病害的影响

【目的】为了探索我国华南多雨产区杧果高效生产新模式,【方法】在果实发育的前期和全生育期不同阶段采用避雨处理对果实品质、病害以及采后耐贮性的影响进行了研究。【结果】2种处理能有效提高坐果率;全生育期避雨果实可溶性糖含量略有提高,可滴定酸含量显著降低,维生素C含量显著提高,内在品质和采后果实耐贮性明显优于前期避雨和对照;2种处理能有效控制果实病情指数、发病率,尤其是全生育期避雨效果更加显著。【结论】全生育期避雨更有利于降低果实病害,并提高果实的品质和耐贮性。